-1::1
Simple Hit Counter
Skip to content

Products

Solutions

×
×
Sign In

RU

EN - EnglishCN - 简体中文DE - DeutschES - EspañolKR - 한국어IT - ItalianoFR - FrançaisPT - Português do BrasilPL - PolskiHE - עִבְרִיתRU - РусскийJA - 日本語TR - TürkçeAR - العربية
Sign In Start Free Trial

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

Behavior
Biochemistry
Bioengineering
Biology
Cancer Research
Chemistry
Developmental Biology
View All
JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

Biological Techniques
Biology
Cancer Research
Immunology
Neuroscience
Microbiology
JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduate courses

Analytical Chemistry
Anatomy and Physiology
Biology
Calculus
Cell Biology
Chemistry
Civil Engineering
Electrical Engineering
View All
JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

Advanced Biology
Basic Biology
Chemistry
View All
JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

Biology
Chemistry

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

Accounting
Finance
Macroeconomics
Marketing
Microeconomics

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Authors

Teaching Faculty

Librarians

K12 Schools

Biopharma

Products

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduates

JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Solutions

Authors
Teaching Faculty
Librarians
K12 Schools
Biopharma

Language

ru_RU

EN

English

CN

简体中文

DE

Deutsch

ES

Español

KR

한국어

IT

Italiano

FR

Français

PT

Português do Brasil

PL

Polski

HE

עִבְרִית

RU

Русский

JA

日本語

TR

Türkçe

AR

العربية

    Menu

    JoVE Journal

    Behavior

    Biochemistry

    Bioengineering

    Biology

    Cancer Research

    Chemistry

    Developmental Biology

    Engineering

    Environment

    Genetics

    Immunology and Infection

    Medicine

    Neuroscience

    Menu

    JoVE Encyclopedia of Experiments

    Biological Techniques

    Biology

    Cancer Research

    Immunology

    Neuroscience

    Microbiology

    Menu

    JoVE Core

    Analytical Chemistry

    Anatomy and Physiology

    Biology

    Calculus

    Cell Biology

    Chemistry

    Civil Engineering

    Electrical Engineering

    Introduction to Psychology

    Mechanical Engineering

    Medical-Surgical Nursing

    View All

    Menu

    JoVE Science Education

    Advanced Biology

    Basic Biology

    Chemistry

    Clinical Skills

    Engineering

    Environmental Sciences

    Physics

    Psychology

    View All

    Menu

    JoVE Lab Manual

    Biology

    Chemistry

    Menu

    JoVE Business

    Accounting

    Finance

    Macroeconomics

    Marketing

    Microeconomics

Start Free Trial
Loading...
Home
JoVE Journal
Biology
Визуализация взаимодействия белков ДНК по иммунофлюоресценции
Визуализация взаимодействия белков ДНК по иммунофлюоресценции
JoVE Journal
Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biology
Visualization of DNA Repair Proteins Interaction by Immunofluorescence

Визуализация взаимодействия белков ДНК по иммунофлюоресценции

Full Text
11,290 Views
07:55 min
June 26, 2020

DOI: 10.3791/61447-v

Bárbara de la Peña Avalos1,2, Eloïse Dray1,2

1Department of Biochemistry and Structural Biology,University of Texas Health Science Center at San Antonio, 2Mays Cancer Center at UT Health San Antonio MD Anderson Cancer Center

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study explores the dynamics of DNA repair protein recruitment in human cells following DNA damage. By utilizing indirect immunofluorescence, the research investigates protein-protein interactions and the formation of repair protein foci at damage sites. HeLa cells are employed as a model system to analyze spatial and temporal patterns in protein localization.

Key Study Components

Research Area

  • Cell Biology
  • Molecular Biology
  • Genetics

Background

  • Understanding DNA damage response mechanisms is crucial for insights into genomic integrity.
  • Protein foci formation plays a central role in the DNA repair process.
  • Indirect immunofluorescence provides a powerful method for visualizing protein interactions.

Methods Used

  • Indirect immunofluorescence for detecting DNA repair proteins
  • HeLa cells as the biological system
  • Image acquisition and analysis for evaluating protein localization and colocalization

Main Results

  • Identified the temporal recruitment of DNA repair proteins post-irradiation.
  • Documented the formation of protein foci at sites of DNA damage.
  • Provided quantitative analysis of colocalization indicating potential direct interactions between proteins.

Conclusions

  • The study elucidates the mechanisms of protein recruitment and interaction in response to DNA damage.
  • Findings contribute to the broader understanding of DNA repair pathways in cellular contexts.

Frequently Asked Questions

What is the significance of DNA repair proteins?
DNA repair proteins are essential for maintaining genomic stability and preventing mutations.
How does indirect immunofluorescence work?
Indirect immunofluorescence uses antibodies to detect specific proteins, allowing visualization under a fluorescence microscope.
Why were HeLa cells chosen for this study?
HeLa cells are widely used in biological research due to their robustness and well-characterized biology.
What are protein foci?
Protein foci are clusters of proteins that localize at sites of cellular activity, such as DNA damage.
What techniques were used for image analysis?
Image acquisition software and analysis tools were employed to evaluate protein localization and colocalization.
How can colocalization indicate protein interactions?
Colocalization of proteins in the same pixel can suggest that they interact directly or are part of the same complex.
How does the formation of foci relate to DNA repair?
Focus formation is related to the recruitment and concentration of repair proteins necessary for effective DNA repair.

После повреждения ДНК, человеческие клетки активируют необходимые пути восстановления для восстановления целостности их генома. Здесь мы описываем метод косвенного иммунофторесценции как средство обнаружения белков восстановления ДНК, анализа их пространственного и временного набора, а также помогаем допросить взаимодействие белково-белкового белка в местах повреждения ДНК.

Косвенная иммунофлуоресценция позволяет обнаруживать белки ДНК, фотографии пространственного и временного набора и помогает допрашивать взаимодействия протеинпротеина в месте повреждения ДНК. После повреждения ДНК, белки восстановления ДНК набираются на оскорбление ДНК, в то время как их концентрация увеличивается локально, и они образуют группы, называемые очагами, которые могут быть визуализированы косвенным иммунофлюоресценцией на фиксированных образцах. Этот метод может быть использован для обнаружения белковых очагов, а также для количественной оценки колокализации настоящего в клетках.

Это может помочь объяснить последовательность событий, необходимых для сложного формирования и для восстановления ДНК. определенные взаимодействия proteinprotein могут быть повлекли за собой от таких экспериментов. Демонстрация процедуры будет Барбара Де Ла Пена, очень талантливый Postdoc Фото из моей лаборатории Начните с ростом 40000 клеток HeLa в каждом более чем 12 хорошо пластины с 18 миллиметров круглые стеклянные крышки до 80% слияния.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

Sign In Start Free Trial

Explore More Videos

Биология Выпуск 160 Иммунофлюоресценция ко-локализация ядерные очаги облучение индуцированных очагов ремонт повреждений ДНК

Related Videos

Иммунофлуоресцентная визуализация белковых взаимодействий репарации ДНК

05:42

Иммунофлуоресцентная визуализация белковых взаимодействий репарации ДНК

Related Videos

787 Views

Иммунофлуоресцентная микроскопия для анализа двухцепочечных разрывов ДНК

05:23

Иммунофлуоресцентная микроскопия для анализа двухцепочечных разрывов ДНК

Related Videos

1.2K Views

Визуализация miniSOG меткой репарации ДНК белков в сочетании с электронной спектроскопии изображений (ESI)

13:06

Визуализация miniSOG меткой репарации ДНК белков в сочетании с электронной спектроскопии изображений (ESI)

Related Videos

10.6K Views

Обнаружение и визуализация ДНК-индуцированных белковых комплексов в суспензионных клеточных культурах с использованием анализа лигирования близости

13:10

Обнаружение и визуализация ДНК-индуцированных белковых комплексов в суспензионных клеточных культурах с использованием анализа лигирования близости

Related Videos

10.7K Views

Передовые методы Confocal микроскопии для изучения кинетики в повреждения ДНК и белок белковых взаимодействий

12:43

Передовые методы Confocal микроскопии для изучения кинетики в повреждения ДНК и белок белковых взаимодействий

Related Videos

11.6K Views

Иммунофлуоресценции γH2AX и 53BP1 для анализа формирования и ремонт двухнитевые разрывы ДНК

10:47

Иммунофлуоресценции γH2AX и 53BP1 для анализа формирования и ремонт двухнитевые разрывы ДНК

Related Videos

17.5K Views

Расследование белка вербовки для поражения ДНК с помощью 405 нм лазер микро облучения

12:29

Расследование белка вербовки для поражения ДНК с помощью 405 нм лазер микро облучения

Related Videos

10K Views

Характеризуя процессов репарации ДНК в переходных и Long-lasting двухнитевые разрывы ДНК по микроскопии иммунофлуоресценции

08:31

Характеризуя процессов репарации ДНК в переходных и Long-lasting двухнитевые разрывы ДНК по микроскопии иммунофлуоресценции

Related Videos

9.7K Views

Иммунофлуоресценция Визуализация повреждения ДНК и ремонт Фочи в раковых клетках толстой кишки человека

05:18

Иммунофлуоресценция Визуализация повреждения ДНК и ремонт Фочи в раковых клетках толстой кишки человека

Related Videos

11.9K Views

Визуализация белков репарации повреждений ДНК в органоидах рака яичников пациента с помощью иммунофлюоресцентных анализов

04:07

Визуализация белков репарации повреждений ДНК в органоидах рака яичников пациента с помощью иммунофлюоресцентных анализов

Related Videos

2.4K Views

JoVE logo
Contact Us Recommend to Library
Research
  • JoVE Journal
  • JoVE Encyclopedia of Experiments
  • JoVE Visualize
Business
  • JoVE Business
Education
  • JoVE Core
  • JoVE Science Education
  • JoVE Lab Manual
  • JoVE Quizzes
Solutions
  • Authors
  • Teaching Faculty
  • Librarians
  • K12 Schools
  • Biopharma
About JoVE
  • Overview
  • Leadership
Others
  • JoVE Newsletters
  • JoVE Help Center
  • Blogs
  • JoVE Newsroom
  • Site Maps
Contact Us Recommend to Library
JoVE logo

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. All rights reserved

Privacy Terms of Use Policies
WeChat QR code