Энциклопедия экспериментов JoVE
Биологические методы
0 просмотров • 3:11 мин. • July 8th, 2025
Начинают с предварительно собранной изоэлектрической фокусировки, ИЭФ ячейки – установки жидкофазного электрофореза. Эта колонна представляет собой разделенную горизонтальную пористую камеру с четко выраженными положительными и отрицательными выводами на концах.
Теперь возьмем растительный экстракт, содержащий сложную смесь по-разному заряженных компонентов с различными изоэлектрическими точками, pI - pH, при котором суммарный заряд молекулы равен нулю.
Экстракт дополняют амфолитами переменного заряда, которые в дальнейшем облегчают фракционирование компонентов образца.
Загрузите образец в загрузочные отверстия колонны. В настоящее время столбец ВЭФ имеет постоянный рН. Затем подайте высоковольтное напряжение для начала электрофореза.
Под действием электрического поля растворимые амфолиты мигрируют к противоположно заряженным электродам и создают линейный градиент pH по всей колонке. Компоненты образца начинают мигрировать через градиент pH жидкой фазы, а компоненты, расположенные при pH ниже pI, несут суммарный положительный заряд.
Они мигрируют к отрицательному электроду до тех пор, пока компоненты не достигнут своего pI, где их заряд нейтрализуется, и миграция прекращается. Анал
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео