Сбор слюны и измерение кортизола и альфа-амилазы в слюне у немощных пожилых людей, проживающих в сообществе, с помощью лиц, осуществляющих уход за членами семьи

Общая цель этой процедуры состоит в том, чтобы продемонстрировать сбор и анализ биологических показателей слюны в сообществе, проживающем в сообществе и ослабленном с медицинской точки зрения населении. Это достигается путем предварительной сборки необходимых расходных материалов для сбора слюны. Вторым шагом является организация визита на дом, предоставление принадлежностей и демонстрация процедур сбора слюны лицу, осуществляющему уход.

Далее предоставьте письменную инструкцию и ответьте на любые вопросы. Заключительным этапом является возврат образцов слюны в лабораторию и проведение процедур анализа. В конечном счете, протокол предназначен для измерения суточного профиля альфа-амилазы в слюне и концентраций кортизола в слюне у пациентов с ослабленным здоровьем, проживающих по месту жительства.

Этот метод ответит на ключевые вопросы в области биоповеденческих исследований, чтобы улучшить наше понимание биологической чувствительности и восприимчивости к процессам, связанным со стрессом. Прежде чем запланировать визит на дом, участники собирают и собирают необходимые материалы, которые включают в себя четыре психометрических детских тампона, четыре пробирки для хранения тампонов, четыре колпачка для туб с цветовой кодировкой, пять белых этикеток, один пластиковый пакет с застежкой-молнией, инструкцию по сбору слюны, пять нитроперчаток и коробку для хранения. С помощью руки в нитро перчатке поместите четыре детских тампона Salome в четыре пробирки для хранения тампонов и накройте их желтыми, оранжевыми, синими и фиолетовыми колпачками соответственно.

Затем наклейте этикетку на каждую пробирку для хранения, чтобы указать время сбора. Положите четыре пробирки для хранения с крышками, инструкцию по сбору слюны и четыре нитроперчатки в пакет с застежкой-молнией и наклейте на него этикетку с идентификатором субъекта и датой сбора. В соответствии с этим графиком короткий домашний визит к субъектам, на которые было получено предварительное согласие, и за день до забора слюны.

Прибыв домой к субъекту, отнесите пластиковый пакет с принадлежностями и инструкцию к сборщику слюны. Просмотрите лист с инструкциями и подчеркните необходимость записывать время начала и окончания сбора слюны, выделяя записанные инструкции. Запишите название, дозировку и график приема всех рецептурных и безрецептурных лекарств, принимаемых участником в течение последних 48 часов.

Проинструктируйте слюносборника или СК приложить нитроперчатку к доминирующей руке. Попросите участника наклонить голову вперед, чтобы слюна могла скапливаться на полу его рта. После этого проинструктируйте СК открыть пробирку для хранения тампона и извлечь тампон из полости рта.

Проинструктируйте СК поместить тампон из полости рта под переднюю часть языка пожилого человека, чтобы впитать около трех капель скопившейся слюны, и удерживать тампон из полости рта в течение двух минут, чтобы убедиться, что он пропитан, пусть СК вернет насыщенный тампон из полости рта обратно в корзину пробирки для хранения тампона. и установите на место колпачок. Затем попросите СК немедленно поместить пробирку в ящик для хранения и поместить ее в морозильную камеру. Выбросив перчатку в мусорное ведро, посоветуйте специалисту по слюне записать время начала и окончания в инструкции по слюне.

Затем сообщите СК о том, что на следующий день они будут собирать образцы слюны четыре раза, а именно после пробуждения через 30 минут после пробуждения в середине утра и вечером, попросите СК сказать пациенту прополоскать рот водой за 10 минут до сбора слюны. После сбора слюны выбросьте образцы, явно загрязненные кровью. Проинструктируйте СК о том, что образцы слюны должны оставаться в морозильной камере до тех пор, пока они не будут извлечены исследовательской группой.

Позвоните исследовательской группе, чтобы подтвердить, что они назначат время и день для забора замороженных образцов и привезут новые материалы для сбора слюны на любую будущую дату сбора. После того, как образцы были извлечены из морозильной камеры субъекта, храните их в замороженном виде во время транспортировки в лабораторию, поместив их в изолированный пакет для заморозки. По прибытии в лабораторию замените белую этикетку на каждой пробирке на последовательный штрих-код.

Убедитесь, что последовательный штрих-код совпадает с идентификатором субъекта, датой забора и временем забора. Затем верните образцы слюны в морозильную камеру при температуре минус 20 градусов Цельсия, чтобы выпасть в осадок муцин. После размораживания образцов слюны центрифугируйте образцы при 1500-кратном течении силы тяжести в течение 15 минут.

После того как реактивы набора для анализа слюны находятся при комнатной температуре в течение примерно 90 минут, приготовьте промывочный буфер, следуя инструкциям набора, пипетку 25 микролитров стандартных контрольных приборов и образцы в соответствующие лунки 96-луночного планшета. Вслед за этим в лунки вводят 200 микролитров предварительно приготовленного раствора фермента. Перемешайте образцы, поместив планшет на вращатель на пять минут при 500 об/мин.

После инкубации образцов при комнатной температуре в течение 55 минут вымойте и промокните планшет промывочным буфером четыре раза. Затем добавьте 200 микролитров тетраэтилбензина или раствора ТМБ. После этого образцы перемешиваются в течение пяти минут.

При 500 об/мин накройте тарелку алюминиевой фольгой и выдержите их в темноте еще 25 минут. Когда закончите, добавьте 50 микролитров стоп-раствора и перемешайте образцы в течение трех минут при 500 об/мин. В течение 10 минут после добавления стоп-раствора сотрите дно пластины и считайте показания с помощью считывателя пластин с точностью до 450 нанометров.

Далее рассчитайте концентрацию кортизола с использованием средней оптической плотности. Вычтите среднюю оптическую плотность в неспецифических связующих лунках из средней оптической плотности в нулевой стандартной контрольной и выборочной лунках. Наконец, оцените концентрацию контрольных и неизвестных факторов с помощью программного обеспечения, способного обеспечить логистику.

Описанные процедуры предназначены для измерения суточного профиля концентраций слюны, альфа-амилазы и кортизола в слюне. Поскольку было показано, что результаты кортизола имеют положительную асимметрию, предлагается использовать логарифмическое преобразование данных для получения нормального распределения. Существует несколько стратегий для моделирования различий в суточных ритмах кортизола и альфа-амилазы.

Первая стратегия заключается в том, чтобы составить график суточного изменения альфа-амилазы или кортизола между пробуждением и 30 минутами после пробуждения. Вторая стратегия заключается в построении графика общей концентрации кортизола или альфа-амилазы в течение дня. Полученные суммарные параметры можно сгруппировать в две общие категории: мера величины реакции и мера характера реакции с течением времени.

Моделирование кривой роста может быть полезно для исследований, в которых у индивидуумов собирается несколько образцов в течение дня. Кривая роста может быть подобрана, чтобы учесть индивидуальные различия в суточном цикле путем добавления предикторов на индивидуальном уровне или уровне измерения. После просмотра этого видео у вас должно быть хорошее понимание того, как собирать слюну и как обучать лиц, осуществляющих уход, как собирать слюну медицинскими методами для наших пожилых людей в домашних условиях, а также у вас должно быть хорошее понимание того, как проводить лабораторный анализ аналитов слюны, которые осуществимы, имеют высокую податливость и качество образцов.