Name: Parênquima não-invasivo, Vascular e Metabólica alta freqüência ultra-som e Fotoacústica Rat Cerebral Profunda Imagem (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-03-02T13:45:00.000+00:00
Duration: 12 min
Description: Aprenda a realizar imagens não invasivas de alta frequência por ultrassom e fotoacústica do cérebro profundo de ratos para visualizar regiões subcorticais e padrões vasculares. Este método permite estudar funções neurológicas e doenças cerebrais.

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Os autores não têm agradecimentos.

Experimentos necessários para desenvolver o protocolo foram realizadas de acordo com as normas nacionais e foram aprovados pelo comitê de ciência ética local (Comitato di Bioetica di Ateneo), operando dentro da instituição, da Universidade de Turim, Turim, Itália. 1. Preparação <ol><li> Anestesia <ol><li> Colocar o animal dentro da câmara de isoflurano apropriado para anestesiar-lo. </li><li> Encha a câmara com misto O 2 e gás isoflurano para uso veterinário a uma concentração de 2,5% em uma câmara de gás 2 L e esperar por cerca de 3 minutos para o rato para adormecer. Verifique se o efeito da anestesia por uma pitada dedo do pé. </li><li> Uma vez que a anestesia tem efeito, retire o rato e pesar. </li><li> Espalhar uma camada fina de água gel oftálmico solúvel em olhos do animal para as proteger e para manter a hidratação fisiológica ocular. </li><li> Coloque o rato para baixo sobre uma bancada de ultra-som e da estação de imagem fotoacústica. EUordem n para manter o efeito de anestesia, rapidamente posicionar o nariz dentro da máscara apropriada proporcionando um fluxo constante de anestesia (isoflurano a 2% -2,5% em oxigénio de 1 L / min). </li></ol></li><li> Raspar o animal <ol><li> Espalhe uma camada consistente de creme de depilação na superfície da cabeça, com atenção para cobrir áreas orelhas e pescoço circundantes. Deixe o creme agir por alguns minutos e retire com cuidado para fora com uma espátula. Softly remover todos os restos de creme com uma esponja úmida para limpar a pele com precisão. NOTA: A pele animal aprisiona ar que afeta negativamente a aquisição de imagens de ultra-som baseado, assim que tem que ser necessariamente removido, tanto quanto possível. </li></ol></li><li> Posicionando o animal <ol><li> Organizar o animal em uma posição spread-águia. Monitorar os sinais vitais, por meio de sensores de parâmetros vitais apropriadas no tampo (se estiverem presentes). Incline-se as patas sobre os sensores após a aplicação de algumas gotas de eletrodo de creme para uso profissional. NOTA: Durante a anestesia, assegurar que os parâmetros vitais tem valores como se segue: a temperatura corporal do rato ≈ 37,5 ° C, batidas cardíacas por minuto (BPM) varia entre 250 e 350 e a taxa respiratória está compreendida na gama de 40-80 respirações por minuto . </li><li> Finalmente prender os membros com hipoalergênico remendo de seda artificial. Se necessário, a espalhar-se uma fina camada de água gel oftálmico solúvel para proteger os olhos do animal. </li></ol></li></ol> 2. Aquisição de Imagem de Temporal Point of View <ol><li> Posicionando o animal <ol><li> Manter o animal numa posição de bruços, rodar o corpo ligeiramente na lateral, com um ângulo de inclinação de aproximadamente 45 ° com respeito ao eixo do corpo sagital. Use pequenos rolos de gaze de algodão como está a organizar corretamente o descarte (Figura 2a). </li><li> Levante a cabeça de animal e gire-o levemente de um lado (Figura 2a). Use um rolo de algodão como stand manter o focinho bem inserted para a máscara de anestesia. </li><li> Inclinar o tampo de trabalho a um ângulo de cerca de 30 ° em relação ao plano horizontal. </li><li> Ligue o transdutor de imagem a um ângulo de cerca de 30 ° em relação ao plano vertical. </li></ol></li><li> Ultrasonic e aquisição de imagem fotoacústica anatômica e vascular <ol><li> Gire a imagem digitalizar, introduzir a aquisição de imagem Modo B e devidamente definir todos os parâmetros de aquisição de imagem de respeitar possíveis requisitos dados do experimento (Figura 3A). NOTA: Ajuste da frequência de transmissão central tão baixa quanto possível (16 MHz, a Figura 3b), de modo a ter a profundidade de penetração máxima possível para o transdutor. </li><li> Eliminar uma camada consistente (cerca de 1 cm de espessura) de água hipoalergênico ultrassom solúvel gel de transmissão na cabeça do animal (Figura 2b). Cobrir a cabeça do transdutor com uma camada fina do mesmo gel e colocá-lo em contacto com a camada sobre o rat. Use gel quente para minimizar hipotermia localizada. </li><li> Iniciar a aquisição de imagem em modo B e ajustar o posicionamento do transdutor em tempo real, através da identificação de referências anatómicas e centrando a região de interesse para o ponto médio do monitor. Certifique-se de eliminar as bolhas de ar em qualquer nível retido na camada de gel, porque afetam negativamente a aquisição. </li><li> Posicionar o transdutor a alinhá-lo com o eixo virtual que liga o ouvido para o olho (Figura 4a), para se obter um feixe de focalização óptima. Adquirir diferentes pontos de vista do volume do cérebro interno, no sentido horário ou anti-horário de rotação (Figura 4-B e C). </li><li> Eventualmente prender o transdutor em um suporte mecânico para garantir de forma estável a posição e ajustar a orientação de uma maneira bem. </li><li> Assegure-se que a região de interesse cerebral localiza a 10 mm de profundidade em relação à fonte de transdutor de ultra-LASER, a fim de receber um ph óptimootoacústicas sinal de resposta (Figura 5). Em seguida, coloque o indicador de US onda focalização exatamente no centro da área analisada. Nota: Durante a pesquisa de áreas de interesse, evitar a activação do portão opção respiração, a fim de acelerar o processo de posicionamento. </li><li> Entrar no Modo Doppler a cores para visualizar os vasos sanguíneos do cérebro internos de forma sensível alta. </li><li> Uma vez que o posicionamento foi definido de forma adequada para visualizar as regiões queriam, ative a opção portão respiração para evitar efeitos indesejáveis ​​relacionados com o movimento (Figura 6a). </li><li> Escolha o desejado conjunto de parâmetros de aquisição no modo Doppler a cores (Figura 6b) e adquirir imagens nesta modalidade de distinguir velocidades corrente sanguínea e as direções, até vários milímetros de profundidade de penetração. </li><li> Digite o modo pulsado onda Doppler e aquisição de imagens para detectar pulsação do sangue arterial e para diferenciar entre uma artériasveias nd. </li><li> Enter Modo Power Doppler e os parâmetros de aquisição definidos (Figura 7) para efectuar a quantificação do sinal na base do número de eventos de espalhamento causadas pelo movimento de fluxo, e, portanto, a diferenças nas taxas de fluxo avaliadas. </li><li> Entrar no modo de fotoacústica e devidamente refinar os parâmetros de aquisição (Figura 8a) para coletar dados sobre o conteúdo total de hemoglobina no sangue ou grau de oxigenação em uma determinada área. Ao produzir excitação laser em toda uma gama de comprimento de onda (a partir de 680 nm a 970 nm, A Figura 8b), a absorção da hemoglobina total presente em diferentes estados químicas dentro de um tecido pode ser quantificado. Através da realização de compilação de sinal em determinados comprimentos de onda individuais (Figura 8c), que é possível isolar a contribuição de sinal distintos, devido à absorção de oxi e espécies puras de-oxi. </li></ol></li></ol> 3. Criação de Imagens do Point of View occipital <ol><li> Posicionando o animal <ol><li> Manter o animal em uma posição prona, abaixe a cabeça de animal e usar pequenos rolos de gaze de algodão como lateral, está a organizar corretamente o descarte. </li><li> Ligue o transdutor de imagem paralela ao plano transversal da cabeça do animal (Figura 9). NOTA: Neste modo, a aquisição irá ser centrado através do forame occipital na base do crânio. Ao variar o ângulo de inclinação da orientação da sonda (Figura 9), será possível a aquisição de imagens de vasos internos em vistas diferentes, dependendo da configuração de inclinação. </li></ol></li><li> Ultrasonic e aquisição de imagem fotoacústica anatômica e vascular <ol><li> Digite a aquisição de imagem Modo B, definir todos os parâmetros de aquisição de imagem conforme relatado anteriormente (Figura 3) e espalhar as camadas de gel de ultra-som necessárias na sonda e na nuca animal. </li><li> Organizar o transdutor de ficar quase horizontal, em order a ser dirigida ao longo das anatómicas eixo posterior-a-anterior do corpo. Aponte-o para o lado frontal do focinho e incline-o levemente para a frente. </li><li> Iniciar a aquisição de imagens no modo B e modo de cor Doppler (Figuras 3 e 6). Ajustar com precisão a posição do transdutor e remover as bolhas de ar a partir do revestimento de gel, como descrito anteriormente. Se possível, fixar o transdutor em uma posição firme para controlar a orientação de uma forma muito bem e escolher o melhor ângulo de inclinação para adquirir imagens das regiões anatômicas desejados. </li><li> Visualizar os vasos sanguíneos do cérebro internas no Modo Power Doppler, configurando adequadamente os parâmetros de aquisição (Figura 7). </li><li> Localize artérias intensamente pulsava pelo modo Doppler pulsátil. Distingui-las das veias, o que, inversamente, são caracterizadas por baixos níveis de pulsação do fluxo sanguíneo. </li><li> Recolha de sangue de dados velocidades de fluxo e direções no modo Doppler a cores, adaptando adequadamente ACQparâmetros uisition (Figura 6). </li><li> Hemodinâmica cerebral profunda conjunto completo de dados de caracterização, adicionando informações sangue química obtida através da aquisição fotoacústica (Figura 8). Executar esta avaliando em particular a quantidade de parâmetros hemáticas, tais como a percentagem de saturação de O2 e o teor de hemoglobina total (HBT), que são geralmente medido, definindo o comprimento de onda do laser de excitação a 750 e 850 nm (Figura 8c). </li></ol></li></ol> 4. Fim da Aquisição e remoção de animais NOTA: Adequadamente considerar todo o tempo dedicado ao processo de aquisição de imagem (a partir do passo 1 para o passo 3), o qual é sujeito a restrições principais relacionados com a dose do anestésico aplicado ao animal. <ol><li> Guarde todos os dados adquiridos, vire o laser pulsante off saindo do modo de aquisição Fotoacústica e distanciar o transdutor. </li><li> Enquanto se mantinha a animal sob o efeito de anestesia, começar a limpá-lo, removendo cuidadosamente o gel de proteção dos olhos com um cotonete molhado. Use uma espátula e várias toalhas de papel para remover completamente o gel de ultra-som da cabeça e do focinho, em seguida, limpe-os com uma esponja molhada. Tenha cuidado para não danificar a pele raspada delicado. </li><li> Retire o adesivo usado para prender os membros e desconectá-los dos sensores que monitoram os parâmetros fisiológicos. Transferir rapidamente o animal da bancada aquisição de uma gaiola diferente. </li><li> Hospedar o animal em uma gaiola pequena para a recuperação da anestesia. Certifique-se de que os animais não devem partilhar a gaiola durante esta fase, a fim de evitar agressões </li><li> Coloque a gaiola de recuperação sob uma luz infravermelha para manter o animal aquecido. Espere até que ele recuperou a consciência suficiente para manter decúbito esternal. Verifique as condições dos animais saúde gerais, antes de movê-lo para a sala de animais de criação. </li></ol>

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Taxas de publicação deste artigo foram patrocinados pela Visual Sonics.

O protocolo foi optimizado apresentados a fim de proporcionar um desempenho altamente eficaz de imagens do cérebro em animais de pequeno porte. As imagens podem ser adquiridas em diferentes modalidades, seguindo exatamente as indicações sobre os parâmetros de aquisição e o posicionamento do transdutor na foramina crânio. Em particular, o posicionamento no lado temporal é a mais crítica, uma vez que os EUA e o laser tem de ser centrados com tanta precisão quanto possível penetrar correctamente o forame, que é menor do que o occipital. No entanto, graças a essa configuração experimental, características hemodinâmicas relacionadas com concursos fisiológicos ou mesmo patológicos são acessíveis e podem ser avaliadas, mesmo em regiões profundas do cérebro, que geralmente são de difícil caracterização. Desde a aquisição da imagem de sucesso depende da precisão do posicionamento do transdutor, esta dependência tem de ser cuidadosamente levado em conta, pois pode afetar o desempenho de imagem. Por exemplo,algumas estruturas anatômicas de interesse não pode ser completamente incluído no plano de imagem aquisição e sua identificação a partir de imagens que oferecem apenas uma visão parcial pode resultar abaixo do ideal. Além disso, uma aquisição de imagem e US AF realizada em uma modalidade tridimensional (3D Modo) não seria compatível com o ambiente experimental descrito anteriormente, uma vez que requer que o transdutor se mover ao longo de um caminho pré-definido de forma automatizada. Finalmente, devido à variabilidade natural da anatomia, a dimensão de aberturas crânio pode variar significativamente entre animais, tendo, portanto, consequências imprevisíveis sobre o processo de aquisição. Este facto faz com que a qualidade de imagem dependente das características de cada indivíduo. Consequentemente, a impossibilidade de aplicar esta estratégia para alguns animais tem que ser considerado na concepção do protocolo experimental. Especificamente, um notável interesse é dirigido a hemodinâmica, devido ao seu papel fundamental na determinação dabiodistribuição de drogas ou outras moléculas exógenas após administração sistémica 28-29. As implicações aplicativas no campo da Imagem Molecular são muitos, que vão desde a validação de agentes de contraste de imagem piscina de sangue para estudos de distribuição de drogas monitoradas-imagem que requerem induzida por ultra-som BBB abertura 30. Todos esses fins de pesquisa certamente vai se beneficiar da capacidade de invasão mínima do protocolo, considerando-se que, sem qualquer tipo de cirurgia adicional, o risco de morte ou efeitos colaterais indesejados é substancialmente reduzido e monitoramento de longo prazo sobre os mesmos modelos animais é viável. Em resumo, o protocolo apresentado permitirá ao praticante eficientemente imagem e para interpretar correctamente a topografia anatómica e do padrão vascular de tecidos normais ou patológicos cerebrais em-uso investigação modelos animais. Enquanto os métodos atuais são principalmente limitado a imagem tomográfica cortical 25-27, esta definição dá a oportunidade to ilustram vários processos que influenciam a fisiologia cerebral profunda, através da fusão de vantagens concedidas tanto de imagem dos EUA e PA.

Estratégias para descrever minuciosamente características da hemodinâmica do cérebro no sistema nervoso central de animais pequenos são necessários para fazer avançar o campo de neuroscience 1-3. A técnica apresentada demonstra como executar acústica não-invasivo e de imagem fotoacústica no cérebro pequeno animal a fim de examinar a biologia vascular, arranjo e função. Técnicas de imagem Optical permitir a localização de eventos relacionados com a atividade neural 2,4-5 e adquirir simultaneamente os sinais gerados pela hemoglobina, tanto em estados oxigenada e não oxigenados 6. No entanto, devido à absorção e espalhamento fotônico, imageamento óptico puro sofre de baixa resolução espacial e tecido limitada profundidade de penetração 7-8. Por outro lado, a acústica oferecem a oportunidade de realizar imagem mais profunda com maior resolução espacial espaço, mas é impedido por salpico e limitado contraste 9-11. Através da combinação de características de fotônica with ultra-som, técnica fotoacústica melhora tanto de imagem e potencialidades de diagnósticos de métodos únicos 12-16. Imaging Fotoacústica do cérebro tem o potencial para elucidar questões de múltipla em neurobiologia, no entanto, a calota craniana que naturalmente protege o encéfalo, dramaticamente limita tanto a 17-19 penetração nos tecidos fotônicos e ultra-som. Além disso, os ossos promover dispersão de luz e som, resultando em perda de sensibilidade e de imagem aberrações 17-18. Como conseqüência, ultra-som e de imagem fotoacústica cérebro pode ser facilmente realizada em animais recém-nascidos antes de ossificação 20, mas a anatomia profunda e fisiologia do cérebro adulto são claramente acessível apenas após craniotomia 21,22. Infelizmente, a cirurgia necessária para a remoção do crânio é tecnicamente difícil e os seus efeitos podem ser prejudicial para alguns fins experimentais, tornando assim difícil para monitorar a progressão da doença neural nomesmo animal ao longo do tempo. Portanto, um método não-invasivo para a imagem biologia cerebral profunda em pequenos modelos animais é altamente desejável. Na literatura o método de fotões reciclador 17 é relatado como uma forma de reduzir a perda de telefone e aumentar a transmissão através do crânio intactos, melhorando o sinal fotoacústico para ruído (SNR) e o contraste do alvo. O protocolo apresentado tem como objetivo fornecer um método confiável para acústica cérebro subcortical e imagem fotoacústica em roedores de uso investigação (especificamente em ratos), sem qualquer cirurgia invasiva. O procedimento baseia-se no uso de dispositivos portáteis de transdução de ultra-som de alta frequência e de imagem fotoacústica. Em contraste com a tecnologia de imagens tomográficas 23, portátil e transdutores direcionais 24 permitem a seleção de regiões específicas do crânio com espessura naturalmente reduzido, denominado fissuras ou scissures. As fendas principais (forames) presentes no vertebrado umnimal crânio são necessárias para localizar os feixes de nervos, vasos ou outras estruturas que ligam os circuitos internos do encéfalo para outras partes do corpo. As fendas principais são encontrados em aberturas osso de diferentes tamanhos que podem ser explorados como passagens específicas para as ondas de ultra-som e de laser. Tal imagem alvo reduz efeitos de reflexão de ondas causados ​​pelas interfaces de osso e aumenta a sensibilidade, aumentando a profundidade de penetração de imagem. Nesta perspectiva, o transdutor de imagem podem ser dispostos de modo a ser perpendicular às fissuras localizadas no temporal e occipital do lado do crânio (Figura 1), de modo a convergir maximamente o ultra-som e vigas fotónicas sobre estas áreas. Esta orientação aumenta tanto a qualidade do sinal e força o sinal para prosseguir através de uma camada de osso mais fino em relação a outras orientações cranianos. Assim, as ondas transmitidas e reflectidas sofrer um menor grau de espalhamento, permitindo recolha de sinais intensos provenientes de mais profundocamadas de tecido. Ao contrário dos procedimentos anteriores, esta configuração experimental requer que raspa a cabeça apenas animal, enquanto nenhuma outra cirurgia é necessária. Com o protocolo proposto, a imagem latente é realizada a relativamente alta resolução espacial, revelando tanto, estruturas anatômicas de referência específicos e vasos sanguíneos mais profundos do que estado atual de métodos de arte, tudo ao mesmo tempo a pele do animal e do crânio permanecem intactos. Imagens coronais e axiais exclusivos podem ser adquiridos através da exploração de diversas modalidades de aquisição de imagens de ultra-som (B, Doppler, Doppler colorido, modo de onda pulsada) em paralelo à imagem fotoacústica. Um repertório extenso de parâmetros podem ser extraídos a partir dessas imagens, permitindo representação da anatomia vascular do parênquima e ao lado de um conjunto de características que afectam toda a dinâmica de circulação sanguínea. Este protocolo pode ser usado para imagem características básicas parênquima cortical em High Frequency modalidade Ultrasonic B Mode, as artérias carótidas basilar e internos (BA e ICA respectivamente) compondo o Círculo de Willis, a artéria cerebral média (MCA) e outros detalhes do aparelho circulatório. Além disso, o sangue quantificação do fluxo, a média de velocidades de transmissão, descrição direcional movimento e dados de saturação de oxigênio podem ser coletadas de cortical para regiões profundas do cérebro. Esta nova estratégia tem um grande potencial para uma variedade de aplicações e satisfaz a necessidade urgente de procedimentos seguros para descrever características profundas do cérebro que são cruciais em várias patologias. Além disso, devido à sua capacidade de invasão mínima, o protocolo apresentado pode permitir estudos de imagem possíveis inúmeras sobre o sistema nervoso central, particularmente aqueles que necessitam de um acompanhamento a longo prazo ou envolvendo modelos animais patológicas delicados.

<table><tbody><tr><td>Estação de ultrassom e imagem fotoacústica de alta frequência (sistema VEVO LAZR 2100)&nbsp;</td><td>FUJIFILM VisualSonics Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sistema de Anestesia Dupla Compacto Vevo (Versão de Mesa)&nbsp; &nbsp;</td><td>FUJIFILM VisualSonics Inc.</td><td></td><td>http://www.visualsonics.com/anesthesiasystem#sthash.opODt Sht.dpuf</td></tr><tr><td>Gel de transmissão de ultrassom (Aquasonic 100)</td><td>Parker Laboratories Inc.</td><td>01-08</td><td>http://www.parkerlabs.com/aquasonic-100.asp</td></tr><tr><td>ratos Sprague-Dawley</td><td>Charles River Laboratories</td><td></td><td>Três ratos Sprague-Dawley saudáveis de 6 semanas foram comprados da Charles River Laboratories e mantidos em alojamento padrão (ciclos claro-escuro de 12 horas) com ração padrão para roedores e água disponível ad libitum. Fornecido por: http://www.criver.com/</td></tr></tbody></table>

parênquima não-invasivo, vascular e metabólica alta freqüência ultra-som e fotoacústica rat cerebral profunda imagem

Non-invasive Parenchymal, Vascular and Metabolic High-frequency Ultrasound and Photoacoustic Rat Deep Brain Imaging

A fotoacústica e o ultrassom de alta frequência se destacam como ferramentas poderosas para aplicações neurobiológicas que permitem imagens de alta resolução no sistema nervoso central de pequenos animais. No entanto, a neuroimagem transdérmica e transcraniana é frequentemente afetada por baixa sensibilidade, aberrações de imagem e perda de resolução do espaço, exigindo a remoção do couro cabeludo ou mesmo do crânio antes da imagem. Para superar esse desafio, um novo protocolo é apresentado para obter informações significativas sobre hemodinâmica cerebral por meio de imagens fotoacústicas e ultrassons de alta frequência com a pele e o crânio do animal intactos. O procedimento depende da passagem de ondas de ultrassom (US) e laser diretamente através das fissuras que estão naturalmente presentes no crânio do animal. Ao justapor o dispositivo transdutor de imagem exatamente em correspondência com essas áreas selecionadas onde o crânio tem uma espessura reduzida ou está totalmente ausente, pode-se adquirir imagens profundas de alta qualidade e explorar regiões internas do cérebro que geralmente são difíceis de descrever anatômica ou funcionalmente sem uma abordagem invasiva. Ao aplicar este procedimento experimental, dados significativos podem ser coletados nas modalidades sonora e optoacústica, permitindo a imagem do parênquima e da anatomia vascular muito abaixo da superfície da cabeça. Características cerebrais profundas, como convoluções parenquimatosas e fissuras separando os lobos, eram claramente visíveis. Além disso, a configuração de vasos sanguíneos grandes e pequenos foi fotografada a vários milímetros de profundidade, e informações precisas foram coletadas sobre fluxos sanguíneos, velocidades do fluxo vascular e o estado químico da hemoglobina. Esse repertório de dados pode ser crucial em vários concursos de pesquisa, desde estudos de doenças vasculares cerebrais até técnicas experimentais envolvendo a administração sistêmica de produtos químicos exógenos ou outros objetos dotados de propriedades de aprimoramento de contraste de imagem. Em conclusão, graças ao protocolo apresentado, as técnicas de US e PA tornam-se um meio atraente e não invasivo de desempenho competitivo para imagens cerebrais corticais e internas, mantendo um potencial significativo em muitos campos neurológicos.

Este método permite à imagem tanto estruturas de referência anatômicos e vasos sanguíneos específico a relativamente alta resolução espacial, mais profundo do que a técnica atual com a pele do animal e do crânio intacto. Nas nossas condições experimentais, a profundidade do sinal PA é de 4,5 mm e a resolução axial é de 75 um, com um FOV 23 x 15.5 cm. Experiências com Fotoacústica Tomografia modalidade 19 mostrou um valor de resolução &lt;1 mm. A gama de valores de SNR é de 21,6 dB para 23,8 dB (obtidos por 5 pontos diferentes, seleccionados aleatoriamente no tecido cerebral e fundo). Justapor o transdutor no crânio lado temporal, as imagens do cérebro pode ser adquirida como secções transversais ou mesmo coronais com base no ângulo de posicionamento seleccionado do transdutor com um ponto de imagem resultante de vista de lateral (Figura 4). Epidermis, ossos do crânio e material de parênquima estão bem representados na ultra-som B-Mode, uma vez que muito diferentes em termos de acimpendence oustic (Figura 10). Mesmo se sua configuração depende do ponto de vista escolhido, alguns sites de referência anatômicos sobre o parênquima são reconhecíveis, tais como fissuras que separam cérebro porção interna do córtex e do trato óptico característico em forma (Figura 10). Além disso, um grande número de navios são visíveis tanto nas modalidades de imagens de ultra-som e fotoacústica. Interseções característicos da carótida interna Artery (ICA) com outros principais navios de grande porte que funcionam ao longo da superfície lateral externa do cérebro do animal pode ser facilmente reconhecido. Rotas vasculares grandes, como o ICA, fornecer um suprimento de sangue maciça para satisfazer a necessidade neuronal consistente de energia e oxigênio. O ICA, originado na artéria carótida comum (CCA), é executado no lado lateral da cabeça em vários milímetros de profundidade, vai além de todos os seus locais de bifurcação e, finalmente, chega a parte frontal da cabeça. Este fluxo de sangue principal espalha entre intermedicomi porte navios, antes de ser canalizada em arteríolas sempre menores para finalmente nutrem os neurônios. Do ponto de vista temporal, é possível traçar o padrão da Artéria Cerebral Interno, que bifurca-se em embarcações voltadas para frente e lateral do cérebro lateral. Imagens coronais e transversais pode ser adquirido com inclinação diferente do transdutor em relação à direcção do eixo virtual juntando o olho e a orelha do animal (Figura 4). Ao inclinar o transdutor de acordo com as projecções descritas na Figura 4, é possível obter imagens resolvidos da Artéria Cerebral Média (MCA), que surge a partir de ACI e ainda se divide em dois ou mais ramos, que finalmente envolvente lobos corticais (figuras 11 e 12). Os melhores efeitos visuais foram obtidos para MCA com a inclinação da sonda como mostrado na Figura 4c e para ICA como mostrado na Figura 4-B. Imaging acústico à base de Doppler revela pequenos ramos, enquanto a informação de direção da corrente sanguínea é disponíveis graças à aquisição Color Doppler (Figura 13). Recurso artéria MCA é confirmado por ultra-som pulsado Onda técnica (Figuras 14 e 15). Sinal fotoacústico de hemoglobina contida nos glóbulos vermelhos circulantes podem ser detectados e analisados ​​para coletar dados sobre o seu estado oxidativo molecular e para calcular a saturação de oxigênio no sangue (Figuras 16 e 17). Teor de oxigénio hemáticas pode ser correlacionada com dados sonoros, a fim de confirmar a discriminação de sangue arterial do sangue venoso. Ao apontar o transdutor em direção ao forame occipital, a visão é projetada na cabeça plano axial (Figura 9) e este plano de imagem pode ser liquidada em ângulos de inclinação variável. Neste caso, o ponto de vista posterior da imagiologia cerebral pode ser conotado por um de alta profundidade, por causa da entrada occipital maior. O círculo de Willis, uma configuração de recipiente característico no cérebro profundo, pode ser localizada e examinados através da aplicação de todas as técnicas acima mencionadas. Artéria basilar (BA), em execução no lado ventral do cerebelo, eventualmente, leva à encéfalo e simetricamente bifurca-se em dois ramos. Esses dois ramos no cérebro ventral espalhar-se e, em seguida, juntar-se de novo, portanto, a criação de uma estrutura em anel (Círculo de Willis). Este círculo profunda basal é o porão vascular a partir do qual surgem todos os vasos sanguíneos de médio porte, como as artérias posteriores, médio e anterior cerebral (PCA, MCA e ACA, respectivamente), que são os principais efetores de um suprimento de sangue maciço para o cérebro . No Modo Doppler a cores, a identificação dos ramos de tamanho médio é viável e permite a visualização clara dos segmentos vasculares curvas (como o PCA) que entra no Círculo de Willis (Figura 18). nt "&gt; O tecido do parênquima cerebral foi também registado com modalidade PA em projecção occipital (Figura 19) mostram a caracterização vascular na trama espectral (Figura 20). Com este espectro é possível distinguir o sinal obtido a partir de vasos arteriais e venosos. <img alt="Figura 1" src="/files/ftp_upload/52162/52162fig1highres.jpg"> Figura 1: Localização do forame crânio e respectivo ponto de vista para aquisição de imagem A cabeça de rato no perfil (a) e os locais onde o dispositivo transdutor de imagem podem ser colocados para ser justapostas em forame temporais (seta roxa) e sobre o forame occipital. (seta amarela) no perfil (b). <img alt="Figura 2" src="/files/ftp_upload/52162/52162fig2highres.jpg"> Figura 2: eliminação Animal para temporais acquisitio imagemn. (A) A disposição do animal sobre a bancada de aquisição de imagens: após a cabeça de barbear, o animal é colocado numa posição de bruços, com o corpo ligeiramente inclinada de um lado de forma a expor o lado temporal da cabeça. A bancada pode ser, possivelmente, dotado de um dispositivo de aquecimento para manter o corpo quente do animal durante a aquisição. Alguns rolos de algodão podem ser utilizados para obter esta posição, enquanto que os emplastros adesivos prender patas sobre os sensores para a monitorização de sinais vitais. (B) Uma camada de gel de ultra-som consistente cobre a área da cabeça em que o transdutor será posicionado durante o exame. <img alt="Figura 3" src="/files/ftp_upload/52162/52162fig3highres.jpg" width="550"> Figura 3: parâmetros de aquisição de imagem B-Mode. (A) Uma imagem ilustrativa que mostra o painel informando os parâmetros de aquisição importantes utilizados com imagens do cérebro em B-mode. (B) É importante ressaltar que a freqüência de transmissão foi definido em valores baixos (16 MHz) para melhorar a US penetração nos tecidos. <img alt="Figura 4" src="/files/ftp_upload/52162/52162fig4highres.jpg"> Figura 4: aquisição de imagem transversal do forame temporal (a) O eixo de referência virtual juntando a aurícula do olho e do movimento de inclinação (seta vermelha) para variar a inclinação transdutor e do plano de aquisição de imagem; (b) movimento anti-horário com relação a. eixo de referência orelha-a-olho e inclinação variável da posição do transdutor; c) o movimento no sentido horário em relação ao eixo de referência orelha-a-olho e inclinação variável da posição do transdutor. <img alt="Figura 5" src="/files/ftp_upload/52162/52162fig5highres.jpg"> Figura 5: profundidade do foco ideal para USe aquisição de imagem PA. Ao olhar para a área de interesse, a profundidade do foco de imagem (representada por um triângulo amarelo) deve ser fixado em cerca de 10 mm de profundidade a partir da fonte de laser / EUA, a fim de obter um desempenho ideal de imagem. <img alt="Figura 6" src="/files/ftp_upload/52162/52162fig6highres.jpg" width="300"> Figura 6: parâmetros de aquisição de imagem Modo Doppler a cores. (A) Antes de iniciar a aquisição de imagens no modo Doppler a cores, a opção portão respiração pode ser ligado, a fim de evitar o artefato gerado por movimentos respiratórios fisiológicas. (B) Uma tela exemplificando mostrando os parâmetros de aquisição importantes utilizados com imagens do cérebro em Doppler colorido Mode. <img alt="Figura 7" src="/files/ftp_upload/52162/52162fig7highres.jpg" width="300"> Figura 7: Aquisição parâmetros para a imagem latente modo Doppler de potência. Uma imagem ilustrativa mostrando os parâmetros de aquisição importantes utilizados com imagens do cérebro em modo Doppler de potência. <img alt="Figura 8" src="/files/ftp_upload/52162/52162fig8highres.jpg"> Figura 8: parâmetros de aquisição de imagem Modo Fotoacústica. (A) O painel relatando os parâmetros de aquisição importantes utilizados para imagiologia cerebral no Modo Fotoacústica. (B) A aquisição de um espectro fotoacústica, com base num laser de excitação varia de 680 nm a 970 nm, com um intervalo de comprimento de onda de 5 nm (referida como etapa tamanho). (parâmetros c) Aquisição de empregados para a onda único modo Fotoacústica em 750 nm e 850 nm, para a discriminação de sinais de-oxigenados e hemoglobina oxigenada respectivamente. fig9highres.jpg "/&gt; Figura 9:. Aquisição de imagem transversal do forame occipital (a) posicionamento do transdutor no pescoço do animal (seta amarela) e o plano de imagem resultante transversal que praticamente seções da cabeça na direção caudo-rostral; (b) vista posterior do posicionamento do transdutor e imagem plano de aquisição. <img alt="Figura 10" src="/files/ftp_upload/52162/52162fig10highres.jpg"> Figura 10:. Aquisição B-Mode de forame temporais para a individuação de referências anatômicas da epiderme (a), crânio (b) e parênquima (c) podem ser facilmente distinguidas, mas também outras referências anatômicas podem ser detectados, como a fissura ( d) que envolve a porção ventral cerebral profunda e a forma característica do trato óptico (e). ve_content "fo: manter-together.within-page =" always "&gt; <img alt="Figura 11" src="/files/ftp_upload/52162/52162fig11highres.jpg"> Figura 11: aquisição Mode Power Doppler através do forame temporais para a individuação de referências vasculares MCA levantando do ICA no lado temporal do cérebro.. Para obter esse ponto de vista, imagem transversal foi adquirida pela apontando o transdutor sobre o forame temporais e girando-a no sentido anti-horário. <img alt="Figura 12" src="/files/ftp_upload/52162/52162fig12highres.jpg"> Figura 12: aquisição Mode Power Doppler através do forame temporais para a individuação de referências vasculares MCA levantando do ICA no lado temporal do cérebro.. Para obter esse ponto de vista, imagem transversal foi adquirida pela apontando o transdutor sobre o forame temporais e girando-a no sentido horário. Figura 13: aquisição Modo de cor Doppler através do forame temporais para a individuação de referências vasculares MCA levantando do ICA no lado temporal do cérebro.. Informação direcional de corrente sanguínea é expressa por meio de uma barra de escala de cores, a distinção entre os movimentos de fluxo voltadas para o dispositivo transdutor e longe dele. <img alt="Figura 14" src="/files/ftp_upload/52162/52162fig14highres.jpg"> Figura 14: Modo de aquisição onda pulsada através do forame temporais para a individuação de referências vasculares confirmação das propriedades arteriais de sangue que circula no interior dos vasos que foram hipoteticamente identificados como: artérias. Modo de onda pulsada fornece informações sobre a variação das velocidades de transmissão, que pode ser correlacionado para efeito da pulsação cardíaca (mais inteNSE em artérias do que nas veias). <img alt="Figura 15" src="/files/ftp_upload/52162/52162fig15highres.jpg"> Figura 15: aquisição modo pulsado Onda através do forame temporais para a individuação de referências vasculares Identificação por modo de onda pulsada dos vasos sanguíneos como veias, onde o efeito de pulsação cardíaca em velocidades de transmissão é insignificante.. <img alt="Figura 16" src="/files/ftp_upload/52162/52162fig16highres.jpg"> Figura 16: Modo de aquisição Fotoacústica através do forame temporais para a individuação de referências vasculares. Vasos internos do parênquima no lado temporal do cérebro visualizado por B-Mode (esquerda) e de ondas Single Mode Fotoacústica (à direita). As cores da barra de escala refletem diferentes valores de intensidade de sinal fotoacústico, induzidas por uma excitação laser realizado em um comprimento de onda selecionado. Em order para individualizar as veias e artérias, comprimentos de onda de excitação pode ser fixado em 750 e 850 nm, representando os valores para se obter os picos de emissão fotoacústico de hemoglobina desoxigenada e oxigenado, respectivamente. <img alt="Figura 17" src="/files/ftp_upload/52162/52162fig17highres.jpg"> Figura 17: Modo de aquisição Fotoacústica através do forame temporais para oxigenado e oxigenado-de discriminação hemoglobina. Vasos internos no lado temporal do cérebro visualizado por B-Mode (à esquerda) e Modo Fotoacústica Oxy-Hemo (à direita). As cores da barra de escala refletem diferentes valores percentuais de saturação de oxigênio da hemoglobina no sangue. <img alt="Figura 18" src="/files/ftp_upload/52162/52162fig18highres.jpg"> Figura 18: aquisição Modo Doppler a cores através do forame occipital para a individuação de referências vasculares.Segmentos vasculares curvas criando a estrutura porão do Círculo de Willis, localizado no lado ventral do cérebro. <img alt="Figura 19" src="/files/ftp_upload/52162/52162fig19highres.jpg"> Figura 19: Fotoacústica e B-Mode aquisição através do forame occipital para a individuação de referências vasculares. Nell'immagine em modo-B si possono evidenziare le strutture Anatomiche individuabili con la proiezione occipitale e nella corrispondente acquisizione con modalità fotoacustica con rilevamento spettrale tra 670 nm a 980 nm (con passo di 5 nm). <img alt="Figura 20" src="/files/ftp_upload/52162/52162fig20highres.jpg"> Figura 20: Fotoacústica e B-Mode aquisição através do forame occipital para a individuação de referências vasculares. Em questa imaginar viene rappresentato lo Spettro corrispondente alle tre ROIs tracciate um livello del parenchima cerebellare; em particolare sono tracciate um livello di tre strutture vascolari, la cui tipologia si differenzia um livello dell'andamento spettrale (ROIs fuxia e celeste corrispondono um strutture vascolari venose; ROI Gialla corrisponde ad una struttura vascolare arteriosa).

O presente trabalho descreve um novo protocolo para realizar ultrassom não invasivo de alta frequência e imagens fotoacústicas no cérebro de ratos, para visualizar com eficiência regiões subcorticais profundas e seus padrões vasculares, direcionando sinais nos forames cranianos naturalmente presentes no crânio do animal.

Parênquima não-invasivo, Vascular e Metabólica alta freqüência ultra-som e Fotoacústica Rat Cerebral Profunda Imagem

Photoacoustics and high frequency ultrasound stands out as powerful tools for neurobiological applications enabling high-resolution imaging on the central ...

O objetivo geral deste procedimento é realizar ultrassom não invasivo de alta frequência e imagens fotoacústicas no cérebro de ratos para visualizar regiões subcorticais profundas e seus padrões vasculares. Isso é feito primeiro preparando o animal para imagens por meio de depilação e posicionamento adequado do animal. Em uma estação de ultrassom e imagem fotoacústica, bancada, o transdutor é colocado, alinhando-o ao eixo virtual, conectando o ouvido ao olho para obter um feixe ideal.Focalização, o animal é então posicionado para aquisição de imagens a partir da visão temporal. Após a aquisição de imagens anatômicas, as imagens vasculares são adquiridas para visualizar os vasos sanguíneos internos do cérebro, bem como determinar a corrente sanguínea, velocidades e direções. O conteúdo de hemoglobina total no sangue e o grau de oxigenação também podem ser determinados.O animal é então posicionado para aquisição de imagens a partir da visão occipital, seguida de aquisição de imagens anatômicas e vasculares cerebrais ultrassônicas e fotoacústicas. Em última análise, o método fotoacústico é usado para mostrar imagens anatômicas do cérebro e parâmetros vasculares fisiológicos Após seu desenvolvimento. Essa técnica abriu caminho para pesquisadores em neuroimagem explorarem estruturas fisiológicas, vasculares e anatômicas.Este método pode ajudar a responder a perguntas-chave nas doenças cerebrais, como acidente vascular cerebral e degeneração neurológica, uma vez que pode fornecer informações específicas sobre as funções neurológicas. Para começar, coloque o rato dentro da câmara de flúor apropriada para anestesiá-lo conforme descrito no protocolo de texto. Assim que a anestesia fizer efeito, remova o rato e pese-o.Espalhe uma fina camada de gel oftálmico solúvel em água nos olhos do animal para protegê-los e manter a hidratação fisiológica ocular. Em seguida, deite o rato em uma bancada de ultrassom e estação de imagem fotoacústica e posicione rapidamente o nariz dentro da máscara apropriada, proporcionando um fluxo constante de anestesia para raspar o animal. Espalhe uma camada consistente de cabelo, removendo o creme na superfície da cabeça, cobrindo as áreas ao redor das orelhas e pescoço.Depois de deixar o creme agir por vários minutos, retire-o suavemente com uma espátula. Remova suavemente todos os restos de creme com uma esponja úmida para limpar a pele com precisão. Para posicionar o rato, arrume o animal em uma posição de águia aberta.Incline-se a pausa nos sensores de parâmetros vitais na bancada depois de aplicar algumas gotas de creme de eletrodo para monitorar os sinais vitais. Por fim, prenda os membros com um adesivo de seda artificial hipoalergênico. Em seguida, descarte uma camada consistente de gel de transmissão de ultrassom hipoalergênico solúvel em água na cabeça do animal.Cubra a cabeça do transdutor com uma fina camada do mesmo gel e coloque-a em contato com a camada do rato. Levante a cabeça do animal e gire-a ligeiramente para um lado. Use um rolo de algodão como suporte, mantendo o focinho bem inserido na máscara de anestesia.Incline a bancada em um ângulo de cerca de 30 graus em relação ao plano horizontal. Gire o transdutor de imagem em um ângulo de cerca de 30 graus em relação ao plano vertical. Para aquisição de imagens anatômicas e vasculares ultrassônicas e fotoacústicas, ative a varredura de imagem.Entre na aquisição de imagem no modo B e defina corretamente todos os parâmetros de aquisição de imagem para respeitar os possíveis requisitos do experimento. Defina a frequência do centro de transmissão o mais baixa possível para ter a profundidade máxima de penetração do transdutor. Inicie a aquisição da imagem no modo B e ajuste o posicionamento do transdutor em tempo real, identificando referências anatômicas e centralizando a região de interesse no ponto médio do monitor.Coloque o transdutor para alinhá-lo ao eixo virtual, conectando o ouvido ao olho para obter um feixe ideal. Focalização. Adquira diferentes visões do volume interno do cérebro girando no sentido horário ou anti-horário. Certifique-se de que a região cerebral de interesse esteja localizada a 10 milímetros de profundidade em relação à fonte do transdutor de laser de ultrassom para receber um sinal de resposta fotoacústica ideal.Em seguida, entre no modo Doppler colorido para visualizar os vasos sanguíneos internos do cérebro de maneira altamente sensível. Em seguida, escolha o parâmetro de aquisição desejado definido em cores. Modo Doppler.Adquira imagens nesta modalidade para distinguir corrente sanguínea, velocidades e direções até vários milímetros de profundidade de penetração. Entre no modo Doppler de onda pulsada e adquira imagens para detectar a pulsação sanguínea da artéria e diferenciar entre artérias e veias. Agora, entre no modo power doppler e defina os parâmetros de aquisição para realizar uma quantificação do sinal com base no número de eventos de espalhamento causados pelo movimento do fluxo para avaliar as diferenças nas taxas de fluxo.Em seguida, entre no modo fotoacústico e refine adequadamente os parâmetros de aquisição para coletar dados sobre o conteúdo de hemoglobina total no sangue ou o grau de oxigenação em uma determinada área Ao produzir excitação a laser em todo o espectro de comprimento de onda, a absorção da hemoglobina total presente em diferentes estados químicos dentro de um tecido pode ser quantificada para a imagem do ponto de vista occipital. Mantenha o animal em decúbito ventral, abaixe a cabeça do animal e use pequenos rolos de gaze de algodão como suportes laterais para organizar corretamente a posição do animal. Gire o transdutor de imagem paralelamente ao plano transversal da cabeça do animal para aquisição de imagens anatômicas e vasculares ultrassônicas e fotoacústicas.Entre na aquisição de imagem do modo B e defina todos os parâmetros de aquisição de imagem. Como antes, espalhe as camadas de gel de ultrassom necessárias na sonda e na nuca do animal. Visualize os vasos sanguíneos cerebrais internos no modo power doppler, definindo corretamente os parâmetros de aquisição.Localize artérias intensamente pulsadas pelo modo Doppler de onda pulsada. Colete dados e direções de velocidades da corrente sanguínea no modo doppler colorido, adaptando adequadamente os parâmetros de aquisição. Após salvar todos os dados adquiridos, desligue a pulsação do laser saindo do modo de aquisição fotoacústica e distancie o transdutor enquanto mantém o animal sob o efeito anestésico.Comece a limpá-lo removendo suavemente o gel protetor dos olhos com o cotonete úmido, use uma espátula e várias toalhas de papel para remover completamente o gel de ultrassom da cabeça e do focinho. Em seguida, limpe-os com uma esponja úmida. Tenha cuidado para não danificar a delicada pele raspada.Retire o adesivo usado para prender os membros e desconecte os membros dos sensores que monitoram os parâmetros fisiológicos. Transfira rapidamente o animal da bancada de aquisição para uma gaiola diferente para ajudar o animal na recuperação, conforme descrito no protocolo de texto. Este método permite imagens profundas de estruturas de referência anatômicas específicas e vasos sanguíneos em resolução espacial relativamente alta.Aqui são mostradas imagens resolvidas da artéria cerebral média ou MCA que surge da artéria carótida interna ou ICA e se divide em dois ou mais ramos que finalmente circundam os lobos corticais. A imagem acústica baseada em Doppler revela pequenos ramos, enquanto a informação direcional da corrente sanguínea está disponível com aquisição de Doppler colorido. A característica da artéria MCA é confirmada pela técnica ultrassônica de onda pulsada.Aqui é mostrada a aquisição do modo de onda pulsada através do forame temporal para a individuação das referências vasculares. O sinal fotoacústico da hemoglobina contida nos glóbulos vermelhos circulantes pode ser detectado e analisado para coletar dados sobre seu estado oxidativo molecular e calcular a saturação de oxigênio no sangue. O conteúdo hemático de oxigênio pode ser correlacionado com dados sônicos para confirmar a discriminação do sangue arterial do sangue venoso.O tecido parenquimatoso cerebral também foi registrado com modalidade fotoacústica na projeção occipital para mostrar a caracterização vascular no gráfico espectral. Com esse espectro, é possível distinguir o sinal derivado dos vasos arteriais e venosos. A principal vantagem desta técnica sobre o método existente é que a anatomia do cérebro e o comportamento vascular relacionado podem ser estudados com o modo de imagem fotográfica sem cicatriz craniana de humor.Depois de assistir a este vídeo, você deve ter uma boa compreensão de como registrar as propriedades cerebrais parenquimatosas e vasculares e como registrar o oxigênio em tempo real. O nível de hemoglobina muda no tecido cerebral.

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Microbolhas mediada ruptura ultra-som focalizado da barreira sangue-cérebro (BBB) ​​é uma técnica promissora para não-invasivo de entrega de drogas alvo no...

Guiada por MRI rompimento da barreira hemato-encefálica utilizando Ultrassom Focalizado transcraniana em um modelo de rato

Fonte: Giustetto, P., et. al., Ultrassom não invasivo parenquimatoso, vascular e metabólico de alta frequência e imagens cerebrais profundas de ratos fotoacústicos. J. Vis. Exp. (2015)Neste vídeo, demonstramos o uso de ultrassom de alta frequência e imagens fotoacústicas para estudar a vasculatura e o conteúdo de hemoglobina no cérebro de ratos. Este método fornece informações detalhadas sobre a perfusão cerebral e a oxigenação do sangue, permitindo a análise não invasiva das estruturas...

Ultrassom não invasivo de alta frequência e imagem Doppler da hemodinâmica do cérebro de ratos

Fonte: Kalva, S. K., et al., Tomografia fotoacústica de mesa baseada em diodo laser pulsado para monitoramento de lavagem e lavagem de corante na vasculatura cortical de ratos. J. Vis. Exp. (2019)Este vídeo demonstra o procedimento para usar imagens fotoacústicas para observar alterações nos vasos corticais de um rato anestesiado. O processo inclui imagens de linha de base, injeção de corante e análise de absorção e depuração de corante durante a lavagem e lavagem.

Monitoramento fotoacústico do movimento do corante em vasos sanguíneos corticais

Fonte: Upputuri, P. K., et al. Um sistema de tomografia fotoacústica compacto de alto desempenho para imagens cerebrais de pequenos animais in vivo. J. Vis. Exp. (2017)Este vídeo demonstra um protocolo para imagens cerebrais de ratos não invasivas in vivo usando tomografia fotoacústica, mostrando a preparação, configuração do sistema de imagem e aquisição de dados para reconstruir imagens cerebrais 2D para visualizar estruturas vasculares e saúde neurovascular.

Imagem in vivo de um cérebro de rato usando tomografia fotoacústica

É demonstrado um sistema compacto de tomografia fotoacústica baseada em diodos a laser pulsado (PLD-PAT) para imagens cerebrais in vivo de alta velocidade em pequenos animais.

Um sistema de tomografia fotoacústica compacta de alto desempenho para<em&gt; In Vivo</em&gt; Imagem de cérebro de animais pequenos

Um sistema laser pulsado compacto do tomography fotoacústica do desktop (PLD-Pat) é demonstrado para A imagem latente dinâmica in vivo de alta velocidade do vasculature cortical animal pequeno.

Tomografia fotoacústica de desktop com base em diodo laser pulsada para monitoramento de lavagem e lavagem de corante em vasculatura cortical de ratos

A barreira hemencefálica (BBB) pode ser temporariamente interrompida com ultrassom focado (ME) mediado por microbolhas. Aqui, descrevemos um protocolo passo-a-passo para abertura BBB de alto rendimento in vivo usando um sistema de FUS modular acessível para especialistas em não-ultrassom.

Um sistema de neuronação estereática guiada por imagem de alta produtividade e sistema de ultrassom focado para abertura de barreira hemencefálica em roedores

Este trabalho demonstra o uso de uma plataforma multimodal de imagem baseada em ultrassom para imagens não invasivas de acidente vascular cerebral isquêmico. Este sistema permite a quantificação da oxigenação sanguínea através de imagens fotoacústicas e a perfusão prejudicada no cérebro através da angiografia acústica.

Fotoacústica, Ultrassonografia e Angiotomografia Integradas (PAUSAT) para Imagem Não Invasiva do Cérebro Inteiro do Acidente Vascular Cerebral Isquêmico

Este estudo descreve um protocolo combinado de ressonância magnética (RM) e ultrassom focalizado pulsado de baixa intensidade (FUS), utilizando ratos vivos com cateterismo da veia jugular para monitorar a abertura da barreira hematoencefálica (BHE).

Monitorando a abertura da barreira hematoencefálica em ratos com um sistema de ultrassom focalizado pré-clínico

Aqui, descrevemos um protocolo para microscopia de localização por ultrassom (ULM), que atinge resolução espacial de 12,5 μm para obter imagens da microvasculatura cerebral em ratos. Ele permite a visualização detalhada da direção e velocidade do fluxo sanguíneo, oferecendo uma ferramenta poderosa para o avanço dos estudos da circulação cerebral e distúrbios vasculares.

Visualização bidimensional de super-resolução da microvasculatura cerebral de ratos usando microscopia de localização por ultrassom

A Microscopia de Localização Ultrassônica (ULM) é uma técnica recentemente desenvolvida que permite um nível de resolução sem precedentes na imagem da microvasculatura in vivo. Neste trabalho, descrevemos em detalhes como obter imagens super-resolvidas da microvasculatura cerebral em roedores usando uma plataforma de ultrassom funcional padronizada projetada para pesquisa pré-clínica.

Microscopia de localização por ultrassom para mapeamento de super-resolução da microvasculatura cerebral de roedores

Aprenda a realizar imagens não invasivas de alta frequência por ultrassom e fotoacústica do cérebro profundo de ratos para visualizar regiões subcorticais e padrões vasculares. Este método permite estudar funções neurológicas e doenças cerebrais.

Parênquima não-invasivo, Vascular e Metabólica alta freqüência ultra-som e Fotoacústica Rat Cerebral Profunda Imagem

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