Диагностика экто-и эндопаразиты в лабораторных крыс и мышей

Общая цель этой процедуры состоит в том, чтобы определить, присутствуют ли паразиты у лабораторных крыс или мышей. Это может быть достигнуто различными способами, включая осмотр шерсти и кожи кала и исследование содержимого кишечника. В конечном счете, можно получить результаты, которые дают важную информацию об общем состоянии здоровья колонии благодаря регулярному исследованию этих образцов.

Визуальная демонстрация этих методов имеет решающее значение, так как они не выполняются тщательно и тщательно. Паразитарная инфекция может быть пропущена. Как правило, люди, плохо знакомые с этими методами, будут испытывать трудности, потому что даже если методы выполнены правильно, паразиты могут быть неправильно идентифицированы.

Методы, которые мы продемонстрируем, могут помочь ответить на ключевые вопросы о состоянии здоровья крыс и мышей, используемых для вашего исследования, до взятия образцов меха и перианального периода. Приготовьте не менее двух стекол на одно животное с каплями минерального масла. Поднимите интересующую мышь из клетки и поместите ее на внутреннюю сторону перевернутой крышки клетки.

Держа его за хвост. Плотно приклейте целлофановую ленту длиной пять сантиметров к мыши, промежности и перианальной области. В случае успеха, волосы должны прилипнуть к ленте.

Продолжайте удерживать животное и обхватите его шерсть щипцами. Аккуратно выщипывайте образцы меха из лопаточной области, вентральной шейной области, подмышечной области, паховой области и спинного крестца. Поместите эти образцы на пятисантиметровую ленту из целлофановой ленты.

По мере взятия каждого образца приложите ленту к скользкой липкой стороной вниз. После того, как все образцы будут взяты, нанесите еще одну каплю минерального масла на каждый образец и нанесите стеклозащитные стекла. При исследовании перианальных слайдов маловероятно, что будут обнаружены яйца какого-либо паразита, кроме si facia.

Для исследования кала соберите от двух до пяти гранул с каждого животного или клетки. Если образцы очень сухие, смочите их 500 микролитрами 0,9% физиологического раствора. Поместите образцы во флакон с таблетками объемом 10 миллилитров или фекальное флотационное устройство.

Поместите флакон для сбора в чашку Петри и заполните флакон на четверть плотной средой для флотации. Затем разомните и размешайте каловые массы в растворе во флаконе до тех пор, пока не останется крупных кусочков. Продолжайте добавлять флотационную среду до тех пор, пока над краем флакона не образуется мениск.

Затем поместите крышку на мениск и выдержите флакон при комнатной температуре в течение 15 минут. Во время инкубации паразиты, яйца и протеасомы и оазис поднимаются вверх и прилипают к защитному стеколу, который затем крепится к предметному стеклу для дальнейшего изучения. Этот анализ может быть выполнен в чем-то таком простом, как флакон с таблетками.

Если фейзер недоступен, начните со сбора от двух до 10 фекальных гранул на животное, а если они высохли, регидратируйте их в 500 микролитрах, 0,9% физиологического раствора. Наполните стеклянную центрифужную пробирку объемом 15 миллилитров, заполненную на четверть густым флотационным раствором, и перемешайте образец. Накройте стеклянную трубку пластиковой крышкой и перемешайте смесь в течение 15-30 секунд, пока она не приобретет однородный вид.

Теперь добавьте дополнительный флотационный раствор в каждую пробирку для образцов. Для формирования незначительного положительного мениска. Приложите пластиковый защитный колпак к каждой трубке и убедитесь, что он полностью соприкасается с пробиркой.

Для наилучшего прилегания очистите пробирку тампоном. Далее центрифуга, пробирки и крышка скользят в течение 10 минут после отжима. Если какие-либо крышки утеряны или сломаны, замените их и аккуратно наклоните трубки так, чтобы мениск касался новой крышки.

Затем снимите все защитные стекла и поместите их на предметное стекло микроскопа с маркировкой. Пятно йодом поможет выявить кисты у животного, находящегося под наркозом или усыпленного. Подстригите спинной волосяной покров у основания хвоста и височной области головы или вокруг любого повреждения кожи или другого участка, который необходимо соскоблить, глубоко соскоблив кожу головы лезвием головы в направлении, противоположном росту волос.

Это разрушает эпидермис. Протрите лезвие минеральным маслом, нанесенным на предметное стекло с маркировкой. При необходимости добавьте еще каплю масла.

Перед тем, как накрыть образец стеклозащитной крышкой, поместите усыпленное животное на чистую доску для вскрытия и с помощью щипцов подтяните брюшную стенку в области гениталий. Затем с помощью ножниц аккуратно надрежьте брюшную стенку от области гениталий до основания грудной клетки, а кожу и мышцы удалите для обнажения кишечника. Затем соберите часть секума и двенадцатиперстной кишки в крышку чашки Петри.

Надрежьте каждый сегмент кишечника вдоль. Чтобы обнажить слизистую, поместите две капли 0,9%-ного физиологического раствора на одно предметное стекло с меткой. Затем с помощью стерилизованной петли для посева соскребите слизистую, двенадцатиперстную кишку и поместите соскоб в одну каплю физиологического раствора.

Повторите процесс, переложив образец из слепой кишки в другую каплю. Удалите оставшиеся кишки. Начните с двенадцатиперстной кишки и продолжайте до нисходящей ободочной кишки.

Переложите кишки на дно 100-миллилитровой чашки Петри в чашку Петри. С помощью ножниц разрежьте кишечник на более мелкие участки. Добавьте в посуду достаточное количество воды из-под крана, чтобы едва погрузилась собранная ткань.

Инкубируйте смесь образцов при температуре от 35 до 40 градусов Цельсия в течение не менее 10 минут. Это освободит и обнажит люминальные шлемы во время инкубации мацерированного образца кишечника. Используйте микроскопию с контрастом лица для исследования образцов двенадцатиперстной кишки и SQL на наличие паразитов.

После того как инкубация полного кишечного образца будет завершена, изучите содержимое чашки под рассекающим микроскопом. С помощью щупа произведите тщательный осмотр. Острицы будут выглядеть как маленькие белые червячки, похожие на волосы.

Ленточные черви будут выглядеть как сегментированные плоские черви. Соберите любых червей или подозрительные материалы с помощью небольших щипцов и закрепите на предметной горке. Для дальнейшего обследования под световым микроскопом поместите усыпленную мышь или крысу непосредственно на предметное столико препарирующего микроскопа под объективом 10 раз, с помощью аппликаторной палочки сделайте пробор волос и осмотрите основание волосяных стержней.

Эктопаразиты могут выглядеть как перхоть или желтый восковой налет у основания волосяного стержня или непосредственно на коже. На минимуме поиск эктопаразитов в черепной области. Паховая и подмышечная области.

Внимательно проверьте между глазами и копейку между копейкой, между лопаткой и под челюстью. С помощью небольших щипцов. Перенесите возможных эктопаразитов и другие подозрительные материалы на предметное стекло.

Установите их в минеральное масло для идентификации. Эти процедуры позволят обнаружить множество распространенных паразитов. Вот несколько примеров.

Это яйца SE facia, найденные из образцов промежностной ленты. Было обнаружено, что меховая пробка содержит клеща myopia musculi из препарата для центрифугирования кала. Это яйца пициса.

При этом непосредственном осмотре слизистой оболочки кишечника можно увидеть триони. Обнаружен осмотр мацерированного кишечника Эти взрослые острицы После освоения это полное обследование на паразитов может занять менее часа. После просмотра этого видео у вас должно сложиться хорошее представление о том, как выполнять различные обследования на паразитов у крыс и мышей. Не стоит забывать, что некоторые из этих паразитов могут передаваться человеку.

Всегда соблюдайте основные правила безопасности в лаборатории.