齧歯動物識別 II

尾の入れ墨の使用は、多くの研究プロトコールで有益です。テール入れ墨は MRI マシンのイメージを作成するある動物または潰瘍性皮膚炎は遺伝的傾向があるに最適です。それを抑えることがなく、ケージに動物を簡単に尻尾タトゥーは簡単に可視化します。ただし、この方法で必要スキル、実践、そして着実に手;特殊な器具も必要です。¹

実験プロトコルは、新生児のジェノタイピングを一日も早く必要があります。その結果、これらの子犬を永続的に識別することは不可欠です。若い身空で耳の耳介、耳にタグを挿入するのには十分開発されないと耳の穿孔器はそれらをまだ使用できません。過去には、新生児を識別するためにつま先の削除コードを使用する研究者のために共通だった。しかし、これは若い動物とダムの両方にストレスだった、こうして非人道的と考えられています。²のつま先の入れ墨を使用できます、動物耳付けや耳パンチに対して十分な大きさになるまで永続的に識別することです。³

マイクロ チップの注入のプロセスは比較的簡単ですが、マウスで同定の有用性を制限するいくつかの要因があります。滅菌マイクロ チップ、ご飯の粒が大きいのサイズ 10 に 12 ゲージ配信用の針を必要とされます。したがって、彼らが非常に大きいマウスです。マウスの寿命は短く、動物の数は通常広汎なよう、マイクロ チップの読取装置コストは法外なできます。MRI マシンのイメージを作成する運命にある動物は、それらのインプラントを持つことはできません。ただし、恒久的に識別する必要があります貴重な動物のグループは、マイクロ チップが使用できます。⁴

数時間、または数日の特定の動物を必要とする急性の研究は恒久的な身分証明書の使用を必要としません。毒性マーカーは、動物の毛皮を着色のために特別に作られています、いくつかの色で利用可能です。これらのマーカーの染料は数週間目に見える残ることが。マーカー他の方法で [グループに特定の動物を簡単にスポットを組み合わせても使用できます。

1 尾のタトゥー

尾の入れ墨は、動物の処理を必要とせず簡単に読み取られます。

図 1。成体マウスの入れ墨を尾します。

1. 製造元の指示に従ってタトゥー用品を準備します。少量のインクが必要です。黒の染料はアルビノ マウスやラット、有色マウスまたはラットの緑色の染料のために使わなければなりません。
2. 識別のために動物を準備します。
   注: 不安や苦痛を最小限に抑えるテール入れ墨行わなければならない動物の団地ではなく処置室で。
   1. 動きは最小限、入れ墨のための動物を適切に抑制します。
   2. 幼ラットが唇のタトゥー プラットフォームと切り込みを通って延びる尾のボルトの下に保護されたカップのプラスチック切欠きのカップを使用して拘束されます。
   3. 成体は、引っ張った開閉プラットフォームやその他のデバイスを介して行われてカップのフランジからピンと張った尾を持つカップ落による拘束できます。
   4. きれいに、綿棒で適用される希薄組織クリーナーの少量の尾。ラットの一般にスケールおよび入れ墨を適用する前に洗浄する必要があります尾の残骸の蓄積があります。尾の石鹸と水スクラブは汚れやゴミの大部分を削除します。先に進む前によく尻尾を乾燥させます。
   5. 入れ墨の直前に綿棒で皮膚に、組織に注油します。ティッシュ オイル皮膚を軟化し、入れ墨針を潤滑して組織の損傷を最小限に抑える必要があります。さらに、油は洗浄のプロセスが削除していない任意の汚れを溶解し、インク nontattooed 皮膚の汚れることを防ぐ。
3. 入れ墨を適用します。
   1. マシンの電源と顔料に針の先端を浸し。
   2. フットペダルによって活性化される銃でタトゥー サイトに針の先端をもたらします。
   3. 短くも一方向にストロークします。数字とアルファベットはそのような方法で入れ墨必要があります彼らは最小の角度と曲線 (可能な場合) のセグメントで構成されています。
   4. 永久的な色素沈着を針で真皮に深く十分に浸透します。活性化の針の音の変化は、深さを見分けることができます。
   5. 色素の十分な堆積のため 90^oの角度で針を用いて皮膚に近づきます。
4. 後タトゥー クリーンアップとケア
   1. しみ (拭かないでください) ペーパー タオルで余分な顔料の完成したタトゥー。
   2. タトゥーや紙タオルで血液の存在は、タトゥー深すぎる作られた従って永久的であるようであることを示します。
   3. その他の顔料とタトゥーの文字の薄い領域を強化します。文字は顔料が堆積した平行がない上に、すでに作製した色素で補強します。
   4. その他顔料を追加、マウスの 2 文字とラットのすべての 1 つの文字の色素の貯留層に針の先端を浸し。
   5. フェージングの入れ墨の顔料、作られたあまりにも浅い入れ墨、入れ墨したあまりにも深く、肌に針の不適切な角度鈍いまたはフック針が使用されているまたは余りにすぐに作られてタトゥーの不十分な量があります。
   6. 製造元の指示に従って各使用後タトゥー機器を徹底的に掃除します。

2. 新生児の入れ墨をつま先

実験プロトコルはこれらの子犬が恒久的に識別することが重要となる日のいずれか早期新生児のジェノタイピングを要求できます。つま先の入れ墨の耳のタグ付けまたは耳パンチに対して十分な大きさになるまでに識別される動物を使用します。

図 2。新生児マウスを入れ墨の適切な拘束テクニック。『 ランセット 』 は、先端の緑色の染料です。

1. 哺乳仔を抑制します。
   1. ガーゼのパッドに手で新生児をカップします。親指と選ばれたつま先または入れ墨のためのつま先を公開する人差し指の間の足を位置します。
   2. つま先がある離れて曲げからそれを防止する、それの後ろの固体表面を持つよう、爪先に近い足を保持します。
   3. 足を配置する場合、脚を overtwist ないか。拘束された子犬が小刻みに動く可能性がありますが、発声が必ずしも聞こえない。
2. 機器を準備します。
   1. 4.5 mm アキノキリンソウ動物ランセットを選択します。
   2. 場所緑のタトゥーの小さなスポット貼り付け無孔の表面;アルミ箔に適しています。
   3. タトゥー ペーストのランセットの先端のみを浸しなさい。
   4. ペーストのわずかな量を使用します。
3. 入れ墨を適用します。
   1. 識別コードによるとアキノキリンソウ ランセットで目的のつま先を突きます。
   2. マークを残して、皮膚に貼り付けを導入する皮膚を穿刺します。
   3. 適切な浸透を保証するために、同じ場所に 3 回を突きます。
   4. 深く突きするつま先出血; を避けるため暗い入れ墨の可能性があります。
4. 後タトゥー クリーンアップとケア
   1. 優しく余分なペーストを削除する吸収ワイプ/タオルでスポットをしみ。
   2. 足や体から余分なのりをきれいにしないでください。
   3. 動物を檻に戻ります。
   4. ときに看護の仔が入れ墨されて、またダムを入れ墨することをお勧めします。これはタトゥーの過剰グルーミングにつながる可能性のある子犬に貼り付けに過剰反応してから彼女をできない場合があります。
   5. 各くずの新しいランセットを使用します。
   6. 入れ墨は、手順の後の日に検証すべき。ドットがかすかなまたは表示されていない場合は、タトゥーをやり直します。刺青の翌日はドットが表示されている場合、動物の寿命のため表示する必要がありますされます。

3. つま先は、ラットやマウスの入れ墨

新生児のくずは入れ墨、母親も入れ墨される彼女の子犬に貼り付けは彼女に外国ではない、それが提示されます。

1. 動物の拘束。
   1. プラスチック製のコーンまたは後部のフィートにアクセスできるプレキシ ガラス落を使用して動物を抑制します。
   2. 拘束デバイスから足を延ばしてください。
   3. 親指と選ばれたつま先または入れ墨のためのつま先を公開する人差し指の間の足を位置します。
   4. つま先がある離れて曲げからつま先を防ぐことそれの後ろの固体表面を持つよう、爪先に近い足を保持します。
   5. 足を配置する場合、脚を overtwist ないか。

4. マイクロ チップ

RFID チップの注入は、動物を識別するために一般的に使用されるメソッドです。

1. マイクロ チップを読み込む、適用元またはプリロードされた注射器を選択します。
2. 肩の上の皮膚の把握ができるプレキシ ガラス拘束チューブを用いた動物を抑制します。
3. テント皮膚、ポケットを作成します。
4. ベベルと背骨に平行、皮膚を通して針を置き、尾に向かってそれを指示しました。
5. 皮下にマイクロ チップを取り出します。
6. 針を撤回し、注射の時点で閉じた皮をつまみます。これは皮膚から針を次の中からマイクロ チップを防ぎます。引き続き任意の皮膚の出血の止血を提供するために圧力を適用します。
7. 拘束デバイスから動物を削除し、識別コードを確認するチップをスキャンします。

図 3。ラットにおけるマイクロ チップの配置。

5 マウスの一時的な id

無害染料と動物マーカーは、マウスの一時的な識別に使用できます。

1. 肩甲骨の間の領域、標示の毛皮の上で利用できるようなマウスを抑制します。
2. この地域で毛皮にマーカー、スポット、または染料の連勝を配置します。この地域は、動物が毛づくろいしながらマーキングを削除するを防ぐために使用されます。
3. 数日以上の唯一の識別子としてそれを使用している場合定期的にマーキングを確認します。
4. 尾は、短期間の使用もできます。ただし、動物は毛づくろい中それからマークを削除可能性があります。

6 ラット用一時的な識別

1. 染料またはマーカーのアプリケーションのための区域、簡単に利用できるようにラットを抑制します。いくつかのケースでストライプやドットのみが必要な動物に制止される必要はありませんが檻の中を自由に移動できるが。
2. 尻尾をつかんで押し識別を適用ながらピンと張ったマニュアル抑制が通常行われます。
3. 気難しい動物用吸入麻酔薬を使用して一時的な固定を行うことができます。
4. 数日以上の唯一の識別子としてこのメソッドを使用する場合定期的にマーキングを確認します。

動物に苦痛を与えないか不安を最小限に抑えるためテール入れ墨行わなければならない動物の住宅地ではなく処置室で。入れ墨を適用する前にプルの開口部からピンと張った尾を持つカップ落を使用してマウスを抑制します。カップのフランジは、特殊なガラスのプラットフォームを介して行われています。次に、きれい希薄組織の少量の尾に、綿棒にクリーナー。この手順は、スケールや破片のタトゥーに干渉する可能性のすべての蓄積を削除することが重要です。次に、別の綿棒で尾皮膚に組織油を適用します。これは、皮膚を軟化、入れ墨針の潤滑を提供することによって組織の損傷を最小限に抑えます。さらに、油汚れ洗浄プロセスでは削除されませんを溶解し、インク非入れ墨皮膚に染色を防ぐことができます。入れ墨を適用する準備が整いました。

マシンがオフで中がランセットか皮下注射針、入れ墨の針の先端を顔料に軽く浸します。次に、足のペダルを使用して、銃をアクティブ化、尻尾にタトゥー ツールを配置およびタトゥー サイトに針の先端をもたらします。90 ° の角度で針を用いて皮膚に近づくし、色素が沈着する完全にように真皮に深く十分に浸透します。活性の針の音の変化は、深さを見分けることができます。ように数字と文字を形成、1 つの方向でもストロークが短い。入れ墨を適用するときに、最小曲線と角度を使用してください。

その他顔料を追加するには、すべてのワンツー文字マウス用とラットのすべての 1 つの文字の色素の貯留層に針の先端を浸し。余分な色素を削除するペーパー タオルで完成したタトゥーを消します。タトゥーや紙タオルで血液の存在は、タトゥー深すぎる作られた従って永久的であるようであることを示します。針をしない上に、既に沈殿させた顔料に、平行に置くことによって追加色素薄い文字を強化します。各使用後タトゥー機器を徹底的に掃除、病気の感染を防ぐためにケージの間新しいまたは滅菌針とインクの新鮮な供給を使用します。

別の動作実験で調査官はつま先が新生児の入れ墨を実行し、レコードの超音波発声する特殊なマイクで録音ボックスにそれらを配置しました。この実験の目的は呼び出しの違いを見て、レート、つまり野生型およびShank2欠損マウスで毎分発声数自閉症以上 12 日新生児期および成体のフードのモデル。

最後に、前述したように、非毒性の染料の使用は短期間の実験のために動物をマークする効率的な方法です。ここでは、科学者たちは、血漿タンパク質の一過性発現に興味があった。だから一時的なマーカーで動物をマーク、プラスミド DNA を静脈内に注入され、収集血液サンプル 2 日後で西部のしみを用いたタンパク質の発現を決定します。

適切な識別方法を選択するときは、多くの要因を審議する必要があります。各テクニックは、長所と短所が実験のニーズに関連して考慮する必要があります。コストは、他の要因と共に検討する必要があります、技術の使いやすさと、動物に不快感のレベルには、主要な考慮事項が必要があります。^{4, 5}