Travailler avec les centrifugeuses

Lab Safety

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Overview

source : Robert M. Rioux & Sylvia Jharimune, Pennsylvania State University, University Park, PA

la force de gravitation de la terre est capable de séparer les mélanges hétérogènes. Cependant, de nombreux systèmes d’éviter ce type de séparation en raison de la longueur du temps habituellement nécessaire dans de tels cas. Centrifugation est l’un des outils plus puissants pour la séparation des mélanges hétérogènes 1. Elle comporte l’application de la force centripète de sédimentation de la phase plus lourde, conduisant à la séparation des deux phases et il est une technique couramment utilisée dans les milieux industriels et de laboratoire.

dans un processus de centrifugation typique, les particules en suspension dans un fluide sont filés autour de l’axe de la centrifugeuse de rotation, causant une force loin de l’axe. Cette force pousse les particules vers le bas du porte-échantillon et centrifuger à un taux qui dépend de la taille et la densité des particules. Centrifugation est donc une technique pour accélérer le processus de sédimentation.

afin d’assurer la sécurité dans l’utilisation d’une centrifugeuse, l’utilisateur doit être correctement formé et mis au courant des dangers qui pourraient résulter de son utilisation. Les sections suivantes présentent une discussion maniabilité et sécurité tout en travaillant avec les centrifugeuses.

Cite this Video

JoVE Science Education Database. Sécurité de laboratoire. Travailler avec les centrifugeuses. JoVE, Cambridge, MA, (2017).

Principles

une centrifugeuse se compose de base trois pièces, un rotor, un arbre de transmission et un moteur 2. Le rotor détient le tubes, flacons ou sacs contenant les liquides à être centrifugé. Il est généralement fait d’un matériau de haute résistance, comme un alliage d’aluminium ou en acier inoxydable. Rotor de différents types et tailles, interchangeables avec un autre, peuvent être montés sur l’arbre d’entraînement, qui se connecte au moteur. Le moteur fournit la puissance pour tourner le rotor. Habituellement, une armoire sécuritaire entoure et prend en charge les éléments suivants. Les commandes de fonctionnement et indicateurs cadrans de vitesse et de temps sont montés sur l’armoire. La plupart des centrifugeuses ont un système de freinage à amener le rotor à un statu quo peu après l’exécution isfinished. Plusieurs centrifugeuses sont également au réfrigérateur pour empêcher que des échantillons biologiques délicats s’échauffant, puisque les échantillons ont tendance à chauffer pendant le processus de centrifugation. Il existe des instruments basse vitesse et à grande vitesse pour la centrifugation. Centrifugeuses qui fonctionnent à des vitesses allant jusqu'à 10 000 tr/min sont considérés comme des instruments de basse vitesse, tandis que les instruments à grande vitesse fonctionnent à des vitesses jusqu'à 21 000 tr/min. Ultracentrifugeuses peuvent dépasser une vitesse de rotation de 30 000 tr/min.

en raison de la grande vitesse à laquelle une centrifugeuse fonctionne, il peut causer des blessures graves à l’utilisateur si malmené. Les risques causés par centrifugation sont reliés principalement une défaillance mécanique ou de la dispersion des aérosols. La force centrifuge sur le rotor provoque une charge sur le rotor de la centrifugeuse, menant à petit changement dans les dimensions du métal. Rotors sont conçus pour résister à un seuil de contrainte et de pouvoir retourner à leurs dimensions originales de l’état de repos. Toutefois, si cette tension de seuil est dépassée, le rotor peut-être définitivement déformée. Fissures et autres vêtements conduira à une détérioration du rotor au fil du temps, compromettre la sécurité d’utilisation de la centrifugeuse. Si une matière dangereuse fuit dans le rotor ou le corps de la centrifugeuse, elle peut poser des risques potentiels pour l’utilisateur et autres personnes présentes dans les environs. Par conséquent, il est important pour tous les utilisateurs de suivre des mesures standard pour l’exploitation sûre des centrifugeuses et reçoive la formation nécessaire pour gérer les situations en cas de défaillance de fonctionnement ou d’autres dangers. L’utilisateur ne deviendrait jamais complaisant lorsque vous travaillez avec des instruments de basse vitesse. Ils peuvent encore provoquer des lésions importantes à l’utilisateur.

Procedure

1. protocole général pour l’utilisation sécuritaire de centrifugeuse

  1. laboratoire superviseur ou laboratoire d’agent de sécurité veillent à tous les utilisateurs reçoivent une formation adéquate dans la sélection du rotor, tube à essais et un fonctionnement correct de la centrifugeuse.
  2. N’importe quel nouvel utilisateur doit être étroitement surveillé par un utilisateur formé jusqu'à ce qu’il/elle est confiant sur la façon d’utiliser correctement l’instrument.
  3. Avant d’utiliser l’instrument, chaque utilisateur doit lire attentivement et comprendre les consignes de sécurité pour la centrifugeuse spécifique.
  4. Selon l’échantillon, les rotors compatibles doivent être utilisés.
  5. Le rotor, le tube et broche doivent être propre, sec et exempt de fissures ou déformations.
  6. Les joints toriques doivent être vérifiés pour porter ou fissures.
  7. Il est important de s’assurer que les tubes utilisés pour la centrifugation sont compatibles avec l’échantillon et la vitesse de rotation (basse, haute ou ultra).
  8. Les tubes à centrifuger ne doivent pas être remplis plus de trois quarts de leur niveau de remplissage maximal.
  9. Les tubes devraient être plafonnés hermétiquement.
  10. , Il est extrêmement important d’équilibrer les tubes en face de l’autre. Faute de quoi donc peut conduire à une séparation incomplète et, dans certains cas extrêmes, peut provoquer une dispersion du contenu tube dans le boîtier de la centrifugeuse.
  11. Avant d’allumer la centrifugeuse, le rotor doit être vérifié pour s’assurer il est correctement inséré dans le lecteur et le couvercle est correctement fermé.
  12. Le couvercle doit être fermé en tout temps lorsque la centrifugeuse est en marche et ne doit jamais être ouverte jusqu'à ce que le rotor s’arrête complètement.
  13. L’opérateur devrait rester dans le voisinage de la centrifugeuse jusqu'à ce qu’il a atteint en toute sécurité la vitesse d’exploitation cible. Dans le cas de vibrations ou de bruits inhabituels, l’instrument doit être immédiatement mis hors tension. La limite de vitesse de l’appareil ne doit jamais être dépassée. Après avoir éteint, laisser suffisamment de temps pour le rotor de ralentir à une position arrêtée. Centrifugeuses modernes dotés d’indicateurs qui signifient qu’il est sûr d’ouvrir la centrifugeuse.
  14. Une fois la centrifugation est terminée, les échantillons doivent être enlevés et l’instrument doit être vérifié pour toute fuite ou de déversement. Si nécessaire, le rotor doit être soigneusement nettoyé.

2. Autres précautions tandis que manipuler des produits chimiques dangereux ou des matières infectieuses

  1. lors de l’utilisation de produits chimiques dangereux ou des échantillons biologiques qui pourraient être contagieux, il est important d’étiqueter l’instrument en usage pour alerter les autres travailleurs à la danger.
  2. Devrait porter des gants appropriés 1 pour manipuler les échantillons dangereux.
  3. Sealed sécurité tubes doivent être utilisés. Il est préférable d’utiliser le confinement secondaire, le cas échéant, pour les tubes à centrifuger. Elles sont généralement sous la forme d’inserts en plastique ou en verre qui sont placés directement dans les seaux d’échantillon de la centrifugeuse.
  4. Une fois la centrifugation terminée, les tubes doit être enlevés du rotor et ouvert que dans le fumées hotte ou biologiques armoire de sécurité, le cas échéant.
  5. Nettoyage, si nécessaire, doit être fait avec un soin extrême, afin de ne pas exposer l’opérateur à des produits chimiques dangereux ou des matières infectieuses. En cas de déversement de ces échantillons, reportez-vous à l’étape 3, des Situations d’urgence, au-dessous de.
  6. Pour des types spécifiques d’échantillons dangereux, il peut être préférable de maintenir des procédures standards et les protocoles de nettoyage en laboratoire. Ceux-ci devraient être réexaminées et actualisées en conséquence, si nécessaire.

3. Situations d’urgence et de leurs mesures de sécurité

une situation d’urgence pouvant survenir si le rotor fonctionne mal ou s’il y a un déversement dans la centrifugeuse en raison de la rupture du tube ou une mauvaise manipulation. Dans de telles situations, les mesures suivantes devraient être prises.

  1. La centrifugeuse doit être éteint immédiatement et le couvercle doit être fermé jusqu'à ce que d’autres soient informés et évacuer l’emplacement. La puissance devrait être terminée à l’interrupteur sur l’instrument. Le bouton sera situé soit sur le devant, côté ou dos de l’instrument. L’utilisateur doit se familiariser avec son emplacement. Si le bouton d’alimentation est défectueux, l’utilisateur doit supprimer la fiche d’alimentation de la prise murale.
  2. Pour réduire le risque des aérosols, il est parfois préférable de laisser la centrifugeuse intacte pendant au moins 0,5 h Consult avec le document technique de centrifugation.
  3. Pour nettoyer les déversements, l’opérateur doit bien connaître l’échantillon utilisé et doit porter la tenue y compris blouse, gants, bouclier du visage et des lunettes de sécurité.
    1. Une fois nettoyés, les matières déversées devraient être éliminés et les vêtements de protection contaminés doivent être éliminés ou nettoyé correctement. Mains et toute peau exposée doivent être lavés soigneusement.
  4. Si ouvertement exposé à des matières très dangereuses, 911 doit être appelée ou une attention médicale immédiate doit être administrée à la personne affligée.

4. entretien de la centrifugeuse

Remarque : le corps de la centrifugeuse est habituellement fait de métal qui peut se corroder en présence de l’humidité, produits chimiques ou détergents forts. Pour une conservation optimale de la centrifugeuse, il est recommandé de suivre attentivement le fabricant ' s directives pour le nettoyage et l’entretien. Other than that, quelques mesures générales pour l’entretien garder à l’esprit sont les suivantes.

  1. La centrifugeuse doit toujours être bien propre et sec.
  2. Tout type de déversements doit être nettoyé immédiatement.
  3. Le rotor doit être décontaminé après utilisation avec le matériel biologique et radioactive. Il est recommandé d’utiliser 10 % eau de Javel pendant 30 min, suivie d’éthanol à 70 %, laissant l’air rotor sec.
  4. Fils de brosse abrasive ne doit jamais être utilisées pour nettoyer le rotor et les pièces associées.
  5. Le rotor doit être inspecté après chaque utilisation de l’opérateur et au moins annuellement par inspecteur fabricant.
  6. Carnet de route de
  7. A devrait être maintenu pour chaque centrifugeuse pour conserver une trace des utilisateurs, des échantillons et historique du service. En outre, les copies des documents relatifs à la garantie peuvent être inclus dans ce journal de bord.

Applications and Summary

avec l’utilisation accrue des centrifugeuses dans les laboratoires et l’industrie, le risque de dangers pour l’utilisation de centrifugeuses a également augmenté. Cependant, une manipulation soigneuse de l’appareil et bonne connaissance de ses mesures de sécurité et d’utilisation peuvent atténuer sensiblement accidents. Une directive de base pour l’utilisation de centrifugeuses est fournie ici. Néanmoins, les procédures peuvent varier légèrement selon la machine centrifugeuse particulière utilisée. Par conséquent, il est toujours recommandé de lire attentivement et comprendre le manuel d’utilisation de la machine particulière avant de commencer à utiliser

References

  1. Basic Principles of Sedimentation and Sedimentation Coefficient | Centrifugation http://www.biologydiscussion.com/biochemistry/centrifugation/basic-principles-of-sedimentation-and-sedimentation-coefficient-centrifugation/12487Accessed 17 August 2016
  2. Principle of centrifugation http://edusanjalbiochemist.blogspot.com/2012/11/principle-of-centrifugation.html Accessed 17 August 2016
  3. Grainger quick tips technical resources. https://www.grainger.com/content/qt-safety-chemical-resistant-gloves-guide-191 Accessed 16 August 2016
  4. Beckman Coulter Life Sciences. http://centrifugebybeckman.com/wp-content/uploads/2016/03/Centrifuge-Primer-101-Booklet_LowRes_CENT-1076TCH10.15-A.pdf Accessed 16 August 2016
  5. Schumann, Werner, 1940- & Howard Hughes Medical Institute (1995). Safety in the research laboratory. Howard Hughes Medical Institute, [Cabin John, Md.]
  6. How to Use a Centrifuge Safely. UC San Diego. http://blink.ucsd.edu/safety/research-lab/laboratory/centrifuge.html Accessed 16 August 2016
  7. CR Scientific LLC. http://www.crscientific.com/centrifuge-safety.html Accessed 16 August 2016

1. protocole général pour l’utilisation sécuritaire de centrifugeuse

  1. laboratoire superviseur ou laboratoire d’agent de sécurité veillent à tous les utilisateurs reçoivent une formation adéquate dans la sélection du rotor, tube à essais et un fonctionnement correct de la centrifugeuse.
  2. N’importe quel nouvel utilisateur doit être étroitement surveillé par un utilisateur formé jusqu'à ce qu’il/elle est confiant sur la façon d’utiliser correctement l’instrument.
  3. Avant d’utiliser l’instrument, chaque utilisateur doit lire attentivement et comprendre les consignes de sécurité pour la centrifugeuse spécifique.
  4. Selon l’échantillon, les rotors compatibles doivent être utilisés.
  5. Le rotor, le tube et broche doivent être propre, sec et exempt de fissures ou déformations.
  6. Les joints toriques doivent être vérifiés pour porter ou fissures.
  7. Il est important de s’assurer que les tubes utilisés pour la centrifugation sont compatibles avec l’échantillon et la vitesse de rotation (basse, haute ou ultra).
  8. Les tubes à centrifuger ne doivent pas être remplis plus de trois quarts de leur niveau de remplissage maximal.
  9. Les tubes devraient être plafonnés hermétiquement.
  10. , Il est extrêmement important d’équilibrer les tubes en face de l’autre. Faute de quoi donc peut conduire à une séparation incomplète et, dans certains cas extrêmes, peut provoquer une dispersion du contenu tube dans le boîtier de la centrifugeuse.
  11. Avant d’allumer la centrifugeuse, le rotor doit être vérifié pour s’assurer il est correctement inséré dans le lecteur et le couvercle est correctement fermé.
  12. Le couvercle doit être fermé en tout temps lorsque la centrifugeuse est en marche et ne doit jamais être ouverte jusqu'à ce que le rotor s’arrête complètement.
  13. L’opérateur devrait rester dans le voisinage de la centrifugeuse jusqu'à ce qu’il a atteint en toute sécurité la vitesse d’exploitation cible. Dans le cas de vibrations ou de bruits inhabituels, l’instrument doit être immédiatement mis hors tension. La limite de vitesse de l’appareil ne doit jamais être dépassée. Après avoir éteint, laisser suffisamment de temps pour le rotor de ralentir à une position arrêtée. Centrifugeuses modernes dotés d’indicateurs qui signifient qu’il est sûr d’ouvrir la centrifugeuse.
  14. Une fois la centrifugation est terminée, les échantillons doivent être enlevés et l’instrument doit être vérifié pour toute fuite ou de déversement. Si nécessaire, le rotor doit être soigneusement nettoyé.

2. Autres précautions tandis que manipuler des produits chimiques dangereux ou des matières infectieuses

  1. lors de l’utilisation de produits chimiques dangereux ou des échantillons biologiques qui pourraient être contagieux, il est important d’étiqueter l’instrument en usage pour alerter les autres travailleurs à la danger.
  2. Devrait porter des gants appropriés 1 pour manipuler les échantillons dangereux.
  3. Sealed sécurité tubes doivent être utilisés. Il est préférable d’utiliser le confinement secondaire, le cas échéant, pour les tubes à centrifuger. Elles sont généralement sous la forme d’inserts en plastique ou en verre qui sont placés directement dans les seaux d’échantillon de la centrifugeuse.
  4. Une fois la centrifugation terminée, les tubes doit être enlevés du rotor et ouvert que dans le fumées hotte ou biologiques armoire de sécurité, le cas échéant.
  5. Nettoyage, si nécessaire, doit être fait avec un soin extrême, afin de ne pas exposer l’opérateur à des produits chimiques dangereux ou des matières infectieuses. En cas de déversement de ces échantillons, reportez-vous à l’étape 3, des Situations d’urgence, au-dessous de.
  6. Pour des types spécifiques d’échantillons dangereux, il peut être préférable de maintenir des procédures standards et les protocoles de nettoyage en laboratoire. Ceux-ci devraient être réexaminées et actualisées en conséquence, si nécessaire.

3. Situations d’urgence et de leurs mesures de sécurité

une situation d’urgence pouvant survenir si le rotor fonctionne mal ou s’il y a un déversement dans la centrifugeuse en raison de la rupture du tube ou une mauvaise manipulation. Dans de telles situations, les mesures suivantes devraient être prises.

  1. La centrifugeuse doit être éteint immédiatement et le couvercle doit être fermé jusqu'à ce que d’autres soient informés et évacuer l’emplacement. La puissance devrait être terminée à l’interrupteur sur l’instrument. Le bouton sera situé soit sur le devant, côté ou dos de l’instrument. L’utilisateur doit se familiariser avec son emplacement. Si le bouton d’alimentation est défectueux, l’utilisateur doit supprimer la fiche d’alimentation de la prise murale.
  2. Pour réduire le risque des aérosols, il est parfois préférable de laisser la centrifugeuse intacte pendant au moins 0,5 h Consult avec le document technique de centrifugation.
  3. Pour nettoyer les déversements, l’opérateur doit bien connaître l’échantillon utilisé et doit porter la tenue y compris blouse, gants, bouclier du visage et des lunettes de sécurité.
    1. Une fois nettoyés, les matières déversées devraient être éliminés et les vêtements de protection contaminés doivent être éliminés ou nettoyé correctement. Mains et toute peau exposée doivent être lavés soigneusement.
  4. Si ouvertement exposé à des matières très dangereuses, 911 doit être appelée ou une attention médicale immédiate doit être administrée à la personne affligée.

4. entretien de la centrifugeuse

Remarque : le corps de la centrifugeuse est habituellement fait de métal qui peut se corroder en présence de l’humidité, produits chimiques ou détergents forts. Pour une conservation optimale de la centrifugeuse, il est recommandé de suivre attentivement le fabricant ' s directives pour le nettoyage et l’entretien. Other than that, quelques mesures générales pour l’entretien garder à l’esprit sont les suivantes.

  1. La centrifugeuse doit toujours être bien propre et sec.
  2. Tout type de déversements doit être nettoyé immédiatement.
  3. Le rotor doit être décontaminé après utilisation avec le matériel biologique et radioactive. Il est recommandé d’utiliser 10 % eau de Javel pendant 30 min, suivie d’éthanol à 70 %, laissant l’air rotor sec.
  4. Fils de brosse abrasive ne doit jamais être utilisées pour nettoyer le rotor et les pièces associées.
  5. Le rotor doit être inspecté après chaque utilisation de l’opérateur et au moins annuellement par inspecteur fabricant.
  6. Carnet de route de
  7. A devrait être maintenu pour chaque centrifugeuse pour conserver une trace des utilisateurs, des échantillons et historique du service. En outre, les copies des documents relatifs à la garantie peuvent être inclus dans ce journal de bord.

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