RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
ru_RU
Menu
Menu
Menu
Menu
DOI: 10.3791/64875-v
Yang Li*1,2, Xue Qiao*1, Xuechuan Hong1,2
1College of Science, Research Center for Ecology, Laboratory of Extreme Environmental Biological Resources and Adaptive Evolution,Tibet University, 2State Key Laboratory of Virology, Key Laboratory of Combinatorial Biosynthesis and Drug Discovery (MOE) and Hubei Province Engineering and Technology Research Center for Fluorinated Pharmaceuticals,Wuhan University School of Pharmaceutical Sciences
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
В настоящем протоколе описывается детальная операция флуоресцентной визуализации мыши в режиме реального времени NIR-II с использованием оптического устройства визуализации NIR-II.
Визуализация сосудов и опухолей с высоким разрешением была реализована с помощью ближнего инфракрасного и флуоресцентного нанопроба, обеспечивая точный и эффективный метод направления сосудистых заболеваний и рака. Визуализация in vivo в окне NIR-II, которая позволяет нам глубоко заглянуть в живой объект, создает возможности для биомедицинских исследований и наших клинических применений. Подготовьтесь к получению изображений в ближнем инфракрасном диапазоне II или NIR-II, поместив имеющийся в продаже черный картон в центр носителя устройства формирования изображения.
Затем поместите образец поверх черного картона так, чтобы он находился в центре носителя. После выбора соответствующего фильтра выполните регулировку высоты платформы. Нажмите и удерживайте опцию платформы вверх на сенсорном экране области управления консолью оператора, чтобы переместить ее вверх.
И нажмите и удерживайте платформу, чтобы переместить ее вниз. После синтеза красителя NIR-II HLY1 подготовьте точки HLY1 методом наноосаждения с использованием DSPE-PEG-2K в качестве матрицы инкапсуляции. Для этого поместите стакан, содержащий раствор 10 миллиграммов DSPE-PEG-2K в девять миллилитров воды для обработки ультразвуком при температуре 25 градусов по Цельсию.
Затем растворите один миллиграмм HLY1 в одном миллилитре тетрагидрофурана или ТГФ. И медленно добавляйте раствор в водный раствор DSPE-PEG-2K, подвергающийся обработке ультразвуком. Впоследствии удалите ТГФ из смеси с помощью диализа.
После концентрирования вышеуказанного раствора центробежно с ультрафильтрацией при 7, 100 G в течение 10 минут поместите его в холодильник с температурой четыре градуса Цельсия для дальнейшего использования. Для визуализации in vivo вводите точки HLY1 внутривенно анестезированным мышам. А через три минуты приступайте к выполнению флуоресцентной визуализации кровеносных сосудов всего тела мышей с помощью оптической системы визуализации NIR-II.
Сосредоточьтесь на голове мыши, чтобы получить сосудистую визуализацию мозга. Установите параметры прибора оптической системы визуализации NIR-II на 90 милливатт на квадратный сантиметр и 808-нанометровый лазер. Соберите изображения через пять минут после инъекции точек HLY1 мышам и обработайте данные с помощью программного обеспечения ImageJ.
Интенсивность флуоресценции HLY1 в 90%-ном растворе ТГФ, содержащем 90%-ную воду, была в пять раз выше, чем в растворе ТГФ, что указывает на заметное излучение, вызванное агрегацией, или особенность AIE HLY1. Точки HLY1 излучали сильные флуоресцентные сигналы под фильтром нижних частот или LP-фильтром 1 500 нанометров, что делает его пригодным для визуализации NIR-IIb. Максимальная длина волны поглощения и излучения точек HLY1 составила 740 нанометров и 1 040 нанометров соответственно.
Кроме того, гидродинамический размер точек HLY1 был определен как 145 нанометров с помощью динамического рассеяния света. У мышей, которым вводили точки HLY1, церебральные сосуды и микрососуды в задней конечности были четко идентифицированы с помощью визуализации NIR-II под 1 500-нанометровым LP-фильтром. Кроме того, четыре опухоли T1 мышей с опухолями также были четко видны при визуализации NIR-II, что указывает на повышенную проницаемость и эффект удержания или ЭПР точек HLY1.
Все эти результаты свидетельствуют о том, что точки HLY1 являются ярким флуоресцентным зондом NIR-II, применимым для визуализации сосудов и опухолей. Подготовка водосуспендируемого нанозонда под флуоресцентной визуализацией in vivo и NIR-II является наиболее важной частью процедуры.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Related Videos
09:43
Related Videos
18.5K Views
09:52
Related Videos
16.8K Views
05:08
Related Videos
11.2K Views
12:09
Related Videos
12K Views
09:04
Related Videos
11.8K Views
11:05
Related Videos
12.7K Views
10:55
Related Videos
16.6K Views
08:52
Related Videos
14.5K Views
10:56
Related Videos
8.7K Views
06:01
Related Videos
1.1K Views