Ex Vivo Лазерно-индуцированное Травма спинного мозга модель для оценки Механизмы дегенерации аксонов в режиме реального времени

Общей целью данного эксперимента является оценка механизмов острой аксональной дегенерации в режиме реального времени. Это достигается за счет выделения одной YFP-положительной нервной и спинномозговой ткани бедра при постоянной перфузии ткани искусственной спинномозговой жидкостью, насыщенной кислородом с низким содержанием кальция. Затем ткань спинного мозга выравнивают под объективом двухфотонного микроскопа с сохранением физиологических условий, а миелин окрашивают липофильным флуоресцентным красителем нильского красного.

Затем на дорсальной поверхности дорсальной колонны создается поражение микроразмера путем регулировки мощности лазера с целью разрезания миелинизированных аксонов внутри колонок. Результаты показывают ретракцию поврежденных аксонов, периаксональный, миелиновый отек и другие клеточные реакции, основанные на количественных измерениях изображений. Так что главное преимущество этой методики перед существующими методами заключается в том, что мы задействуем весь шейный отдел спинного мозга и поэтому волокна тыльного столба остаются неповрежденными.