in vivo Imagens de cálcio usando sensores de cálcio localizados sinapticamente em Drosophila melanogaster
Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 3:39 min. • July 8th, 2025
Conserte uma mosca com o cérebro exposto em uma câmara de imagem.
A mosca expressa um indicador de cálcio geneticamente codificado, ou GECI localizado nos dendritos do corpo do cogumelo, ou neurônios MB.
Conecte a mosca com fios elétricos e posicione uma agulha de entrega de odor perto de sua antena.
Adicione uma gota tampão no cérebro exposto, posicione a mosca sob um microscópio e conecte a agulha a um sistema de entrega de odor.
Excite o GECI e forneça um estímulo de odor.
O odorante se liga aos receptores de neurônios sensoriais da antena, gerando potenciais de ação.
Os potenciais de ação se propagam dos neurônios sensoriais para os neurônios de projeção, induzindo a liberação de neurotransmissores e facilitando o influxo de cálcio e a fluorescência do GECI nos neurônios MB pós-sinápticos.
Repita com um segundo e terceiro odor.
Em seguida, aplique o primeiro odor com um choque elétrico e o segundo sem.
Finalmente, entregue os três odores sem choques. Registre a fluorescência.
Uma fluorescência reduzida em resposta ao estímulo associado ao choque em comparação com os controles revela plasticidade sináptica induzida pelo aprendizado.
Para visualização dos indicadores de cálcio ba
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