Isolamento e Cultura de rato adulto Cardiomyocytes de sinalização celular e In vitro A hipertrofia cardíaca

[Narrador] O objetivo geral deste procedimento é produzir uma preparação consistente para a cultura de cardiomiócitos funcionais de camundongos adultos. Primeiro remova o coração do camundongo sob anestesia e canulação. Perfunda o coração e digere com colagenase. Em seguida, dissocie as células e reintroduza o cálcio. Em seguida, semeie as células e cultive os cardiomiócitos primários. Os resultados dos ensaios de western blots e incorporação de leucina tritiada podem demonstrar funções como a ativação da fosforilação de AKT dependente de PI3 quinase e o aumento da taxa de síntese de proteínas induzida pela ouabaína.

- Após o isolamento do coração, ventile rapidamente a aorta de muitos outros vasos, depois manuseie a aorta com muito cuidado e conecte-a rapidamente na primeira tentativa. Com a prática, você será capaz de determinar quando interromper a digestão da colagenase do coração, monitorando com precisão a mudança de cor e suavidade.