Поведение животных

Animal Behavior
Lab Manual
Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
Lab Manual Biology
Animal Behavior
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

8,207 Views

06:58 min
January 29, 2019
  1. Выбор камер
    • Перед началом экспериментов используйте одного из шарпи с лабораторного стола, чтобы провести линию по окружности дна обеих бутылок. Одна линия должна находиться на расстоянии 1 см от основания бутылки, а другая – в 1,5 см от основания бутылки.
    • Используйте лезвие бритвы, чтобы сделать небольшой надрез в каждой бутылке на отметке.
    • Затем вставьте ножницы и аккуратно разрежьте по линии, пока дно бутылок не будет полностью удалено.
    • Вставьте одно дно бутылки в другое.
    • Соедините бутылки скотчем, чтобы получилась безопасная камера.
    • Используй лезвие бритвы и ножницы, чтобы проделать отверстие в центре камеры.
    • Возьмите кусок ленты и загните край на себя, чтобы сделать язычок, и поместите ленту на отверстие. Примечание: Язычок помогает легко снять и снова прикрепить ленту к камере.
    • Используйте Sharpie, чтобы обозначить одну сторону камеры A и другую сторону B.
    • Получив колонию дрозофилы, проведите подсчет, чтобы убедиться, что в флаконе 40 живых особей.
  2. Geotaxis
    • Чтобы провести анализ геотаксиса, сначала прикрепите чистую пустую крышку от бутылки к каждому концу камеры выбора и переверните флакон с мухой вверх дном на его крышку.
    • Откройте клапан ленты в центре камеры выбора.
    • Вставь воронку в отверстие и засунь всех мух в камеру. Гипотеза: Альтернативная гипотеза состоит в том, что большее количество мух будет двигаться против силы тяжести или вверх, независимо от ориентации камеры выбора. С другой стороны, если мухи являются положительно геотактическими, то больше мух будут двигаться вниз или под действием силы тяжести. Нулевая гипотеза состоит в том, что мухи не будут иметь предпочтений в отношении силы тяжести и будут беспорядочно перемещаться внутри камеры.
    • Как только дрозофилы окажутся в камере, закройте заслонку ленты, поверните камеру так, чтобы она стояла вертикально со стороной А внизу, и запустите таймер.
    • Сразу же подсчитайте количество дрозофил, которые движутся вверх, и число, которое движется вниз. Запишите эти данные для временной точки 0 в таблицу.
    • Через 30 секунд поверните камеру так, чтобы сторона B оказалась внизу, и подсчитайте количество дрозофил, которые движутся вверх или вниз. Запишите эти данные для временной точки 30 в таблицу.
    • Через 60 секунд поверните камеру так, чтобы сторона A снова оказалась внизу, и запишите количество движущихся мух для временной точки 60. Нажмите здесь, чтобы скачать таблицу 1
    • Держите камеру над флаконом от мухи и осторожно откройте крышку, чтобы вернуть всех дрозофил обратно в их пустой флакон.
  3. Фототаксис <кнопка class="expand">Expand
    • Чтобы провести анализ фототаксиса, сначала накройте сторону A выбранной камеры оловянной фольгой, следя за тем, чтобы фольга достигала точного центра между двумя сторонами.
    • Убедитесь, что крышки закреплены на обоих концах камеры. ГИПОТЕЗЫ: В этом упражнении альтернативная гипотеза состоит в том, что больше мух будет обнаружено на светлой стороне камеры выбора, если дымоходы притягиваются светом, или на темной стороне, если они отталкиваются светом. Нулевая гипотеза состоит в том, что дрозофила не будет иметь предпочтений в отношении ни одного из стимулов. Таким образом, одинаковое количество мух будет найдено по обе стороны от камеры выбора.
    • Откройте клапан ленты в центре выбранной камеры, вставьте воронку в отверстие и вдавите все 40 мух в камеру, как описано ранее.
    • Установите таймер на 10 минут.
    • Когда звучит сигнал тревоги, остановите таймер и подсчитайте количество мух в открытой стороне B камеры.
    • Вычтите это число из общего количества мух, добавленных в камеру выбора, чтобы рассчитать количество мух на покрытой стороне A.
    • Запишите эти данные в таблицу для временной точки 10. Нажмите здесь, чтобы скачать таблицу 2
    • Осторожно, верните всех мух обратно в их пустой флакон.
  4. Chemotaxis
    • ГИПОТЕЗЫ: В этом упражнении альтернативная гипотеза заключается в том, что на боковой стороне камеры с яблочным уксусом будет обнаружено больше мух, если мух привлечет запах. Или, если мухи отпугиваются уксусом, то больше их будет обнаружено на боковой стороне камеры, представляющей воду без запаха. Нулевая гипотеза состоит в том, что дрозофила не будет иметь предпочтений в отношении ни одного из стимулов и будет перемещаться в камере хаотично. С помощью индивидуальной одноразовой пластиковой пипетки нанесите две капли яблочного уксуса на один ватный тампон для стороны А камеры.
    • Используйте индивидуальную одноразовую пластиковую пипетку, чтобы налить две капли дистиллированной воды на ватный тампон для стороны B камеры.
    • Сложите два куска ленты на себя, чтобы получить отдельные куски двустороннего скотча, и используйте ленту, чтобы прикрепить каждый ватный шарик к внутренней стороне крышки от одной бутылки.
    • Прикрутите крышки от бутылок с ватными шариками на соответствующие стороны камеры.
    • Перенесите всех мух в камеру и установите таймер на сигнал тревоги через 10 минут.
    • Когда звучит сигнал тревоги, остановите таймер и запишите количество мух с каждой стороны камеры. Нажмите здесь, чтобы скачать таблицу 3
    • В конце заключительного эксперимента поместите мух в морг-пробирку, содержащую 70% этанола.
    • Демонтируйте камеры выбора для переработки. ПРИМЕЧАНИЕ: Поскольку все химические вещества, используемые в этих экспериментах, безопасны для лаборатории, жидкости можно вылить в раковину, промыть камеры, а твердые частицы можно выбросить в мусор.
  5. Результаты
    • Соберите все данные, собранные для экспериментов с геотаксисом, фототаксисом и хемотаксисом.
    • Постройте эти значения в виде гистограмм для различных условий и разных временных точек.
    • Используйте эти данные, чтобы сделать выводы о поведении drosophila melanogaster.

Transcript