Farmacoterapia intracraniana e ensaios de dor em roedores

Aqui nós apresentamos um protocolo para realizar experimentos farmacológicos intracranianas, seguidos de ensaios de comportamento de dor em roedores. Este protocolo permite que os pesquisadores entregar alvos moleculares e celulares no cérebro, por agentes farmacológicos no tratamento da dor.

A principal vantagem dessa técnica é que ela pode ser usada para explorar ainda mais mecanismos de dor e ações medicamentosas no cérebro. Para estudar o efeito das injeções intracranianas no comportamento agudo da dor em ratos, uma semana após a cirurgia, coloque o rato na placa de vidro de um aparelho Hargreaves, e use o aparelho para concentrar um feixe infravermelho através do plano de vidro sob a área plantar de um dos pés do rato. Para estudar os efeitos farmacológicos sinérgicos entre duas drogas de estudo diferentes, use um pedaço de tubo PE-50 anexado a uma seringa Hamilton de 10 miclites equipada com uma cânula injetor de 33 bitola que se estende um milímetro além das guias implantadas.

Injete 0,5 microliters ou menos da droga de estudo em uma cânula intracraniana durante um período de 100 segundos. Mantenha a cânula injetora no lugar por mais 60 segundos após a injeção para facilitar uma difusão lenta da solução. Então, injete intraperitoneally a segunda droga de interesse.

20 a 30 minutos após a injeção, realize o teste de reflexo plantar mais cinco vezes como demonstrado. Neste experimento representativo, a entrega intracraniana de um AMPAkine demonstrou um efeito analgésico aditivo quando coadministrado com morfina intraperitoneal, sugerindo que as injeções intracranianas têm o poder, pelo menos em parte, de descobrir um mecanismo de ativação de drogas no contexto da dor. Ao tentar este procedimento, é importante lembrar de acompanhar de perto o tempo do procedimento.

Após este procedimento, implantes intracranianos podem ser usados em conjunto com ensaios de dor para responder a perguntas adicionais sobre a região do cérebro responsável por um determinado fenótipo de dor, possíveis locais de ação medicamentosa ou possíveis mecanismos de medicamentos para dor.