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DOI: 10.3791/53617-v
Miguel A. Lopez-Ramirez*1,2, Charles-Félix Calvo*3, Emma Ristori1, Jean-Léon Thomas1,3, Stefania Nicoli1
1Yale Cardiovascular Research Center, Internal Medicine,Yale University, 2Department of Medicine,University of California, San Diego, 3APHP Groupe Hospitalier Pitié-Salpètrière,Université Pierre and Marie Curie
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Aqui é proporcionado um método reprodutível para estudar a neurogénese adulto utilizando um ensaio neuroesfera derivado de todo o cérebro ou a partir de qualquer telencefálicos tectal ou regiões do cerebelo do cérebro adulto peixe-zebra. Além disso, descreve-se o procedimento para manipular a expressão de genes em neuroesferas de peixe-zebra.
O objetivo geral deste procedimento é examinar a neurogênese adulta usando um ensaio de neuroesfera derivado do cérebro do peixe-zebra adulto e manipular a expressão gênica nas neuroesferas do peixe-zebra. Portanto, esse método pode ajudar a responder a uma questão-chave na neurogênese e, em particular, ao mecanismo-chave que impulsiona a autorrenovação das células-tronco neurais e a determinação dessa célula. A principal vantagem dessa técnica é que ela é bastante simples, confiável e ajudará a obter uma célula-tronco progenitora neural do cérebro do peixe-zebra e a entender sua propriedade in vitro.
Então, primeiro adicionamos a ideia para este método, quando estávamos investigando a regulação epigenética no cérebro em desenvolvimento do peixe-zebra e, usando nossos especialistas anteriores, adaptamos o protocolo da neuroesfera do camundongo ao peixe-zebra. Para começar, prepare um leito de dissecação enchendo uma placa de Petri com pacotes de gel. Em seguida, cubra o prato com a tampa correspondente e incube-o a 20 graus Celsius.
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