化合物の管理 IV

Lab Animal Research

Your institution must subscribe to JoVE's Basic Biology collection to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

Welcome!

Enter your email below to get your free 1 hour trial to JoVE!





By clicking "Submit", you agree to our policies.

 

Overview

< p クラス = 'jove_content' > ソース: ケイ ・ スチュワート、RVT、RLATG、CMAR;ヴァレリー A. シュレーダー、RVT、RLATG。ノートルダムのノートルダム大学

化合物投与実験用マウスおよびラットの多くの一般的に使用されるルートがあります。プロトコルは、使用頻度の低いルートの使用を必要があります、しかし、: 心内、蹠とレトロな軌道注射。これらの手順を正常に実行するため専門のトレーニングが欠かせません。これらのルートのための正当化は、制度的動物ケアおよび使用委員会 (IACUC) の承認を得るために提供する必要があります。

Cite this Video

JoVE Science Education Database. ラボ動物研究の必需品. 化合物の管理 IV. JoVE, Cambridge, MA, (2017).

Principles

心腔内投与は、心内直送の結果に及ぼす影響の検討と同様、転移癌の動物モデルの開発を含む、アプリケーションのさまざまなで使用されています心筋梗塞。この手順は、多くの場合心臓内の正しい位置に針をガイドする超音波を使用して行われます。2 ただし、正しく適切なランドマークを利用した実行されると、この手順は実行できます超音波可視化を使用せずします

プロシージャの侵襲的性質では、心腔内注入の使用の科学的に正当 IACUC プロトコルで。1 つだけ生存の注入ができます。この手順には、全身麻酔、吸入または組織内で確立されたガイドラインに従って、注射のいずれかが必要です。針の選択が注入される; 材料の粘度になります可能な最小サイズをする必要があります。通常、27-30 ゲージ針を使用します。注入量は 100 μ L から最大 300 μ L の範囲します

マウスの尾静脈内注射が挑戦し、多くの場合失敗します。レトロな軌道神経叢を介して静脈内投与の代替ルートがあります。この手法は、トレーニングとスキルを実行するといえば、間研究は外側尾静脈注射よりもレトロな軌道注入で高い成功率があることを示しています。3, 4, 5麻酔は、マウスがプロシージャの間に移動することを防ぐために必要です。全身吸入麻酔、ベルジャーを介していずれかまたは精度の気化器に接続されている誘導室が有効であります。しかし、吸入剤を使用する場合は、動物注射を実行する準備ができている必要があるので、部屋から取除かれればすぐに回復し始めると、注意します。複数の注射が実行されるとき (プロパラカイン、テトラカイン) 局所点眼麻酔薬お勧め

マウスおよびラットの軌道の静脈の構造が異なる。マウスの副鼻腔や眼窩上静脈、鼻背の静脈、下眼瞼静脈、目のまわりの軌道のスペースを埋める浅弓状静脈を含むいくつかの船の収束。ラットの眼窩領域のネットワークまたは血管の神経叢があります。すべての注射と同様針の選択が可能な最小のサイズをする必要があります。一般的に 27-30 ゲージ針です。大量のレポートをされているが、最大音量は目につき 150 μ L です。3, 4, 5生存のプロシージャのための目につき 2 つの注射の目には、1 日あたり 1 つの注入をお勧めします。また、注射の間、少なくとも 1 日の間隔があるはずです。Nonsurvival プロシージャの 500 μ L までボリュームを管理できます

注射部位として足のパッドの使用はまだいくつかの研究が必要、論争にもかかわらず。それは、足パッドを介して注入すると、いくつかのマウス系統において抗体応答大幅より強かったと飛節に挿入され実証されています。6 すべての動物は、通常歩行、食料消費のレベルの痛みの兆候を密接に監視する必要があります。足の自傷は、破棄されるフィートの範囲に発生します。これは、慢性的な痛みのサインです。自傷行為を示す動物はすぐに獣医のスタッフの注目を呼び出す必要があります

明らかな腫れが発生したすぐに足蹠の測定を毎日行う必要があります。エンドポイントは、IACUC ガイドラインに従って場所でなければなりません。病変や腫瘍動物と干渉するとき動物を安楽死する必要があります一般的には、' 能力が及ぶまたは食糧および水に達する。足蹠に注入することができます最大音量は 50 μ L です。29-30 ゲージ針は注入に適しています

Procedure

1。 心腔内注入

  1. ランドマークと位置決め: マウスまたはラットの位置 (上向き左側) と右外側臥床または背の内股とランドマークを識別します。
    1. 中心部の胸骨の左側にちょうど肘のポイントと約水平位置します
    2. 肘の時点で肋骨の間針を挿入します
    3. 背臥床中の動物でテーブルに平行の胸に針を挿入します
    4. 横臥床中の動物で胸をテーブルに垂直に針を挿入します
  2. 記事の注入
    1. 針の最小限の動きは、一度はこの妥協心機能引き裂かれて、心膜嚢への出血を引き起こしてから筋肉を防ぐために心臓に挿入されることを確認します
    2. は、適切な配置を決定する注射器を吸い出しなさい。多くの場合注射器のハブに血液のフラッシュがある
    3. 手再配置はされません注入用の注射器の針を中心に位置づけられている一度シリンジを保持します
    4. ゆっくりと着実な方法で記事を挿入します
    5. 出血を最小限に抑えるにゆっくりと針を撤回します
    6. 注入外傷に関連するその他の後遺症や長時間の運動失調、チアノーゼ発作呼吸困難が発生するマウスを獣医師スタッフによる評価し、彼らの推薦によると安楽死する必要があります

Figure 1
図 1。マウスの心腔内注射

2 レトロな軌道神経叢を利用した静脈注射

  1. 注入ランドマークと
      を位置決め
    1. 横臥床で平らな面に動物を配置。
    2. 鼻に 45 ° の角度で目の眼に針を挿入します
    3. 針の深さは結膜組織に浸透し、事前に眼眼窩の後ろに、眼の神経叢に十分なする必要があります。針を置き、ない軌道の後ろに骨を発生する必要があります
    4. 顎に親指で頭の上に人差し指を配置します
    5. 皮膚を強化し、眼球の突出、下方を軽く引いています
    6. 気管に圧力をかけるし、空気の流れを制限するように注意してください
  2. 注入
    1. 目の後ろとない眼で内針を配置します
    2. 針がレトロな軌道神経叢に一度挿入最小限の動きまたは血管破裂する目の後ろの組織に出血とエージェントの損失を引き起こすことを確認してください。針がレトロな軌道神経叢に位置づけられている一度注入用の注射器に手がない移動したシリンジを保持します
    3. 船が崩壊すると、注射器で吸い出してはいけない
    4. ゆっくりと着実な方法で記事を挿入します
    5. 針を撤回し、出血を制御し、止血を提供する目に光の圧力を適用します
    6. 腫れを経験するマウス、結膜炎、または注入外傷に関連するその他の後遺症必要があります獣医のスタッフによって評価、処理するか彼らの推薦によると安楽死させた

Figure 2
図 2。マウスでレトロな軌道注入

3. 足蹠注射

  1. 拘束、隔離された、1 つの後部のフィートと拘束チューブで動物を配置し、膝関節の上の皮膚をつかんで拡張します
  2. 水やアルコールを注入する前のがれき撤去を足を拭く
  3. 。 後肢の中心に皮下注入
  4. 足の注射部位に小さな水疱を形成します。足の長さを実行する血管を避けるためには、注入容器に並列の正中線のすぐそば

Figure 3
図 3。マウスおよびラットの足蹠注射

Intracardiac、レトロな軌道と足蹠は、いくつかの生物学者がこれらの非定型の経路を介して化合物の配信を施行した実験のために使用する特殊な注入法

心腔内注射は、動脈系の循環を直接入力する物質を許可する左心室に化合物を提供します。レトロな軌道の路線は尾静脈注射に代わるものです、静脈循環に化合物を提供する使用されます。足蹠注射で動物に記事の皮下投与、' s 脚。このビデオは、考慮事項、手順とこれらの特別な注入技術の応用について説明します

みましょう ' s で始まるいくつかの背景情報と 1 つはこれらの管理手順を開始する前に考慮すべきものです

心腔内投与は、しばしば心臓内の正しい位置に針をガイドする超音波を使用して行われます。ただし、実行すると正しく適切なランドマークを利用した、超音波可視化を使用せず、管理が実行できます。サバイバルの手順手順全身麻酔と動物ごとの 1 つだけの注入を使用する必要がありますが許可されます。一般的にこの注射の 27-30 ゲージ針を使用、最大投与量は、それぞれマウスおよびラットの 100 〜 300 マイクロリットル

レトロな軌道ルートを介して静脈内注射は、1 つは軌道の静脈構造の公正な理解を持つ必要があります。マウスが副鼻腔、いくつか静脈すなわち眼窩上、背側鼻、下眼瞼、および表面的な時間-収束します。一方、ラットでは, ネットワークまたはいくつかの静脈叢があります。注射は、副鼻腔または腕神経叢に直接実行されます。ような心内、この手順も必要です、全身麻酔と一日目あたり 1 つだけの注入の使用は生存のプロシージャのための目につき 2 つの注射の合計でお勧めします。すべて注射で最小サイズ針する必要があります選択一般に 27-30 ゲージ-推奨される最大ボリュームが目につき 150 μ L と

にもかかわらず論争、足蹠注射の使用は通常の炎症と腫瘍の成長に関連するいくつかの研究が必要です。注射のみ行えること、片足で決して bi 横方向に注意してください。明らかな腫れが発生したすぐに足蹠の測定を毎日行う必要があります。29-30 ゲージ針は注入に適して、推奨最大音量 50 μ L です。任意の注入の後で、苦痛、食料消費のレベルの印と通常歩行すべての動物は密接に監視する必要があります。病変や腫瘍動物と干渉するとき動物を安楽死する必要があります一般的に ' 及ぶまたは食糧および水に到達します

さあ ' 心腔内注入から始まる注入法を学びましょう。手順を実演しますマウスが、ランドマークとラットのためのプロトコル似ています

まず注射器を準備することです。29 ゲージの針、1 cc のシリンジに適したマウスを思い出してください。心腔内注入のため最大ボリューム、100 マイクロリットルです。ソリューションを描画するときプランジャーと注入材料の少量の空気を残してください。これはそれが中心に配置されると、注射器を入力への血流を許可する

吸入や注射の麻酔を使用して動物の麻酔を開始します。このコレクションの別のビデオで麻酔を維持するための考慮事項を確認します。次に、絶縁されたプラットフォームの背臥床位置に動物を配置します。プラットフォームに前肢をテープ、腰の上腹部にわたるテープの部分を水平方向に配置します。これは、さらに動物を安定し、針が挿入される任意の動きを避けるためです。次に、動物が濡れている、綿棒を使用して ' 70% アルコールで s 胸

注射部位を特定するのには、まず、剣と胸骨柄・胸骨を探します。その後、2 つのランドマークの中間点を見つけます。このポイントの 1-2 mm 左は針挿入ランドマークです。針の挿入部位をマークするポビドン ヨード、綿棒を使用して適用します

を挿入、テーブルに垂直の針を直接、約 2 mm の深さまで挿入します。その後、プランジャーに非常にわずかな背圧を適用します。明るい赤酸素を含んだ血液は、注射器のハブは、適切な配置を確認入力してください。同じ場所でシリンジを押し、30 〜 60 秒間にわたってゆっくりと着実に材料を注入します。急速なインジェクションの結果、細胞の凝集と動脈が体の温度や心室の拡張や心臓のリズムの混乱よりも低かった物質の温度によるシステムへの衝撃の目詰まり

素材がゆっくりと慎重に、注射器をクリア後は、心臓の筋肉を損傷することができます任意の横方向の動きのない針を削除します。その後、すぐに前脚と腹部からテープをリリースし、絶縁層として機能する寝具の十分な深さを持つきれいなケージで腹臥位で動物を配置します。加熱源や麻酔下の動物にこの回復ケージの半分はあのメモはケージの加熱側に位置しています。これは低体温症を防ぎ動物が麻酔から回復するよう必要に応じて温水側に移動することができること

次に、聞かせて ' 投与ラットにおけるレトロ軌道神経叢を活用法を学びましょう。再び、我々 は、マウスの手順をデモンストレーションが、ランドマークとラットのためのプロトコル似ている

は適切な針を付ける選択した注射器と注入材料で埋めます。一般的に注射可能な最小と最大ボリューム 150 マイクロリットルの 27-30 ゲージ針を使用する 1 つを覚えている

プロシージャを起動すると、まず動物を麻酔します。その後、横臥床位置の平面上に置きます。今、あごに頭と親指の上に人差し指を置くとゆっくり引き戻すし、ダウンします。これは、皮膚を強化し、眼球の突出です。気管に圧力を適用し、気流を制限するように注意してください。複数の注射を計画、プロパラカイン、テトラカインなどの局所点眼麻酔薬を適用します

は鼻に 45 ° の角度で目の眼に針を挿入します。深さは結膜組織に侵入し、事前に眼眼窩と副鼻腔に十分である必要があります。軌道の後ろに骨は発生する必要があります。血管の破裂を避けるため、針は一度挿入最小限の動きでことを確認します。船が崩壊すると、吸い出してはしないでください。ゆっくりと着実な方法で記事を挿入します。次に、そっと針を撤回し、出血を制御し、止血を提供する目に光の圧力を適用します

最後に、聞かせて ' マウスおよびラットのレビュー足蹠注射方法。開始、適切な針のつけ正しいボリュームで注射器を埋めます。この手順を意識した動物で行うことができます

は孤立し、抑圧の上の皮膚をつかんで拡張 1 つの後部のフィートと拘束チューブに動物を配置します。水やアルコールを注入する前のがれき撤去を足を拭いてください。足の長さを実行する血管を避けるためには、注入のランドマークがセンターで、つま先に近い正中線のオフだけ

は、かかとに向けて監督、注射部位を針ベベルを配置します。ゆっくりと着実に記事を挿入足組織の急速な伸展を避けるために。足蹠膨らむ注入材料は、その皮下のスペースを埋めるようになります。小動物の ' s 足より大きい動物のよりローカライズされるに対し、注射から腫れが、かかと拡張できます

注入後動物を毎日観察し、永続的な腫れがある場合、または病変または実験的プロトコルの結果として腫瘍がある場合は、足蹠の測定を実行、キャリパーを使用しています。この楽器はミリメートル単位で足の厚さを測ってし、腫れの定量に役立ちます

さあ ' 心内、レトロな軌道と足蹠注射を利用したいくつかの例の実験について話し合おう

心臓内の多くのアプリケーションの管理は、がん転移モデル動物の開発です。ここでは、研究者は骨の植民地化のための傾向を持っている腫瘍細胞を注入するのにこのルートを使用しました。次の日、彼らは x 線および蛍光イメージングの技術を使用して骨の腫瘍の成長を勉強しました。別の研究でレトロな軌道の路線が好中球にラベルを付ける特定の抗体を注入に使用されました。その後、生体イメージングの助けを借りて、科学者が標識細胞の移行パターンを追跡することができる

最後に、調査官がしばしば炎症性応答を分析する足蹠注射を使用します。この実験では、研究者人間の血液サンプルから末梢血単核球を分離、別のテスト抗原を混合、ソリューションを動物に注入 ' s 足蹠。最後に、彼らは異なる抗原による腫れの応答を定量化するための足のサイズを実行します

あなた ' ve を見たゼウス ' s 通常と特殊な複合管理技術の最終回

だけ要約すると、最初の部分では、最も一般的な非経口的ルートを確認しました。第 2 章経腸栄養、局所の手順を説明しました。非定型手順の最初のセットに対処する 3 番目の割賦のような皮、鼻、および intracrania新生児の l。最後に、ここで話し合った医歯薬学研究者が特定の目的のための演習で使用する 3 つの追加ルート

このシリーズを見て別の管理手法の理解が必要し、も、一般的および特定の考慮事項を知っておくべき関連化合物の管理に常に、ありがとうだけのこれらのプロトコル見て!

Summary

動物に化合物の管理は、動物の両方の健康と実験データと科学的価値の結果に大きな影響を持つことができます。配信の適切な方法は、実験の成功に不可欠です。研究の科学的な目的、物質、必要な投与量、物質の粘度と動物の健康の pH を含む最適なルートを決定する多くの要因を考慮されなければなりません。技術的専門知識はすべて注入法のための要件でも

References

  1. Morton, D.A., Jennings, M., Buckwell, A., Ewbank, R., Godfrey, C., Holgate, B., Inglis, I., James, R., Page, C., Sharman, I., Verschoyle, R., Westall, L., and Wilson, A.B. 2001. Refining procedures for the administration of substances Report of the BVAAWF/FRAME/RSPCA/UFAW Joint Working Group on Refinement. Members of the Joint Working Group on Refinement. Laboratory Animals. 35. 1-41
  2. Prendiville , T.W., Qing, M., Lin, Z., Zhou, P., He, A., and Pu, W.T. 2014. Ultrasound-guided Transthoracic Intramyocardial Injection in Mice. Journal of Visualized Experiments. 90 | e51566.
  3. Yardeni, T., Eckhaus, M., Morris, H.D., Huizing, M., and Hoogstraten-Miller, S. 2001. Retro-orbital injection in mice. Lab Animal. 40:5. 155-171.
  4. Steel, C., Stephens, A., Hahto, S., Singletary, S., Ciavarra, R. 2008. Comparison of the lateral tail vein and the retro-orbital sinus as routes of intravenous drug delivery in a transgenic mouse model. Lab Anim. 37. 26-31.
  5. Timm, K.I. 1989. Orbital venous anatomy of the Mongolian gerbil, with comparison to the mouse, hamster, and rat. Laboratory Animal Science. 39:3. 262-265.
  6. Kamala, T. 2007. Hock immunization: a humane alternative to mouse footpad injections. Journal of Immunological Methods. 328. 204-214.

1。 心腔内注入

  1. ランドマークと位置決め: マウスまたはラットの位置 (上向き左側) と右外側臥床または背の内股とランドマークを識別します。
    1. 中心部の胸骨の左側にちょうど肘のポイントと約水平位置します
    2. 肘の時点で肋骨の間針を挿入します
    3. 背臥床中の動物でテーブルに平行の胸に針を挿入します
    4. 横臥床中の動物で胸をテーブルに垂直に針を挿入します
  2. 記事の注入
    1. 針の最小限の動きは、一度はこの妥協心機能引き裂かれて、心膜嚢への出血を引き起こしてから筋肉を防ぐために心臓に挿入されることを確認します
    2. は、適切な配置を決定する注射器を吸い出しなさい。多くの場合注射器のハブに血液のフラッシュがある
    3. 手再配置はされません注入用の注射器の針を中心に位置づけられている一度シリンジを保持します
    4. ゆっくりと着実な方法で記事を挿入します
    5. 出血を最小限に抑えるにゆっくりと針を撤回します
    6. 注入外傷に関連するその他の後遺症や長時間の運動失調、チアノーゼ発作呼吸困難が発生するマウスを獣医師スタッフによる評価し、彼らの推薦によると安楽死する必要があります

Figure 1
図 1。マウスの心腔内注射

2 レトロな軌道神経叢を利用した静脈注射

  1. 注入ランドマークと
      を位置決め
    1. 横臥床で平らな面に動物を配置。
    2. 鼻に 45 ° の角度で目の眼に針を挿入します
    3. 針の深さは結膜組織に浸透し、事前に眼眼窩の後ろに、眼の神経叢に十分なする必要があります。針を置き、ない軌道の後ろに骨を発生する必要があります
    4. 顎に親指で頭の上に人差し指を配置します
    5. 皮膚を強化し、眼球の突出、下方を軽く引いています
    6. 気管に圧力をかけるし、空気の流れを制限するように注意してください
  2. 注入
    1. 目の後ろとない眼で内針を配置します
    2. 針がレトロな軌道神経叢に一度挿入最小限の動きまたは血管破裂する目の後ろの組織に出血とエージェントの損失を引き起こすことを確認してください。針がレトロな軌道神経叢に位置づけられている一度注入用の注射器に手がない移動したシリンジを保持します
    3. 船が崩壊すると、注射器で吸い出してはいけない
    4. ゆっくりと着実な方法で記事を挿入します
    5. 針を撤回し、出血を制御し、止血を提供する目に光の圧力を適用します
    6. 腫れを経験するマウス、結膜炎、または注入外傷に関連するその他の後遺症必要があります獣医のスタッフによって評価、処理するか彼らの推薦によると安楽死させた

Figure 2
図 2。マウスでレトロな軌道注入

3. 足蹠注射

  1. 拘束、隔離された、1 つの後部のフィートと拘束チューブで動物を配置し、膝関節の上の皮膚をつかんで拡張します
  2. 水やアルコールを注入する前のがれき撤去を足を拭く
  3. 。 後肢の中心に皮下注入
  4. 足の注射部位に小さな水疱を形成します。足の長さを実行する血管を避けるためには、注入容器に並列の正中線のすぐそば

Figure 3
図 3。マウスおよびラットの足蹠注射

Intracardiac、レトロな軌道と足蹠は、いくつかの生物学者がこれらの非定型の経路を介して化合物の配信を施行した実験のために使用する特殊な注入法

心腔内注射は、動脈系の循環を直接入力する物質を許可する左心室に化合物を提供します。レトロな軌道の路線は尾静脈注射に代わるものです、静脈循環に化合物を提供する使用されます。足蹠注射で動物に記事の皮下投与、' s 脚。このビデオは、考慮事項、手順とこれらの特別な注入技術の応用について説明します

みましょう ' s で始まるいくつかの背景情報と 1 つはこれらの管理手順を開始する前に考慮すべきものです

心腔内投与は、しばしば心臓内の正しい位置に針をガイドする超音波を使用して行われます。ただし、実行すると正しく適切なランドマークを利用した、超音波可視化を使用せず、管理が実行できます。サバイバルの手順手順全身麻酔と動物ごとの 1 つだけの注入を使用する必要がありますが許可されます。一般的にこの注射の 27-30 ゲージ針を使用、最大投与量は、それぞれマウスおよびラットの 100 〜 300 マイクロリットル

レトロな軌道ルートを介して静脈内注射は、1 つは軌道の静脈構造の公正な理解を持つ必要があります。マウスが副鼻腔、いくつか静脈すなわち眼窩上、背側鼻、下眼瞼、および表面的な時間-収束します。一方、ラットでは, ネットワークまたはいくつかの静脈叢があります。注射は、副鼻腔または腕神経叢に直接実行されます。ような心内、この手順も必要です、全身麻酔と一日目あたり 1 つだけの注入の使用は生存のプロシージャのための目につき 2 つの注射の合計でお勧めします。すべて注射で最小サイズ針する必要があります選択一般に 27-30 ゲージ-推奨される最大ボリュームが目につき 150 μ L と

にもかかわらず論争、足蹠注射の使用は通常の炎症と腫瘍の成長に関連するいくつかの研究が必要です。注射のみ行えること、片足で決して bi 横方向に注意してください。明らかな腫れが発生したすぐに足蹠の測定を毎日行う必要があります。29-30 ゲージ針は注入に適して、推奨最大音量 50 μ L です。任意の注入の後で、苦痛、食料消費のレベルの印と通常歩行すべての動物は密接に監視する必要があります。病変や腫瘍動物と干渉するとき動物を安楽死する必要があります一般的に ' 及ぶまたは食糧および水に到達します

さあ ' 心腔内注入から始まる注入法を学びましょう。手順を実演しますマウスが、ランドマークとラットのためのプロトコル似ています

まず注射器を準備することです。29 ゲージの針、1 cc のシリンジに適したマウスを思い出してください。心腔内注入のため最大ボリューム、100 マイクロリットルです。ソリューションを描画するときプランジャーと注入材料の少量の空気を残してください。これはそれが中心に配置されると、注射器を入力への血流を許可する

吸入や注射の麻酔を使用して動物の麻酔を開始します。このコレクションの別のビデオで麻酔を維持するための考慮事項を確認します。次に、絶縁されたプラットフォームの背臥床位置に動物を配置します。プラットフォームに前肢をテープ、腰の上腹部にわたるテープの部分を水平方向に配置します。これは、さらに動物を安定し、針が挿入される任意の動きを避けるためです。次に、動物が濡れている、綿棒を使用して ' 70% アルコールで s 胸

注射部位を特定するのには、まず、剣と胸骨柄・胸骨を探します。その後、2 つのランドマークの中間点を見つけます。このポイントの 1-2 mm 左は針挿入ランドマークです。針の挿入部位をマークするポビドン ヨード、綿棒を使用して適用します

を挿入、テーブルに垂直の針を直接、約 2 mm の深さまで挿入します。その後、プランジャーに非常にわずかな背圧を適用します。明るい赤酸素を含んだ血液は、注射器のハブは、適切な配置を確認入力してください。同じ場所でシリンジを押し、30 〜 60 秒間にわたってゆっくりと着実に材料を注入します。急速なインジェクションの結果、細胞の凝集と動脈が体の温度や心室の拡張や心臓のリズムの混乱よりも低かった物質の温度によるシステムへの衝撃の目詰まり

素材がゆっくりと慎重に、注射器をクリア後は、心臓の筋肉を損傷することができます任意の横方向の動きのない針を削除します。その後、すぐに前脚と腹部からテープをリリースし、絶縁層として機能する寝具の十分な深さを持つきれいなケージで腹臥位で動物を配置します。加熱源や麻酔下の動物にこの回復ケージの半分はあのメモはケージの加熱側に位置しています。これは低体温症を防ぎ動物が麻酔から回復するよう必要に応じて温水側に移動することができること

次に、聞かせて ' 投与ラットにおけるレトロ軌道神経叢を活用法を学びましょう。再び、我々 は、マウスの手順をデモンストレーションが、ランドマークとラットのためのプロトコル似ている

は適切な針を付ける選択した注射器と注入材料で埋めます。一般的に注射可能な最小と最大ボリューム 150 マイクロリットルの 27-30 ゲージ針を使用する 1 つを覚えている

プロシージャを起動すると、まず動物を麻酔します。その後、横臥床位置の平面上に置きます。今、あごに頭と親指の上に人差し指を置くとゆっくり引き戻すし、ダウンします。これは、皮膚を強化し、眼球の突出です。気管に圧力を適用し、気流を制限するように注意してください。複数の注射を計画、プロパラカイン、テトラカインなどの局所点眼麻酔薬を適用します

は鼻に 45 ° の角度で目の眼に針を挿入します。深さは結膜組織に侵入し、事前に眼眼窩と副鼻腔に十分である必要があります。軌道の後ろに骨は発生する必要があります。血管の破裂を避けるため、針は一度挿入最小限の動きでことを確認します。船が崩壊すると、吸い出してはしないでください。ゆっくりと着実な方法で記事を挿入します。次に、そっと針を撤回し、出血を制御し、止血を提供する目に光の圧力を適用します

最後に、聞かせて ' マウスおよびラットのレビュー足蹠注射方法。開始、適切な針のつけ正しいボリュームで注射器を埋めます。この手順を意識した動物で行うことができます

は孤立し、抑圧の上の皮膚をつかんで拡張 1 つの後部のフィートと拘束チューブに動物を配置します。水やアルコールを注入する前のがれき撤去を足を拭いてください。足の長さを実行する血管を避けるためには、注入のランドマークがセンターで、つま先に近い正中線のオフだけ

は、かかとに向けて監督、注射部位を針ベベルを配置します。ゆっくりと着実に記事を挿入足組織の急速な伸展を避けるために。足蹠膨らむ注入材料は、その皮下のスペースを埋めるようになります。小動物の ' s 足より大きい動物のよりローカライズされるに対し、注射から腫れが、かかと拡張できます

注入後動物を毎日観察し、永続的な腫れがある場合、または病変または実験的プロトコルの結果として腫瘍がある場合は、足蹠の測定を実行、キャリパーを使用しています。この楽器はミリメートル単位で足の厚さを測ってし、腫れの定量に役立ちます

さあ ' 心内、レトロな軌道と足蹠注射を利用したいくつかの例の実験について話し合おう

心臓内の多くのアプリケーションの管理は、がん転移モデル動物の開発です。ここでは、研究者は骨の植民地化のための傾向を持っている腫瘍細胞を注入するのにこのルートを使用しました。次の日、彼らは x 線および蛍光イメージングの技術を使用して骨の腫瘍の成長を勉強しました。別の研究でレトロな軌道の路線が好中球にラベルを付ける特定の抗体を注入に使用されました。その後、生体イメージングの助けを借りて、科学者が標識細胞の移行パターンを追跡することができる

最後に、調査官がしばしば炎症性応答を分析する足蹠注射を使用します。この実験では、研究者人間の血液サンプルから末梢血単核球を分離、別のテスト抗原を混合、ソリューションを動物に注入 ' s 足蹠。最後に、彼らは異なる抗原による腫れの応答を定量化するための足のサイズを実行します

あなた ' ve を見たゼウス ' s 通常と特殊な複合管理技術の最終回

だけ要約すると、最初の部分では、最も一般的な非経口的ルートを確認しました。第 2 章経腸栄養、局所の手順を説明しました。非定型手順の最初のセットに対処する 3 番目の割賦のような皮、鼻、および intracrania新生児の l。最後に、ここで話し合った医歯薬学研究者が特定の目的のための演習で使用する 3 つの追加ルート

このシリーズを見て別の管理手法の理解が必要し、も、一般的および特定の考慮事項を知っておくべき関連化合物の管理に常に、ありがとうだけのこれらのプロトコル見て!

A subscription to JoVE is required to view this article.
You will only be able to see the first 20 seconds.

RECOMMEND JoVE