RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
pt_BR
Menu
Menu
Menu
Menu
DOI: 10.3791/54787-v
Jian Ding1,2, Zhi-Qiang Lin1,2, Jian-Ming Jiang3,4, Christine E. Seidman3,4, Jonathan G. Seidman3,4, William T. Pu1,2, Da-Zhi Wang1,2
1Department of Cardiology,Boston Children's Hospital, 2Department of Pediatrics,Harvard Medical School, 3Department of Genetics,Harvard Medical School, 4Howard Hughes Medical Institute
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This manuscript describes a method for preparing recombinant adeno-associated virus 9 (rAAV9) vectors to manipulate gene expression in mouse hearts. This technique facilitates the study of gene function in vivo without relying on genetically modified animal models.
Neste manuscrito, é descrito um método para preparar vetores recombinantes do vírus adeno-associado 9 (rAAV9) para manipular a expressão gênica no coração de camundongos.
O objetivo geral deste procedimento é preparar o vírus adeno-associado recombinante nove, ou rAAV9, para manipular a expressão gênica em corações de camundongos. O método pode responder a questões-chave no campo da cardiologia e genética molecular, como estudar a função do gene no coração de camundongos in vivo. A principal vantagem desta técnica é que ela nos permitirá manipular facilmente a expressão e função gênica in vivo no coração de camundongos, permitindo o acesso funcional da função gênica sem ter que depender dos modelos animais geneticamente modificados.
Depois de gerar construções rAAV9 e cultivar células HEK293 de acordo com o protocolo de texto, para transfectar as células no primeiro dia, combine 70 microgramas de plasmídeo AAV Rep-Cap, 70 microgramas de plasmídeo rAAV9 e 200 microgramas de plasmídeo auxiliar Ad em um tubo de centrífuga de 50 mililitros. Adicione 49 mililitros de DMEM à temperatura ambiente sem FBS ao tubo e misture bem. Em seguida, para fazer uma solução de PEI para DNA de quatro para um, adicione 1.360 microlitros de PEI ao tubo e misture bem.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Related Videos
12:15
Related Videos
15.1K Views
03:11
Related Videos
2.8K Views
07:20
Related Videos
14.6K Views
06:42
Related Videos
17.3K Views
09:00
Related Videos
8.7K Views
06:03
Related Videos
9.8K Views
05:04
Related Videos
3.9K Views
05:15
Related Videos
2.2K Views
03:58
Related Videos
3.3K Views
04:43
Related Videos
1.7K Views