Isolation and Culture of Mouse Primary Pancreatic Acinar Cells

Johann Gout; Roxane M. Pommier; David F. Vincent; Bastien Kaniewski; Sylvie Martel; Ulrich Valcourt; Laurent Bartholin

doi:10.3791/50514

Isolamento e Cultura do mouse primárias células pancreáticas acinares

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Biology

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Isolation and Culture of Mouse Primary Pancreatic Acinar Cells

Isolamento e Cultura do mouse primárias células pancreáticas acinares

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08:58 min

August 13, 2013

DOI: 10.3791/50514-v

Johann Gout^1,2,3,4,5, Roxane M. Pommier^1,2,3,4,5, David F. Vincent^1,2,3,4,5, Bastien Kaniewski^1,2,3,4,5, Sylvie Martel^1,2,3,4,5, Ulrich Valcourt*^1,2,3,4,5, Laurent Bartholin*^1,2,3,4,5

¹INSERM U1052,Centre de Recherche en Cancérologie de Lyon, ²CNRS UMR5286,Centre de Recherche en Cancérologie de Lyon, ³Université de Lyon, ⁴Université Lyon 1, ⁵Centre Léon Bérard

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Nesta publicação, é descrito um procedimento rápido e conveniente para o isolamento e cultura de células acinares pancreáticas primárias do pâncreas murino. Este método constitui uma ferramenta valiosa para o estudo da fisiologia das células primárias normais do pâncreas fresco / não transformada exócrinas.

O objetivo geral deste procedimento é isolar as células ASIN pancreáticas primárias e mantê-las in vitro. Isso é feito extraindo primeiro o pâncreas da casa do rato. Em seguida, as asininas pancreáticas são dissociadas usando uma haase enzimática moderada uma digestão.

Em seguida, as asininas pancreáticas são mecanicamente dissociadas por pipetagem sucessiva. Finalmente, as asininas dispersas são semeadas para mantê-las em cultura. Em última análise, podem ser obtidos resultados que mostram a qualidade da preparação de ASIN R por meio de experimentos de imuno-histoquímica ou imunofluorescência.

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