Um modelo suíno de alta fidelidade de transplante cardíaco ortotópico após doação após morte circulatória

Apresentamos um modelo suíno de alta fidelidade para transplante cardíaco após morte circulatória, permitindo a avaliação da fisiopatologia relacionada ao DCD e apoiando pesquisas translacionais para melhorar a recuperação do aloenxerto. Desde 2019, a adoção clínica do transplante cardíaco de DCD cresceu nos Estados Unidos, com ensaios recentes mostrando sobrevivência de curto prazo não inferior em comparação com métodos concessionais de doação de morte cerebral. Os resultados após o transplante cardíaco de DCD foram ainda melhorados pelos avanços nos métodos de profusão livre de RAF, incluindo obtenção direta e perfusão normotérmica ex vivo, bem como perfusão regional normotérmica.

A disfunção primária do enxerto continua sendo um fator chave para a mortalidade de curto prazo após o transplante cardíaco por DCD. Embora lesão isquêmica quente e perturbação metabólica sejam fatores contribuintes propostos, o mecanismo subjacente por trás da DPP ainda permanece desconhecido. Este modelo suíno replica procedimentos clínicos de DCD com ajustes para anatomia específica da espécie.

Além disso, a perfusão ex vivo apoia o desenvolvimento de terapias direcionadas para aprimorar a preservação e a função dos aloenxertos. Após realizar um corte carotídeo e expor o coração doador, realizar uma análise de linha inicial do aloenxômito, incluindo registros de loop de pressão e volume. Para começar, meça o comprimento do cateter pressão-volume de estado sólido do local da canulação até o ápice do coração do porco.

Introduza o cateter sequencialmente na artéria carótida e na veia jugular interna. Guie o cateter para os ventrículos esquerdo e direito sob orientação do ultrassom epicárdico. Prepare o coração doador para a explantação canulando a raiz aórtica com uma abertura francesa de sete membros, fixando-a com um torniquete de ambiente e colocando um ponto de cordão de bolsa no apêndice auricular direito.

Interrompa a ventilação mecânica para iniciar o processo controlado da morte circulatória. O coração pode se distender. Espere 10 minutos após a morte confirmada, definida por atividade elétrica sem pulso e sem sinais de vida, antes de prosseguir.

A atividade elétrica lenta e sem pulso persiste em suínos por mais tempo do que em humanos, resultando em aumento da insulte isquêmica aloenxerta. Para a preparação ex vivo do dispositivo de profusão, use uma lâmina número 11 para fazer uma incisão de estocamento no apêndice auricular direito e canule com a cânula venosa francesa 34. Prenda a cânula com um torniquete rummel e conecte-a ao saco coletor de dispositivos de perfusão ex vivo.

Colete aproximadamente 1.200 a 1.500 mililitros de sangue doador no saco fornecido pelo fabricante. Após a coleta do sangue doado, aplique a pinça cruzada aórtica. Administre um litro de cardioplegia del Nido na raiz aórtica, atingindo uma pressão de 60 a 100 milímetros de mercúrio.

Transecto da veia cava inferior e do apêndice auricular esquerdo para ventilar ambos os ventrículos durante o parto da cardioplegia. Divida a veia cava inferior, a veia cava superior, a aorta um pouco distal à artéria inominada e a artéria pulmonar na bifurcação. Em seguida, transecte o átrio esquerdo do doador, garantindo que permaneça um manguito suficiente.

Retire o coração e coloque-o em uma bacia cheia de uma pasta fria e estéril para preparar a mesa dos fundos. Coloque quatro pontos horizontais de colchão equidistantes usando sutura Prolene 4-0 dentro da extremidade distal da aorta. Depois, insira o adaptador aórtico de profusão ex vivo e prenda com sutura de seda 0-0 ou fita umbilical.

Transporte o aloenxerto para o dispositivo de perfusão ex vivo e conecte o adaptador. Posicione o coração com o lado posterior voltado para cima e obtenha amostras de perfuso 8, exames de sangue e biópsias durante essa etapa. Neste modelo, o aloenxerto permaneceu no dispositivo de perfusão ex vivo a 34 graus Celsius por duas a três horas antes da implantação no receptor.

Após expor o coração nativo do receptor, prepare-se para a cardiectomia. Anule a aorta ascendente distal e depois realize a canulação venosa cavala. Aplique a pinça cruzada aórtica proximal à cânula e explante o coração receptor.

Deixe as manguitos auriculares intactos para implantação de biais. Transecte a aorta e a artéria pulmonar próximas à raiz. Uma vez que o coração nativo do receptor tenha sido explantado, comece com a implantação atrial do aloenxerto doador e inicie a anastomose auricular esquerda usando sutura 4-0 Proline.

Em seguida, complete a anastomose da artéria pulmonar, aorta e atrial direita com sutura contínua 4-0 Proline. Após completar toda a anastomose, solte o clamp cruzado aórtico para reperfundir o aloenxásio. Garanta hemostasia de todas as anastomoses.

Após 60 minutos de reperfusão, tente desmamar o receptor do bypass cardiopulmonar. O animal receptor foi sustentado por uma hora após a separação do bypass cardiopulmonar. Na fase de aquisição do DCD, o tempo decorrido desde a cessação das medidas de sustentação da vida no porco doador até a declaração de morte foi de aproximadamente 14,25 minutos.

O tempo de bypass cardiopulmonar operatório nos animais receptores foi de cerca de três horas, com um tempo médio de pinça cruzada de 1,5 horas. A avaliação ecocardiográfica epicárdica pós-transplante foi realizada para avaliar a função do enxerto após a implantação. Foram obtidas vistas padrão de eixo curto, quarta câmara e duas câmaras.

A função do enxerto pós-transplante variou de disfunção leve com hemodinâmica estável até disfunção severa com instabilidade hemodinâmica.