Name: A Influência do fígado ressecção no crescimento do tumor intra-hepática (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-04-09T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 55 s
Description: Aprenda um modelo murino de ressecção hepática parcial combinado com injeção intra-hepática de células tumorais para estudar a recorrência de malignoma hepático. Este método investiga a relação entre hipertrofia hepática e crescimento tumoral.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

agradecimentos especiais vão para o Dr. Benjamin Motsh por sua assistência em questões técnicas. Os autores também gostaria de reconhecer o Dr. Marcus Forschner e Birk Müller pelo seu apoio multimédia, Erica Magelky para sua perícia editorial e Lisa Hornung, Dr. Roland Jurgons e Professor Stephan von Hï¿½sten (todos do Franz-Penzoldt-Center, University of Erlangen) pelo seu profissionalismo no manuseio e cuidados com os animais. Agradecemos ao professor Michael Neumaier no Instituto de Química Clínica, Faculdade de Medicina Mannheim, da Universidade de Heidelberg, Alemanha por fornecer células tumorais MC38. O presente trabalho foi realizado em cumprimento dos requisitos para a obtenção do grau &quot;Dr. med.&quot; na Friedrich-Alexander-University Erlangen-Nürnberg (FAU).

O governo de Franconia médio em Baviera, Alemanha, permissão para que os procedimentos descritos concedido. Quaisquer experimentos semelhantes requerem uma autorização prévia das autoridades competentes. Nota: O seguinte manual pode ser usado para grupos previamente discutida de A a C. passos que têm de ser deixado de fora nos grupos A e B são marcadas em conformidade. 1. Preparações <ol><li> Colocar luvas, coloque a almofada de poliestireno sob o microscópio, eo foco da lente na área um pouco acima do teclado. </li><li> Dividir a folha estéril e coloque metade sobre a almofada de poliestireno e a outra metade apenas próximo a ele. </li><li> Esterilizar os instrumentos cirúrgicos e colocá-los em uma folha estéril ao lado do bloco de poliestireno. </li><li> Solte um clipe de papel grande para formar um arco. Vire de cabeça para baixo e pressione-o no bloco de poliestireno na extremidade superior - mesmo ao lado, onde a cabeça do animal vou mentir. </li><li> Colocar o bocal do vaporizador entre os dois membross do arco. (Figura 7) </li><li> Configurar uma lâmpada de aquecimento de cerca de 40 cm do local onde a cabeça do animal vou mentir. Certifique-se o calor ao nível do bloco de poliestireno não exceda 40 ° C. </li><li> Prepara-se uma gaiola separada para os animais operados. </li><li> Prepara-se uma quantidade e volume definido (máximo de 50 ul) de células tumorais num tubo flexível e armazená-lo em gelo. </li></ol> 2. Anestesia <ol><li> Colocar o rato dentro de uma caixa de plexiglas e começar a indução da anestesia de isoflurano alto fluxo (5% de isoflurano a um caudal de 10 L / min). </li><li> Depois de passar pelas diferentes fases da anestesia, remova o mouse na caixa de plexiglas logo depois que entrou na fase da respiração agonia, que pode ser facilmente reconhecido por uma diminuição drástica na taxa respiratória (&lt;20 / min) e suspiros profundos apertando o o corpo inteiro do animal. </li><li> colocar rapidamente o animal de barriga para cima sobre a cortina coberto almofada de poliestireno estéril e continuarde ventilação na isoflurano baixo fluxo, inserindo o focinho do rato no bocal para manter a anestesia. Usar uma fracção inspiratória de 1,8-2,2% a um caudal de cerca de 1 L / min. </li><li> Avaliar a profundidade da anestesia durante a operação por meio do cálculo da frequência respiratória, que é de preferência entre 45 e 60 respirações por minuto. Adaptar a fração isoflurano inspiratória de acordo, se este não é o caso. Nota: As alterações na fração isoflurano inspiratória levar cerca de 60 segundos até que se tornem eficaz. Evite realizar mudanças drásticas rapidamente. Em vez disso, modificar a aplicação do anestésico gradualmente. </li></ol> 3. Operação <ol><li> Desinfectar o tórax e abdômen com um desinfectante adequado e trocar as luvas depois. </li><li> Injectar um volume adaptado de peso de carprofeno (5 mg / kg de peso corporal) na coxa do animal. </li><li> Aperte suavemente a pele abdominal com uma pinça para testar se a profundidade da anestesia é adequada. </li><li&gt; Realizar uma incisão ao longo da linha mediana do xifóide ao mid-abdomen usando tesouras e fórceps. </li><li> Cuidadosamente dissecar a área em torno do xifóide ao expô-la a partir do tecido circundante. </li><li> Colocar uma estadia de sutura através da xifóide (de dentro para fora) e anexar as duas threads ao retentor acima dos animais cabeça, usando a braçadeira. </li><li> Comprima membros do afastador juntos e lentamente introduzir o &quot;U&quot; dicas afastador -shaped ao longo da parede abdominal interna do animal. Nota: Estas medidas expor o fígado para facilitar o acesso aos diferentes lobos. A identificação de lobo lateral mediano e esquerdo do fígado deve agora ser possível. </li><li> Utilize um cotonete de algodão embebido em soro fisiológico e empurre o lobo médio para baixo. Dissecar as ventrais três quartos do ligamento falciforme, que será agora visível entre a superfície do lobo médio e do diafragma. </li><li> Agora, use duas compressas de algodão embebido com solução salina para mudar a medianalóbulo esquerdo e lobo lateral para cima contra o diafragma. </li><li> Visualizar a membrana fina entre o lobo lateral esquerdo e do lobo caudado e dissecá-lo com cuidado. Nota: Ao executar este protocolo em animais do grupo A, salte para a etapa 3.18 neste momento. </li><li> Coloque uma ligadura tamanho 4-0 na diagonal ao longo da base do lobo lateral esquerdo. </li><li> Em seguida, use o cotonete para devolver o lobo lateral esquerdo para sua posição original. </li><li> Cuidadosamente amarrar a ligadura o mais próximo possível da base do lobo possível e avaliar a mudança de cor no lobo para testar o fornecimento de sangue adequadamente interrompido. </li><li> Ressecção do lobo lateral esquerdo, seguindo a linha de base do lóbulo e observe o peso do lobo ressecado. Nota: Ao executar este protocolo em animais do grupo B, pule para o passo 3.18 neste momento. </li><li> Coloque uma segunda ligadura entre coto do lobo lateral esquerdo e base do lobo mediano. </li><li> Reposicionar o lobo mediano como well e amarrar a ligadura. Mais uma vez, para avaliar a alteração de cor no lobo a testar para fornecimento de sangue adequadamente interrompida. </li><li> Ressecção do lobo mediano e anote o seu peso. </li><li> Ligar a seringa de 1 ml para a agulha 30 G e preenchê-lo com as células do tumor a partir do tubo flexível sem inclinar a seringa, em qualquer momento. </li><li> Use os cotonetes para mover as alças intestinais à esquerda do animal a fim de expor o lóbulo direito inferior. </li><li> Inserir a seringa carregada de células para dentro do dispositivo &quot;de terceira mão&quot; em um ângulo de 30 ° com a vertical. </li><li> Mova cuidadosamente o dispositivo ao lado do rato com a agulha logo acima do lóbulo direito inferior. </li><li> Lentamente avanço a seringa dentro do dispositivo de terceira mão, até que a ponta da agulha se encontra na parte central do lóbulo direito inferior. </li><li> Injectar o volume inteiro na parte central do lobo ao longo de um período de 30-45 segundos. </li><li> Comprimir o local da injecção, durante pelo menos três minutos até a hemorragia parou. </li&gt; <li> Retirar a sutura estadia eo afastador. </li><li> Feche a fáscia com um 5-0 sutura reabsorvível usando nós botão. </li><li> Fechar a pele com uma sutura 4-0, não reabsorvível usando nós botão. </li><li> Comece a ventilação do mouse no alto fluxo de oxigênio durante cerca de 1 min. </li></ol> 4. Pós-op procedimento <ol><li> Colocar o animal num ambiente aquecido (aproximadamente 40 ° C) durante a meia hora seguinte para assegurar a recuperação adequada. </li><li> Admix água de beber do animal com 5 mg / ml de metamizol para pós-operatório de 72 h. </li><li> Examinar a integridade das suturas de perto durante pelo menos três dias após o procedimento. </li></ol> 5. Período de Observação e Eutanásia <ol><li> Medir o peso do animal por dia, durante um total de 14 dias. Pontuação-los quanto ao seu bem-estar e limitações respectivamente. </li><li> Após 14 dias, anestesiar o seguinte animais passos 2.1 e 2.2 do protocolo operatório umnd prosseguir com o protocolo da instituição para a eutanásia dos animais. </li><li> Realizar uma laparotomia mediana como explicado no passo 3.4. Para facilitar o acesso ao abdômen, estender a incisão 1-1,5 cm caudalmente. Insira o afastador como apontado em 3,7. </li><li> Dissecar ao longo do resto do ligamento falciforme e cortar a veia cava inferior do mesmo modo que sai do fígado cranialmente. </li><li> Separa-se o fígado a partir do diafragma, o diafragma, agarrando com os fórceps e dissecando bruscamente para dentro do espaço entre o fígado e tecido muscular. </li><li> Levante o tecido do fígado mobilizados fora do retroperitônio e dissecá-lo fora das estruturas remanescentes que ainda está ligado: tecido adiposo retroperitoneal, a veia cava inferior ea veia portal. </li><li> Inspeccionar o fígado após a extracção para qualquer tecido adicional, que seria falsamente contribuir para o seu tamanho e o peso real. Um fígado e extraiu-se o seu tumor são apresentadas na Figura 6. </li><li> Dissecar o tumor fora da inferior lóbulo direito. </li><li> Medir o tamanho e o peso de ambos o tumor e o parênquima do fígado. </li><li> Conservar amostras adicionais de tecidos do peritônio, linfonodos ou outros órgãos, conforme necessário para análise de tecido </li></ol>

<ol><li>Haggar, F. A., Boushey, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Colorectal+cancer+epidemiology%3A+incidence%2C+mortality%2C+survival%2C+and+risk+factors%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Colon+Rectal+Surg%22%5BJournal%5D)">Colorectal cancer epidemiology: incidence, mortality, survival, and risk factors.</a> Clin. Colon Rectal Surg. 22, 191-197 (2009).</li>
<li>Fong, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liver+resection+for+colorectal+metastases%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Oncol%22%5BJournal%5D)">Liver resection for colorectal metastases.</a> J. Clin. Oncol. 15, 938-946 (1997).</li>
<li>Kato, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Therapeutic+results+for+hepatic+metastasis+of+colorectal+cancer+with+special+reference+to+effectiveness+of+hepatectomy%3A+analysis+of+prognostic+factors+for+763+cases+recorded+at+18+institutions%5BTitle%5D)+AND+%22Dis.+Colon+Rectum%22%5BJournal%5D)">Therapeutic results for hepatic metastasis of colorectal cancer with special reference to effectiveness of hepatectomy: analysis of prognostic factors for 763 cases recorded at 18 institutions.</a> Dis. Colon Rectum. 46, S22-S31 (2003).</li>
<li>Poston, G. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((OncoSurge%3A+a+strategy+for+improving+resectability+with+curative+intent+in+metastatic+colorectal+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Oncol%22%5BJournal%5D)">OncoSurge: a strategy for improving resectability with curative intent in metastatic colorectal cancer.</a> J. Clin. Oncol. 23, 7125-7134 (2005).</li>
<li>Neumann, U. P., Seehofer, D., Neuhaus, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+surgical+treatment+of+hepatic+metastases+in+colorectal+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Dtsch+Arztebl+Int%22%5BJournal%5D)">The surgical treatment of hepatic metastases in colorectal carcinoma.</a> Dtsch Arztebl Int. 107, 335-342 (2010).</li>
<li>Alwayn, I. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+critical+role+for+matrix+metalloproteinases+in+liver+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Surg.+Res%22%5BJournal%5D)">A critical role for matrix metalloproteinases in liver regeneration.</a> J. Surg. Res. 145, 192-198 (2008).</li>
<li>Fausto, N., Campbell, J. S., Riehle, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liver+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Liver regeneration.</a> Hepatology. 43, S45-S53 (2006).</li>
<li>Fujiyoshi, M., Ozaki, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+mechanisms+of+liver+regeneration+and+protection+for+treatment+of+liver+dysfunction+and+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Hepatobiliary.+Pancreat.+Surg%22%5BJournal%5D)">Molecular mechanisms of liver regeneration and protection for treatment of liver dysfunction and diseases.</a> J. Hepatobiliary. Pancreat. Surg. 18, 13-22 (2011).</li>
<li>Jin, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Paradoxical+effects+of+short-+and+long-term+interleukin-6+exposure+on+liver+injury+and+repair%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Paradoxical effects of short- and long-term interleukin-6 exposure on liver injury and repair.</a> Hepatology. 43, 474-484 (2006).</li>
<li>Nakamura, T., Sakai, K., Nakamura, T., Matsumoto, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hepatocyte+growth+factor+twenty+years+on%3A+Much+more+than+a+growth+factor%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Gastroenterol.+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Hepatocyte growth factor twenty years on: Much more than a growth factor.</a> J. Gastroenterol. Hepatol. 26, 188-202 (2011).</li>
<li>Van Sweringen, H. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CXC+chemokine+signaling+in+the+liver%3A+impact+on+repair+and+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">CXC chemokine signaling in the liver: impact on repair and regeneration.</a> Hepatology. 54, 1445-1453 (2011).</li>
<li>Heijboer, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sixteen+hours+of+fasting+differentially+affects+hepatic+and+muscle+insulin+sensitivity+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Lipid+Res%22%5BJournal%5D)">Sixteen hours of fasting differentially affects hepatic and muscle insulin sensitivity in mice.</a> J. Lipid Res. 46, 582-588 (2005).</li>
<li>Yang, S. Q., Lin, H. Z., Mandal, A. K., Huang, J., Diehl, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Disrupted+signaling+and+inhibited+regeneration+in+obese+mice+with+fatty+livers%3A+implications+for+nonalcoholic+fatty+liver+disease+pathophysiology%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Disrupted signaling and inhibited regeneration in obese mice with fatty livers: implications for nonalcoholic fatty liver disease pathophysiology.</a> Hepatology. 34, 694-706 (2001).</li>
<li>Selzner, M., Clavien, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Failure+of+regeneration+of+the+steatotic+rat+liver%3A+disruption+at+two+different+levels+in+the+regeneration+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Failure of regeneration of the steatotic rat liver: disruption at two different levels in the regeneration pathway.</a> Hepatology. 31, 35-42 (2000).</li>
<li>Matsuo, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Control+mechanism+of+the+circadian+clock+for+timing+of+cell+division+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Control mechanism of the circadian clock for timing of cell division in vivo.</a> Science. 302, 255-259 (2003).</li>
<li>Iakova, P., Awad, S. S., Timchenko, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aging+reduces+proliferative+capacities+of+liver+by+switching+pathways+of+C%2FEBPalpha+growth+arrest%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Aging reduces proliferative capacities of liver by switching pathways of C/EBPalpha growth arrest.</a> Cell. 113, 495-506 (2003).</li>
<li>Pritchett-Corning, K. R., Luo, Y., Mulder, G. B., White, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Principles+of+rodent+surgery+for+the+new+surgeon%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Principles of rodent surgery for the new surgeon.</a> J Vis Exp. , (2011).</li>
<li>Skoulis, N. P., James, R. C., Harbison, R. D., Roberts, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Depression+of+hepatic+glutathione+by+opioid+analgesic+drugs+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol.+Appl.+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Depression of hepatic glutathione by opioid analgesic drugs in mice.</a> Toxicol. Appl. Pharmacol. 99, 139-147 (1989).</li>
<li>Berson, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+for+experimental+buprenorphine+hepatotoxicity%3A+major+role+of+mitochondrial+dysfunction+versus+metabolic+activation%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Mechanisms for experimental buprenorphine hepatotoxicity: major role of mitochondrial dysfunction versus metabolic activation.</a> J. Hepatol. 34, 261-269 (2001).</li>
<li>Baker, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Natural+pathogens+of+laboratory+mice%2C+rats%2C+and+rabbits+and+their+effects+on+research%5BTitle%5D)+AND+%22Clin.+Microbiol.+Rev%22%5BJournal%5D)">Natural pathogens of laboratory mice, rats, and rabbits and their effects on research.</a> Clin. Microbiol. Rev. 11, 231-266 (1998).</li>
<li>FELASA working group on revision of guidelines for health monitoring of rodents and rabbits. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FELASA+recommendations+for+the+health+monitoring+of+mouse%2C+rat%2C+hamster%2C+guinea+pig+and+rabbit+colonies+in+breeding+and+experimental+units%5BTitle%5D)+AND+%22Lab.+Anim%22%5BJournal%5D)">FELASA recommendations for the health monitoring of mouse, rat, hamster, guinea pig and rabbit colonies in breeding and experimental units.</a> Lab. Anim. 48, 178-192 (2014).</li>
<li>Nikfarjam, M., Malcontenti-Wilson, C., Fanartzis, M., Daruwalla, J., Christophi, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+model+of+partial+hepatectomy+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Invest.+Surg%22%5BJournal%5D)">A model of partial hepatectomy in mice.</a> J. Invest. Surg. 17, 291-294 (2004).</li>
<li>Hori, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simple+and+reproducible+hepatectomy+in+the+mouse+using+the+clip+technique%5BTitle%5D)+AND+%22World+J.+Gastroenterol%22%5BJournal%5D)">Simple and reproducible hepatectomy in the mouse using the clip technique.</a> World J. Gastroenterol. 18, 2767-2774 (2012).</li>
<li>Mitchell, C., Willenbring, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+reproducible+and+well-tolerated+method+for+2%2F3+partial+hepatectomy+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Protoc%22%5BJournal%5D)">A reproducible and well-tolerated method for 2/3 partial hepatectomy in mice.</a> Nat. Protoc. 3, 1167-1170 (2008).</li>
<li>Sowa, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extent+of+liver+resection+modulates+the+activation+of+transcription+factors+and+the+production+of+cytokines+involved+in+liver+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22World+J.+Gastroenterol%22%5BJournal%5D)">Extent of liver resection modulates the activation of transcription factors and the production of cytokines involved in liver regeneration.</a> World J. Gastroenterol. 14, 7093-7100 (2008).</li>
<li>Bonninghoff, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+different+liver+resection+methods+on+liver+damage+and+regeneration+factors+VEGF+and+FGF-2+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Can.+J.+Surg%22%5BJournal%5D)">Effect of different liver resection methods on liver damage and regeneration factors VEGF and FGF-2 in mice.</a> Can. J. Surg. 55, 389-393 (2012).</li>
</ol>

Os autores não têm nada a divulgar.

Experimentos anteriores realizando a cirurgia em roedores foram capazes de identificar certas variáveis ​​que poderiam servir como fontes de viés. A fim de obter resultados confiáveis ​​e válidos, considere as seguintes precauções. Rotina jejum pré-operatório pode levar a esteatose hepática 12, que pode inibir a regeneração do fígado 13,14. Portanto, não é recomendado. A maior actividade mitótica de hepatócitos varia ao longo do dia 15. Se possível, realizar ...

O câncer colorretal (CRC) é responsável por cerca de 9% de todos os tumores malignos. É o terceiro cancro mais comum, tanto os EUA e em todo o mundo. As taxas de mortalidade globais de gama CRC de 300.000 para mais de 500.000 por ano 1. Vinte por cento dos pacientes sofrem de metástases hepáticas após a descoberta do seu tumor colo-rectal. Metástases ressecáveis ​​são normalmente tratados por um 2,3 parcial ressecção hepática. Técnicas cirúrgicas melhoradas, novas estratégias multimodais e novas definições de metástases ressecáveis ​​tornar a terapia de uma ressecção parcial do fígado possível para um número crescente de pacientes 4. Recorrência de tumores hepáticos secundários, no entanto, é uma seqüelas clínica desafiadora na cirurgia gastrointestinal moderna. Os pacientes com CRC submetidos à ressecção de metástases hepáticas têm uma chance de 30 a 50% de desenvolver um novo tumor em seu fígado remanescente 5. Portanto, há uma necessidade de mais pesquisas sobre omecanismos envolvidos na recorrência de metástases hepáticas. A ressecção hepática de cerca de 70% é normalmente compensada dentro de algumas semanas por o tecido hepático remanescente. Esta regeneração envolve vários mecanismos, incluindo citocinas, como interleucina 6 (IL-6), factor de necrose tumoral alfa (TNF-α), factor de crescimento de hepatócitos (HGF), factor de crescimento transformante beta (TGF-β), factor de crescimento endotelial vascular (VEGF ), metaloproteases de matriz (MMP-2 e MMP-9) e CXC-quimiocinas 6-11. Estas substâncias apoiar a regeneração hepática e também pode ser responsável pelas altas taxas de recorrência de tumores malignos do fígado primário e secundário, induzindo o crescimento dos depósitos de células tumorais pequenas no fígado restante que não são detectados pela imagem latente clínica de rotina. Este causalidade não foi provado até agora. A hipótese que se segue foi estabelecida. Após a ressecção parcial do fígado, os fatores de proliferação que são responsáveis ​​por ao vivoR hipertrofia pode também induzir o crescimento de células de tumor previamente desconhecidas no fígado. Um modelo do rato foi projetado que combinou as técnicas de ressecção hepática e indução do tumor. Trinta ratinhos nu / nu-foxn1nu atímicos foram divididos em três grupos de dez animais cada. Cada uma delas foi tratada com qualquer uma laparotomia sozinho (Grupo A), a ressecção hepática 30% (Grupo B) ou a ressecção hepática de 70% (Grupo C). Os animais em todos os grupos subsequentemente receberam uma injecção de células de tumor numa parte restante definido do fígado, para simular células tumorais dormentes. Animais foram observados durante duas semanas e, em seguida, avaliada para o crescimento tumoral e hipertrofia do fígado. O objectivo era criar um modelo que poderia ser utilizado para pesquisar factores moleculares e patogénicos que podem desempenhar um papel na formação de tumores após a hepatectomia. Este método pode ser útil na avaliação: a origem dos factores endócrinos envolvidas na regeneração do fígado; Os mecanismos responsáveis ​​por tum intra-hepáticaou o crescimento após a ressecção hepática; e o volume ressecção hepática necessária para a indução do crescimento de tumores intra-hepática. O método a seguir só foi realizada em animais, porque eles prometem contribuir para a compreensão dos princípios biológicos fundamentais e para o desenvolvimento do conhecimento que pode ser esperado para beneficiar os seres humanos pela melhoria opções de tratamento. Devido aos mecanismos envolvidos nestes assuntos, que teve de ser examinada in vivo, como métodos in vitro podem não fornecer uma representação realista da patologia humana. Estas investigações podem levar à descoberta de metas relevantes para as opções de tratamento profilático para diminuir a recorrência do tumor.

<table><tbody><tr><td><forte>Equipamento</forte>Microscópio de</td> Operação Zeiss OPMI-1 FC S21 Gaiola de Indução (Caixa de Plexiglas)UNO BV, Holanda 180000132 Medidor de Vazão + Kit de <td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td> Conexão UNO BV, Holanda 180000008 Vaporizador UNO Sigma Delta UNO BV, Holanda 180000002 <td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Enchimento de chave para anestésico</td><td>UNO BV, Holanda</td><td>180000010</td><td></td></tr><tr><td>Adsorvente de filtro de carvão ativado</td><td>UNO BV, Holanda</td><td>Unidade de exaustão de gás 180000140</td><td></td></tr><tr><td></td><td>UNO BV, Holanda</td><td>180000118</td><td></td></tr><tr><td>máscara facial para camundongo</td><td>UNO BV, Holanda</td><td>Suporte de</td> vaporizador de 180000065 <td></td></tr><tr><td></td><td>UNO BV, Holanda</td><td>180000006</td><td></td></tr><tr><td>Lâmpada de calor</td><td>Physitemp Instruments</td><td>HL-1</td><td></td></tr><tr><td>Almofada de isopor</td><td>RAYHER</td><td>30074000&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Ferramenta de Terceira Mão</td><td>TOOLCRAFT&nbsp;</td><td>Balanças de Precisão ZD-10F</td><td></td></tr><tr><td>Kern</td><td>EW 220-3NM</td><td></td><td>Balanças</td></tr><tr><td>&nbsp;</td><td>Kern</td><td>EMB 500-1</td><td></td></tr><tr><td>Pinça deslizante</td><td>MIB</td><td>MIB 82026100</td><td></td></tr><tr><td>pinça de microdissecação</td><td>Braun/Aesculap</td><td>BD195R</td><td></td></tr><tr><td>Tesoura de microdissecação</td><td>Braun/Aesculap</td><td>FD100R</td><td></td></tr><tr><td>Porta-agulhas de microdissecação</td><td>Braun/Aesculap</td><td>BM563R</td><td></td></tr><tr><td>Retractor</td><td>Fine Science Tools (F.S.T.)</td><td>No. 17001-0</td><td>Tipo: Grampo Bowmann</td></tr><tr><td></td><td>Braun / Aesculap</td><td>BJ002R</td><td></td></tr><tr><td>Nome</td><td>Empresa</td><td>Número de catálogo</td><td>Comentários</td></tr><tr><td>Itens descartáveis (NOTA: As quantidades são por animal e procedimento)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Capa estéril Foliodrape (45 cm x 75 cm)</td><td>Cotonetes</td><td>estéreis Hartmann 2775001</td><td></td></tr><tr><td>(2x)</td><td>Fluido</td> estéril <td>Hartmann 4700151</td><td>Peha</td></tr><tr><td>(0,9% NaCl)</td><td>Desinfetante Braun</td><td>3570310</td><td>PZN=04454809</td></tr><tr><td>(Softasept - 250 ml)</td><td>Braun</td><td>3887138</td><td>PZN=0762008808505018</td></tr><tr><td>seringa de 2 x 1 ml (Injekt-F)</td><td>Braun</td><td>9166017V</td><td></td></tr><tr><td>26 G de cânula (Sterican) - para injeção de Carprofeno</td><td>Braun</td><td>4665457</td><td></td></tr><tr><td>30 G de cânula (Sterican)&nbsp; - para injeção de tumor</td><td>Braun</td><td>4656300</td><td></td></tr><tr><td>Caprofeno (=Rimadyl)</td><td>Pfizer</td><td>QM01AE91</td><td></td></tr><tr><td>Metamizol (= Novaminsulfon)</td><td>Ratiopharm</td><td>16543.00.00</td><td></td></tr><tr><td>4-0 Sutura Vicryl</td><td>Ethicon</td><td>J835G</td><td></td></tr><tr><td>Sutura de Prolene 5-0</td><td>Ethicon</td><td>8618G</td><td></td></tr><tr><td>SafeLock Flex-Tube 1.5 ml</td><td>Eppendorf&nbsp;</td><td></td><td></td>22363778</tr><tr><td>Esponja de Gaze 4 x 4</td><td>Kendall/Covidien&nbsp;</td><td>UPC: 728795135355&nbsp;</td><td>ASIN: B005BFQTWM&nbsp;</td></tr><tr><td>Clipe de papel grande</td><td>ACCO</td><td>A7072510G</td><td></td></tr><tr><td>Nome</td><td>Empresa</td><td>Número de Catálogo</td><td>Comentários</td></tr><tr><td>Animais</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Female athymic nude-foxn1nu/nu</td><td>Harlan Laboratories B.V.</td><td>Código 069</td><td></td></tr></tbody></table>

a influência do fígado ressecção no crescimento do tumor intra-hepática

The Influence of Liver Resection on Intrahepatic Tumor Growth

A alta incidência de recorrência do tumor após a ressecção de lesões hepáticas metastáticas permanece um problema não resolvido. depósitos de células de tumor pequeno, que não são detectáveis ​​por imagem clínica de rotina, pode ser estimulada por factores de regeneração hepáticas após a ressecção hepática. Não está inteiramente claro, no entanto, que fatores são cruciais para a recorrência do tumor. O modelo de ratinho apresentada pode ser útil para explorar os mecanismos que desempenham um papel no desenvolvimento de lesões malignas recorrentes após a ressecção hepática. O modelo combina as técnicas fáceis de realizar e reprodutível de quantidades definidas de remoção de tecido do fígado e a indução de tumor (por injecção) em ratinhos. Os animais foram tratados com uma única laparotomia, uma ressecção hepática de 30%, ou de uma ressecção hepática de 70%. Todos os animais receberam, subsequentemente, uma injecção das células tumorais no tecido do fígado remanescente. Depois de duas semanas de observação, os fígados e os tumores foram avaliados quanto a tamanho e peso eexaminada por imuno-histoquímica. Após a ressecção hepática de 70%, o volume do tumor e peso foram significativamente aumentados em comparação com uma laparotomia sozinhos (p &lt;0,05). Adicionalmente, imuno-histoquímica (Ki67) mostrou um aumento na taxa de proliferação do tumor no grupo de ressecção (p &lt;0,05). Estes resultados demonstram a influência dos mecanismos de regeneração hepática no crescimento do tumor intra-hepática. Combinado com métodos como workup histológica ou análise de RNA, o modelo de rato descrito poderia servir como base para um exame atento dos diferentes fatores envolvidos no crescimento tumoral e recorrência da doença metastática no fígado. Um número considerável de variáveis, como o tempo de observação pós-operatória, a linha celular utilizada para injecção ou o tempo de injeção e ressecção hepática oferecer vários ângulos ao explorar uma questão específica no contexto de metástases pós-hepatectomia. As limitações deste procedimento são a aurização para realizar o procedimento em animais, o acesso a uma instalação de testes em animais adequados e aquisição de certos equipamentos.

Em nosso experimento específico, que incluiu 30 ratos nude-foxn1nu / nu atímicos. Eles receberam uma laparotomia mediana, as injecções de células de tumor de 500.000 células tumorais MC38 (dissolvida em 50 ul de solução salina), e foram tratados subsequentemente quer com uma ressecção hepática de 70%, uma ressecção hepática de 30%, ou mais nenhuma intervenção. Após 14 dias, a regeneração quase completa do fígado restante sequê...

Uma alta incidência de recorrência tumoral após ressecção de metástases hepáticas continua sendo um problema não resolvido. O modelo de camundongo ilustrado pode ser útil para investigar as razões de tais recorrências. Ele combina um modelo de ressecção hepática com injeção intra-hepática de células tumorais pela primeira vez.

A Influência do fígado ressecção no crescimento do tumor intra-hepática

The high incidence of tumor recurrence after resection of metastatic liver lesions remains an unsolved problem. Small tumor cell deposits, which are not ...

A recorrência de malignoma hepático primário e secundário após ressecção parcial do fígado permanece um problema comum, ainda não resolvido. Os mecanismos exatos da formação tumoral nas partes remanescentes do fígado até agora não são compreendidos. O seguinte modelo murino estudou a proliferação de malignoma hepático secundário após ressecção parcial do fígado.Em camundongos, uma ressecção hepática de cerca de 70% é normalmente compensada pela hipertrofia hepática das partes remanescentes do fígado em duas a três semanas. Os fatores endócrinos, que desempenham um papel na regeneração do fígado, também podem induzir o crescimento de malignomas hepáticos. Este vídeo apresenta um método que pode ser usado para investigar a relação entre a hipertrofia hepática após ressecção e o crescimento tumoral.O experimento tentou provar que uma ressecção parcial do fígado acelera o crescimento de malignoma hepático. A ilustração mostrada esquematiza a anatomia hepática murina. Para obter uma redução do volume hepático de 65 a 70%, é necessária a ressecção dos lobos mediano e lateral esquerdo.Para induzir um tumor hepático, um volume predefinido de células cancerígenas é injetado no lobo inferior

the-influence-of-liver-resection-on-intrahepatic-tumor-growth

Research

JoVE Journal

Medicine

Medicina

Indução rápida hipertrofia hepática usando associando partição do fígado e ligadura da veia porta para um hepatectomy encenada (ALPPS) tem sido proposto para ressecção de tumores no fígado ressecável no limite. Este modelo pode elucidar os mecanismos envolvidos na hipertrofia rápida e permite testes de drogas que promovem ou bloqueiam a aceleração da regeneração.

Modelo do rato da partição fígado associando e ligadura da veia porta para procedimento encenado Hepatectomy (ALPPS)

Nós descrevemos em detalhe um modelo clinicamente relevante do tumor das metástases do fígado do cancro colorretal (crlm) e a influência do reperfusão da isquemia do fígado (I/R) no crescimento e na metástase do tumor. Este modelo pode ajudar a compreender melhor os mecanismos subjacentes à promoção cirurgia-induzida do crescimento metastático do fígado.

Modelo murino de tumores hepáticos metastáticos no cenário de lesão de reperfusão de isquemia

Inúmeros estudos têm demonstrado as vantagens da ressecção anatômica. No entanto, se a ressecção anatômica pode aumentar as taxas de ressecção R0 permanece controverso. Consequentemente, o presente estudo descreve um procedimento inovador envolvendo o conceito em bloco combinado com ressecção anatômica em hepatectomia laparoscópica, que pode reduzir a recorrência pós-operatória e metástases.

Aplicação do Conceito em Bloco Combinado com Ressecção Anatômica em Hepatectomia Laparoscópica

Apresentamos um protocolo passo a passo para a realização da hepatectomia anterior direita laparoscópica e comparamos seus efeitos clínicos e resultados pós-operatórios com os das hepatectomias convencionais. A análise dos dados de 82 pacientes com carcinoma hepatocelular revelou que a hepatectomia anterior direita laparoscópica apresentou melhores resultados clínicos e taxas de sobrevida do que a hepatectomia convencional.

Hepatectomia anterior direita laparoscópica: uma experiência unicêntrica

Organoides gerados a partir de tumores de pacientes são injetados ortotopicamente no fígado de camundongos. A ressecção do tecido hepático não tumoral leva a um ambiente regenerativo no tecido hepático onde o tumor está localizado.

Um modelo de xenoenxerto organoide derivado de paciente com câncer hepatocelular para investigar o impacto da regeneração hepática no crescimento do tumor

Este protocolo envolve uma ressecção anatômica laparoscópica do segmento VII do fígado com transecção do parênquima hepático seguindo uma abordagem prioritária. Esta técnica não é afetada por variações anatômicas.

Ressecção Anatômica Laparoscópica do Segmento VII do Fígado com Transecção do Parênquima Hepático Seguindo uma Abordagem Prioritária

O protocolo demonstra que, sob orientação por ultrassom laparoscópico, o segmento S7 do fígado pode ser corado com sucesso puncionando os ramos visceral e diafragmático do tumor, facilitando uma hepatectomia anatômica do segmento S7.

Hepatectomia Laparoscópica S7 com Coloração de Fluorescência Positiva

A utilização de reconstrução 3D e simulações virtuais no planejamento pré-operatório de ressecções hepáticas representa um avanço significativo na oncologia cirúrgica. A técnica 3D-LAST (abordagem de localização tridimensional com o fio de seda) de nossa equipe permite a remoção segura, eficiente e precisa do tumor com navegação intraoperatória prática, prometendo ampla adoção médica.

Abordagem de localização tridimensional com segmentectomia laparoscópica guiada por fio de seda para tumor hepático

Apresentamos uma técnica laparoscópica para resseção anatômica S7+S8d com transeção da veia hepática direita, preservando a veia hepática inferior direita e o segmento S6. Baseando-se em marcos anatômicos meticulosos sem ultrassom intraoperatório, essa abordagem oferece uma opção precisa e que poupa parênquima para tumores do fígado direito localizados dorsalmente, especialmente em ambientes com recursos avançados limitados de navegação.

Resseção anatômica laparoscópica S7+S8d preservando a veia hepática inferior direita e S6 com transeção da veia hepática direita

A modificação em 3-D in vitro sistema é apresentado em que características de crescimento de várias linhagens de células tumorais na membrana basal reconstituída se correlacionam com o comportamento dormentes ou proliferativa das células tumorais em um local metastático...

Um In Vitro Sistema para Estudo de dormência Tumor ea Mude para o crescimento metastático

Aprenda um modelo murino de ressecção hepática parcial combinado com injeção intra-hepática de células tumorais para estudar a recorrência de malignoma hepático. Este método investiga a relação entre hipertrofia hepática e crescimento tumoral.

A Influência do fígado ressecção no crescimento do tumor intra-hepática

Explorar mais vídeos