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Medição dos Níveis de heme em células de mamíferos Síntese
Medição dos Níveis de heme em células de mamíferos Síntese
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Measurement of Heme Synthesis Levels in Mammalian Cells

Medição dos Níveis de heme em células de mamíferos Síntese

Full Text
12,538 Views
09:43 min
July 9, 2015

DOI: 10.3791/51579-v

Jagmohan Hooda1, Maksudul Alam1, Li Zhang1

1Department of Molecular and Cell Biology, Center for Systems Biology,University of Texas at Dallas

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Níveis alterados de heme intracelular estão associados a doenças comuns, como câncer. Assim, há uma necessidade de medir os níveis de biossíntese de heme em diversas células. O objetivo deste protocolo é fornecer um método rápido e sensível para medir e comparar os níveis de síntese de heme em diferentes células.

O objetivo geral deste procedimento é medir os níveis de síntese de heme em células de mamíferos usando um precursor radioativo específico da síntese de heme. Isso é feito primeiro incubando as células com ácido imunolilina marcado com C 14, que será incorporado ao heme. O segundo passo é coletar as células raspando e depois cortá-las usando tampão de extração heme.

Em seguida, o éter datil é adicionado para extrair o heme e a fase etérea é coletada. A etapa final é lavar a fase etérea com ácido clorídrico para separar as porfirinas do heme. Em última análise, os níveis de síntese de heme podem ser medidos em linhagens celulares, e os resultados mostram os níveis diferenciais de síntese de heme e várias células cancerígenas e células T HK 2 93.

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Molecular Biology 101 Edição heme o nível de síntese do heme células de mamíferos [4- 14 C] ácido 5-aminolevulínico ([ 14 C] 5-ALA) o câncer

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