Na&iuml;ve Adult Stem Cells Isolation from Primary Human Fibroblast Cultures

Vera Wenzel; Daniela Roedl; Johannes Ring; Karima Djabali

doi:10.3791/50185

Наивные стволовых клеток взрослых Изоляция от первичных человеческих культурах фибробластов

JoVE Journal
Biology

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Biology

Naïve Adult Stem Cells Isolation from Primary Human Fibroblast Cultures

Наивные стволовых клеток взрослых Изоляция от первичных человеческих культурах фибробластов

Full Text

14,815 Views

07:39 min

May 3, 2013

DOI: 10.3791/50185-v

Vera Wenzel¹, Daniela Roedl¹, Johannes Ring², Karima Djabali¹

¹Department of Dermatology and Institute for Medical Engineering,Technische Universität München, ²Department of Dermatology and Allergology,Technische Universität München

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study presents a method for isolating naïve multipotent skin-derived precursor (SKP) cells from primary human fibroblast cultures. The SKPs exhibit similar stem cell properties to those derived from human skin biopsies, expressing markers such as nestin, OCT4, and Nanog.

Key Study Components

Area of Science

Stem cell biology
Cell culture techniques
Regenerative medicine

Background

Skin-derived precursor cells are a type of stem cell.
Primary human fibroblast cultures can be a source for these cells.
Understanding the properties of SKPs can advance regenerative therapies.
Stress resistance in cells may indicate stem cell characteristics.

Purpose of Study

To isolate naïve SKP cells from fibroblast cultures.
To demonstrate the stem cell-like properties of these isolated cells.
To explore the potential for differentiation into other cell types.

Methods Used

Establishment of primary fibroblast cultures.
Selection of SKP cells based on stress resistance.
Culturing cells to form spheres under controlled conditions.
Expansion of sphere cultures over several weeks.

Main Results

SKP cells derived from fibroblast cultures share properties with adult stem cells.
These cells express neural crest and multipotent markers.
SKP cells can be directed to differentiate into smooth muscle cells.
Resistance to stress conditions indicates potential for stem cell applications.

Conclusions

The method effectively isolates SKP cells from fibroblast cultures.
SKPs exhibit key stem cell characteristics, making them valuable for research.
This approach may enhance understanding of stem cell biology and regenerative medicine.

Frequently Asked Questions

What are SKP cells?

SKP cells are naïve multipotent skin-derived precursor cells that can differentiate into various cell types.

How are SKP cells isolated?

They are isolated from primary human fibroblast cultures based on their resistance to stress conditions.

What markers do SKP cells express?

SKP cells express the neural crest marker nestin and multipotent markers such as OCT4 and Nanog.

Can SKP cells differentiate into other cell types?

Yes, SKP cells can be directed to differentiate into smooth muscle cells.

Why is stress resistance important for SKP cells?

Stress resistance suggests that these cells may possess stem cell-like properties, enhancing their potential for research and therapy.

What is the significance of this study?

This study provides a method for isolating SKP cells, which could advance regenerative medicine and stem cell research.

Мы сообщаем о способе выделения наивным мультипотентны, полученных из кожи предшественника (SKP) клеток из первичной культуры фибробластов человека. Покажем, что эти SKPs, полученных из культур фибробластов имеют сходные свойства стволовых клеток, чтобы те, выводится непосредственно из биопсии человеческой кожи. Эти клетки экспрессируют нервной маркер гребень, нестин, в дополнение к мультипотентных маркеры, такие как OCT4 и Nanog.

Общая цель этой процедуры заключается в выделении наивных мультипотентных клеток-предшественников, полученных из кожи, из первичных культур фибробластов человека. Во-первых, создайте первичную культуру фибробластов и выберите для наивной кожи клетки-предшественники на основе устойчивости к стрессовым условиям, таким как колебания температуры и истощение питательных веществ. В следующей культуре клетки, образующие сферы в условиях контролируемого роста, продолжают расти и расширять культуры сфер в течение нескольких недель и демонстрируют, что эти клетки-предшественники имеют схожие свойства со взрослыми стволовыми клетками.

В конечном счете, клетки SKP могут быть направлены на дифференцировку в гладкомышечные клетки. Впервые у меня возникла идея об этом методе, когда я заметил, что в замороженных ОТ первичных фибробластных структур, которые испытывают напряжение из-за изменения температуры во время хранения или транспортировки, несколько клеток остаются дееспособными. Это говорит о том, что небольшое количество клеток устойчиво к стрессу и может быть дермальными стволовыми клетками, что свидетельствует о том, что процедура будет актуальной.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos