Неонатальная модель инъекции в заглазничную вену на грызунах

Ретроорбитальная инъекция – это специализированный метод инъекций, используемый для введения соединений в венозный кровоток. Исследования на животных являются важным шагом на пути к клинической работе. В рамках исследований на животных существует необходимость введения различных типов соединений разными путями.

Некоторые из этих путей включают подкожный, внутрибрюшинный и внутривенный. Внутривенная инъекция является наиболее часто используемым способом введения новорожденным, находящимся в отделении интенсивной терапии новорожденных. Тем не менее, в исследованиях на грызунах, особенно на взрослых грызунах, внутривенные инъекции обычно выполняются в хвостовую вену.

У новорожденных крайне сложно выполнить инъекцию в хвостовую вену успешно и воспроизводимо. Таким образом, ретроорбитальный маршрут может быть использован в качестве более простой альтернативы. Во-первых, мы продемонстрируем использование красителя трипанового синего, чтобы зритель мог ясно видеть, как краситель попадает в венозное кровообращение.

Новорожденную крысу помещают под полный наркоз, ее голова лежит на боку, покоится над источником света, поэтому глаз и боковая сосудистая сеть открыты и видны. Игла вводится в переднюю часть глазницы, что эквивалентно медиальному кантусу. Вводите раствор мягкими, плавными и плавными движениями.

Чтобы лучше воспроизвести эту процедуру, важно понимать анатомию орбитальной вены. У крысы есть сеть из нескольких вен чуть ниже глаза, которые обеспечивают легкий и прямой доступ к венозному сплетению. У новорожденных крыс-альбиносов также видны как поверхностные висковые, так и лицевые вены.

Эту процедуру можно выполнить точно так же. У неонатальных мышей. Используйте иглу от 29 до 31 калибра около 0,30 миллиметра.

Для получения точных объемов наберите раствор для инъекции из пипетированного объема. Поместите животных на ровную поверхность в положении лежа на боку. Индуцируйте анестезию всего тела изофлураном.

5% индукционный, 3% поддерживающий. Проверьте глубину анестезии с помощью метода тянущего рефлекса отводы. Повернув голову вправо, ввести инъекцию в правый ретроорбитальный синус.

Вставьте иглу скошенной вниз передней части глазницы, эквивалентную среднему кантусу, под углом примерно 40 градусов. Этот угол позволяет направить иглу в заднюю часть глазной орбиты. Вводите мягкими, плавными и плавными движениями.

Подождите некоторое время, прежде чем медленно вынимать иглу, чтобы избежать обратного потока. Используйте новый стерильный шприц для каждого животного, чтобы избежать заражения. Поместите щенка в контейнер для восстановления, положив его на защищенное нагревательное устройство, при температуре от 35 до 37 градусов по Цельсию.

Дождитесь выздоровления и проверьте, нет ли признаков бедствия, прежде чем возвращать щенка к плотине. Эта методика была использована для введения индикатора биотин-декстрана в сосудистую сеть головного мозга животных, перенесших кровоизлияние в зародышевой матрикс. У животных, получивших инъекцию физиологического раствора в качестве контрольной группы, не было обнаружено видимого окрашивания сосудистой сети в головном мозге.

Успешная ретроорбитальная инъекция индикатора биотин-декстрана позволила оценить его присутствие в сосудистой сети головного мозга в течение 10 минут после ретроорбитального введения. Затем этот метод был использован для обнаружения сосудистой утечки индикатора на уровне отдельных кровеносных сосудов у животных, пострадавших от ГМГ. Этот результат позволяет, например, количественно оценить травму, количественно оценив количество кровеносных сосудов, которые протекают после травмы головного мозга.

Кроме того, эта процедура также может быть выполнена без источника света, что делает ее простой, понятной и воспроизводимой техникой, которая позволяет вводить соединение непосредственно в венозный кровоток новорожденных крыс и мышей. При правильном выполнении эта процедура не должна привести к каким-либо побочным эффектам. Этот корень введения позволяет вводить антитела, клетки и другие соединения непосредственно в венальный кровоток новорожденных животных.

Этот путь имеет большее клиническое значение по сравнению с другими путями, такими как внутрибрюшинные или подкожные инъекции.