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DOI: 10.3791/50472-v
Shun-Tai Yang1, Ana Rodriguez-Hernandez2, Espen J. Walker1, William L. Young1,2,3, Hua Su1, Michael T. Lawton2
1Department of Anesthesia and Perioperative Care and Center for Cerebrovascular Research,University of California, San Francisco, 2Department of Neurological Surgery,University of California, San Francisco, 3Department of Neurology,University of California, San Francisco
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Descreve-se um método para a criação de um modelo de confiança de hipertensão venosa cerebral no rato adulto. Este modelo tem sido amplamente descrita e testada em ratos. Este novo homólogo nos ratinhos abre a possibilidade de utilização de animais geneticamente modificados e, assim, alarga a aplicação do modelo.
O objetivo geral deste procedimento é criar um modelo confiável de hipertensão venosa cerebral no camundongo adulto. Isso é feito dissecando primeiro a artéria carótida comum e a veia jugular externa para expor ambos os vasos. Em seguida, a anastomose é preparada com a aplicação de clipes temporários e ligaduras.
Em seguida, após a oclusão temporária de cada um dos vasos, é realizada uma otomia de pH e uma otomia de arter correspondentes. Finalmente, uma sutura contínua de 11 zero é executada para criar um bypass de ponta a ponta entre a artéria carótida comum e a veia jugular externa. Em última análise, podem ser obtidos resultados que mostram hipertensão venosa cerebral no camundongo por meio do aumento do olho do camundongo, 24 horas após a cirurgia e por meio da pressão sagital elevada do seio duas
Normalmente, os indivíduos novos neste método terão dificuldades devido à técnica desafiadora necessária para a anastomose e à anatomia do pH de Dimi do símbolo do vaso. Depois de anestesiar o camundongo com flúor 5% ISO e administrar 0,15 mililitros de buprenorfina para controle da dor. Verifique o nível de anestesia picando as patas do camundongo com o camundongo e a fita adesiva dorsal reclinada e adesiva de fixação de seus membros.
Remova o cabelo do pescoço e da parte superior do tórax para manter o mouse hidratado. Durante o procedimento cirúrgico, injete por via subcutânea 0,2 a 0,4 mililitros de solução salina a 0,9%. Comece fazendo uma incisão cervical horizontal na linha média na área inferior do pescoço do mouse.
Depois de aprofundar a ferida, use uma sutura de tração para elevar as glândulas salivares e os tecidos moles cervicais. Em seguida, sob o microscópio. Para evitar tração excessiva e trombose, exponha a veia jugular externa direita ou EJV lateral ao músculo esternal da mastóide CTO, ou como cm.
Disseque cuidadosamente o EJV direito ao longo de seu curso da clavícula até a base do crânio, coagule e divida todos os ramos. Para preparar um comprimento adequado para a colocação temporária do clipe e anastomose lateral à traqueia e medial ao ECM, explore a artéria carótida comum ou CCA. Deve ser cuidadosamente exposto da clavícula até um pouco além de sua bifurcação nas artérias carótidas externa e interna.
Para preparar a anastomose, comece usando 10 zero nylon para ligar o CCA logo proximal à sua bifurcação. Em seguida, o mais próximo possível da clavícula, aplique um clipe temporário sobre o CCA proximal. Uma vez que o fluxo tenha sido interrompido, corte a artéria logo abaixo da ligadura de bifurcação e use solução salina para lavar qualquer sangue restante dentro do lúmen.
Evite a coagulação bipolar aqui, pois a lesão térmica na parede da artéria pode colocar em risco a futura anastomose. Em seguida, para melhorar a visibilidade das bordas da VEJ, use uma caneta azul para marcar a parede medial ao longo do curso da V otomia planejada. Em seguida, use uma sutura de zero 10 para ligar a extremidade distal o mais codal possível e aplique um clipe vascular temporário na extremidade proximal o mais cranial possível para evitar a formação de trombos com uma agulha fina de calibre 30 e seringa de 0,5 mililitro.
Faça uma abertura inicial sobre a área marcada do EJV e imediatamente use solução salina para irrigar o lúmen usando uma microtesoura para fazer uma aresta de corte afiada e limpa, estenda a venotomia até o comprimento. Isso é cerca de duas a três vezes o diâmetro do CCA. Aproxime o final do CCA para o EJV.
Em seguida, faça uma incisão de corte lateral na extremidade doadora do CCA para ajustar o diâmetro ao comprimento do tamanho da V otomia para o CCA para EJV e para a anastomose de Cy. Comece usando 11 náilon monofilamento zero para suturar a parede medial na direção do códrico craniano. Cada ponto interrompido ou contínuo deve ser colocado primeiro de fora na parede venosa e depois de dentro para fora na parede arterial.
Se estiver usando pontos contínuos como etapa final, aperte as suturas. Em seguida, repita o procedimento do mimo ao crânio com a parede lateral de fora na parede arterial primeiro e depois de dentro para fora da parede venosa. Em seguida, remova o clipe temporário da veia e depois da artéria.
O sangue arterial deve fluir para a EJV com pouca ou nenhuma exsudação da anastomose, e qualquer sangramento menor deve parar por conta própria. É melhor evitar o uso de compressão para evitar trombose da veia delicada. Uma vez confirmado o fluxo de Pulte através da anastomose e nenhum sangramento aparente seja observado, use solução salina para irrigar o campo cirúrgico e seis pontos de náilon zero para fechar a incisão cervical.
Após o procedimento, monitore o mouse em uma gaiola individual até que ele esteja totalmente acordado. Capaz de manter uma posição esternal e manter uma frequência cardíaca e respiratória adequadas nos dias seguintes. Verifique se há inchaço, infecção, dor ou deiscência na incisão e forneça analgesia conforme necessário.
Um resultado bem-sucedido para o procedimento demonstrou. Aqui está uma fístula venosa arterial patente que induz hipertensão venosa no cérebro espelhado para validar o modelo. A pressão venosa intracraniana no seio sagital dos camundongos foi inicialmente medida duas, três e quatro semanas após a cirurgia com seis camundongos designados para cada grupo de tempo, conforme mostrado aqui.
Pressão sinusal pós-operatória de duas semanas avaliada em 8,8 mais ou menos 1,2 milímetros. O mercúrio foi significativamente maior do que o mercúrio de 4,7 mais ou menos 1,4 milímetros medido no grupo pós-operatório de três semanas e a avaliação pós-cirúrgica de quatro semanas de mercúrio de 3,9 mais ou menos 0,6 milímetros. No entanto, a técnica complexa necessária para medir a pressão sinusal não é necessária para garantir fístula, patência e hipertensão venosa regularmente.
Em vez disso, o resultado desejado pode ser verificado usando um dos dois métodos. O primeiro examina diretamente a patência da fístula no final do procedimento cirúrgico de duas maneiras, usando uma pinça de joalheiro para obstruir temporariamente o EJV cranial à área da anastomose fará com que o EJV se expanda imediatamente, como mostrado aqui. Porque este ponto é agora o único fluxo de sangue proveniente do CCA.
O segundo teste de permeabilidade da fístula é realizado ocluindo o enxerto venoso distal à anastomose e esvaziando-o lentamente ou ordenhando-o. Uma vez liberada a oclusão, uma anastomose patente deve reabastecer rapidamente o segmento esvaziado. O segundo método para garantir fístula, permeabilidade e hipertensão venosa é identificar sinais clínicos de hipertensão venosa.
Por exemplo, se o modelo estiver funcionando, o olho do camundongo pode aumentar visivelmente 24 horas após a cirurgia devido ao comprometimento da drenagem venosa da cabeça e pescoço, conforme mostrado aqui. Embora ambos os olhos aumentem após a cirurgia, o fenômeno é mais proeminente no lado operado. Depois de assistir a este vídeo, você deve ter uma boa compreensão de como ter um desempenho bem-sucedido.
Esta anastomose tecnicamente exigente que fornece um modelo confiável de hipertensão venosa cerebral na massa adulta.
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