Modelo Neonato de Injeção de Veias Retroorbitárias em Roedores

A injeção retro-orbital é um método de injeção especializado usado para administrar compostos na circulação venosa. A pesquisa com animais é um passo importante para o trabalho clínico. Como parte da pesquisa com animais, há a necessidade de administrar diferentes tipos de compostos por diferentes vias.

Algumas dessas vias incluem subcutânea, intraperitoneal e intravenosa. A injeção intravenosa é a via mais comumente utilizada em neonatos que estão na unidade de terapia intensiva neonatal. No entanto, na pesquisa com roedores, particularmente em roedores adultos, injeções IV são rotineiramente realizadas na veia da cauda.

Em neonatos, é extremamente difícil realizar uma injeção na veia caudal com sucesso e de forma reprodutível. Portanto, a rota retro-orbital pode ser utilizada como uma alternativa mais fácil. Primeiro, demonstraremos o uso de um corante, azul de tripano, para que o espectador possa ver claramente o corante entrando na circulação venosa.

O rato neonatal é colocado sob anestesia total, com a cabeça deitada de lado, apoiada acima de uma fonte de luz, de modo que o olho e a vasculatura lateral fiquem expostos e visíveis. A agulha é inserida na frente da cavidade ocular, o equivalente ao canto medial. Injete a solução em um movimento suave, suave e fluido.

Para melhor reproduzir esse procedimento, é importante o entendimento da anatomia venosa orbitária. No rato, há uma rede de várias veias logo abaixo do olho, que permitem acesso fácil e direto ao plexo venoso. No rato albino neonatal, também é visível tanto as veias temporais superficiais quanto as veias faciais.

Esse procedimento pode ser realizado exatamente da mesma maneira. Em camundongos neonatais. Use uma agulha com calibre 29 a 31 em torno de 0,30 milímetros.

Para volumes precisos, extrair a solução a ser injetada a partir de um volume pipetado. Colocar os animais em uma superfície plana em decúbito lateral. Induzir anestesia de corpo inteiro com isoflurano.

5% indução, 3% manutenção. Verifique a profundidade da anestesia usando o método do reflexo de retirada da tração. Com a cabeça voltada para a direita, administrar a injeção no seio retro-orbital direito.

Insira o bisel da agulha na frente da cavidade ocular, o equivalente ao canto médio, em um ângulo de aproximadamente 40 graus. Este ângulo permite que a agulha seja direcionada para a parte de trás da órbita do olho. Injete em um movimento suave, suave e fluido.

Aguarde um breve momento antes de retirar a agulha, lentamente, para evitar o refluxo. Use uma nova seringa estéril para cada animal para evitar contaminação. Coloque o filhote na caixa de recuperação, apoiado em um dispositivo de aquecimento protegido, em torno de 35 a 37 graus Celsius.

Aguarde a recuperação e verifique se há sinais de aflição antes de devolver o filhote à represa. Essa técnica foi utilizada para administrar o traçador biotina-dextran na vasculatura do cérebro de animais que sofreram hemorragia da matriz germinativa. Os animais que receberam uma injeção de soro fisiológico como controle não apresentam coloração visível da vasculatura dentro do cérebro.

A injeção retro-orbital bem sucedida do traçador de biotina-dextran permitiu avaliar sua presença na vasculatura cerebral dentro de 10 minutos após a administração retro-orbital. Essa técnica foi então utilizada para detectar o extravasamento vascular do traçador ao nível dos vasos sanguíneos individuais nos animais lesionados pelo GMH. Esse resultado permite, por exemplo, quantificar a lesão por meio da quantificação da quantidade de vasos sanguíneos que estão vazando após a lesão cerebral do GMH.

Além disso, esse procedimento também pode ser realizado sem fonte de luz, tornando-se uma técnica simples, direta e reprodutível que permite a administração de compostos diretamente na circulação venosa de ratos e camundongos neonatais. Quando realizado corretamente, este procedimento não deve resultar em quaisquer efeitos adversos. Essa raiz de administração permite injeções de anticorpos, células e outros compostos diretamente na circulação venal de animais neonatais.

Essa via é de maior relevância clínica quando comparada a outras vias, como injeções intraperitoneais ou subcutâneas.