Uma abordagem padronizada para a purificação multiespecífica de células germinais masculinas de mamíferos por dissociação mecânica do tecido e citometria de fluxo

O objetivo geral deste procedimento padronizado é isolar tipos distintos de células germinativas masculinas de diferentes espécies de mamíferos usando um único protocolo. Este método pode ajudar a facilitar o estudo molecular da espermatogênese pela análise de alto rendimento de diferentes tipos de células germinativas. A principal vantagem dessa técnica é que um único conjunto de reagentes pode ser aplicado a várias espécies de mamíferos para o isolamento simultâneo de quatro populações diferentes de células germinativas masculinas.

Tivemos a ideia para este método pela primeira vez quando decidimos investigar a evolução de padrões específicos de regulação da expressão gênica em diferentes mamíferos. Chris Holley, tecnólogo médico do Siteman Flow Cytometry Core, demonstrará como operar o classificador de células e definir os portões. Comece desencapsulando um único testículo murino e cortando o tecido em pequenos pedaços.