Для начала растворите 0,01 грамма LAP в конической трубке объемом 50 миллилитров, содержащей 20 миллилитров PBS. Добавьте в раствор LAP три грамма метакрилата желатина и 0,2 грамма фибриногена. Поместите смесь на водяную баню при температуре 37 градусов Цельсия.
Добавьте 300 микролитров предварительно подогретого геля в каждую гидрогелевую камеру платформы VOP, чтобы внедрить жертвенный рисунок. Используйте ультрафиолетовый свет для быстрого сшивания метакрилата желатина. После повторения УФ-сшивания для всех остальных лунок пипеткой впрыскайте по одному миллилитру DPBS в каждую сторону сосудистого канала каждой лунки.
Поместите тарелку при температуре четыре градуса Цельсия на 15 минут, чтобы разжижить Pluronic F127. Перед введением клеток в каналы профункционируют DMEMF12, содержащими 1%-ный гель матча, через каналы в течение 30 минут.
Hydrogel Preparation and Channel Embedding of a Vessels-on-a-Plate (VOP) Platform for the Culture of Human Umbilical Vein Endothelial Cells (HUVEC). J. Vis. Exp. (Pending Publication), e201738, doi:10.3791/201738 (2024).