Monitoramento em tempo real da respiração mitocondrial em células T primárias humanas diferenciadas por citocinas

O metabolismo mitocondrial é um regulador essencial da durabilidade e memória das células T. Medir a respiração mitocondrial, portanto, dá insights importantes sobre as propriedades das células T. A máquina de cavalos-marinhos pode medir vários elementos da respiração mitocondrial, em tempo real, em linfócitos T primários humanos vivos, sem a necessidade de qualquer rotulagem.

Este método é muito adequado para monitorar o condicionamento físico e o potencial de memória das células T, que são importantes preditores do sucesso da imunoterapia contra o câncer. Para começar, lave as contas CD3/CD28 transferindo 12,5 microliters de contas por milhão de células para um tubo de microcentrída e adicionando 12,5 microliters de PBS por 12,5 microliters das contas no tubo. Em seguida, coloque o tubo de microcentrifuge em um ímã adequado por um minuto, descarte o buffer e resuspenja as contas no volume original do meio da célula T.