Medição in vivo do potencial de ação muscular composto em um rato

Coloque um rato de Evans longo anestesiado em uma esteira de aquecimento.

Insira um eletrodo de referência no quarto dedo e um eletrodo de registro nos músculos hipotenares.

Estes são um grupo de fibras musculares na palma da mão que são inervadas pelo nervo ulnar.

Em seguida, posicione um eletrodo de aterramento na parte superior do antebraço, um cátodo estimulante próximo ao cotovelo e um ânodo próximo à axila.

Aplique um estímulo elétrico constante através do cátodo ao nervo ulnar.

Essa estimulação induz um potencial de ação através do axônio, levando à liberação de neurotransmissores na junção neuromuscular.

A liberação do neurotransmissor faz com que a fibra muscular se despolarize e se contraia, gerando atividade elétrica.

Registre a atividade elétrica combinada de todas as fibras musculares, chamada de potencial de ação muscular composto, ou CMAP.

Ajuste a posição do cátodo e estabilize o cátodo com um suporte de eletrodo para obter uma gravação ideal.

Aumente gradualmente a estimulação elétrica até obter uma resposta máxima de todas as fibras musculares.

Antes de iniciar o procedimento, confirme o nível adequado de sedação por retirada do pedal e reflexo da córnea em uma rata Long-Evans fêmea de 12 semanas de idade. Coloque o rato em um tapete térmico controlado por feedback para registrar o potencial de ação muscular composto. Insira o eletrodo de referência através do aspecto dorsal do quarto dedo no eletrodo de registro através do músculo hipotenar. Coloque o eletrodo de aterramento através da pele na parte superior do antebraço entre os eletrodos de estimulação e registro.

Em seguida, insira o cátodo da agulha estimulante percutânea aproximadamente quatro milímetros distal ao túnel cubital no cotovelo e insira o ânodo aproximadamente um centímetro proximalmente através da pele da região axilar.

Em seguida, use um programa de excitabilidade axonal controlado por computador semiautomatizado ligado a um estimulador de corrente constante em um amplificador para aplicar um pulso de onda quadrada de um milissegundo ao nervo ulnar com o eletrodo da agulha catódica e para registrar o potencial de ação muscular composto do músculo hipotenar. Ajuste cuidadosamente o ângulo e/ou a posição do cátodo até obter uma curva de resposta bifásica ideal com uma amplitude consistente e estabilize o cátodo com um suporte de eletrodo reposicionável.

Para o rastreamento de limiar, é extremamente importante que haja uma resposta proporcional ao estímulo. Uma resposta bem-sucedida é indicada por uma forma sigmóide na curva estímulo-resposta.

Para registrar uma curva de estímulo-resposta, aumente incrementalmente a intensidade do estímulo de um impulso de um milissegundo até que uma resposta máxima seja obtida.