Bonne utilisation des Autoclaves

Lab Safety

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Overview

Robert M. Rioux & Zhifeng Chen, Pennsylvania State University, University Park, PA

passage à l’autoclave est une des méthodes plus couramment utilisés dans le laboratoire aux fins de la décontamination. Les articles les plus courants décontaminés à l’aide de l’autoclave sont ceux qui contactent des échantillons biologiques (généralement ceux contenant des micro-organismes). Un autoclave fonctionne en utilisant la vapeur sous pression à haute température pour tuer les micro-organismes présents dans les matières chargées. Suffisamment transfert de flux et de la chaleur vapeur sont essentiels pour autoclave hautement efficace, qui sont les principes clés à considérer lors de matériaux d’emballage. Besoins de sécurité à prendre en considération quand travailler avec un autoclave en raison de la haute pression et la température qui y travaillent, qui également fixe des limites sur lequel les matériaux sont compatibles et peuvent nécessiter une attention particulière lors de l’emballage, de chargement et déchargement des matériaux .

Cite this Video

JoVE Science Education Database. Sécurité de laboratoire. Bonne utilisation des Autoclaves. JoVE, Cambridge, MA, (2017).

Principles

autoclave utilise la haute température de 121 ° C, vapeur haute pression (au moins 15 lb/po2) pendant au moins 30 minutes atteindre la décontamination. Il tue les micro-organismes par déshydratation de la cellule dans des conditions sévères. Le taux des gaz d’échappement dépend de la nature de la charge. Pour les matériaux solides secs, un cycle d’échappement rapide peut être atteint. Toutefois, les déchets liquides et biologiques exigent cycles lents d’échappement pour éviter les débordements liquides surchauffés. Rubans indicateurs sont souvent utilisés pour valider l’efficacité de l’autoclave. Les indicateurs fonctionnent en utilisant le marquage chimique sensible de chaleur pour voir si l’autoclave répond aux exigences de température (121 ° C). Changement de couleur de la bande un indicateur implique une stérilisation efficace, alors qu’aucun changement de couleur n’indique la charge n’est pas décontaminé. Toutefois, n’utilisez pas le ruban indicateur comme la seule source pour preuve de la décontamination, étant donné que la bande ne reflète que les microorganismes sont tués ou pas, mais seulement si l’autoclave répond aux exigences de température. Les conditions de travail a également fixé des limites sur les matériaux qui conviennent et qui posent des problèmes de sécurité. En principe, éviter tout matériel facilement brûle, fond ou une explosion dans des conditions de température et de pression élevées. Faites attention lors du chargement et déchargement des autoclaves pour éviter les brûlures par eau chaude ou à vapeur. Pour réaliser la décontamination suffisante, assurez-vous qu’il y assez de transfert de chaleur et écoulement dans les autoclaves, les sacs et les matériaux lors de l’emballage.

Procedure

1. porter bon personnels équipement de protection (EPI)

la haute pression et la température en fonctionnement conditions rencontrées durant l’autoclavage posent les risques de brûlure ou d’explosion de chaleur potentiels. ÉPI approprié comprend un manteau de laboratoire, des lunettes de sécurité, des gants résistants à la chaleur et chaussures fermées ; ceux-ci doivent être portés lors du chargement et déchargement des matériaux de l’autoclave. En présence d’échantillons liquides, porter un bouclier tablier et le visage comme EPI supplémentaire.

2. préparation des matières à charger

  1. identifier stériliser le matériel Compatible et stériliser le matériel Incompatible
    bien que l’autoclavage représente une méthode économique et couramment utilisée pour la décontamination, pas tous les matériaux conviennent pour autoclave en raison de la haute pression et les conditions de travail de température. En général, tous les matériaux qui vont s’évaporer ou faire fondre sous la vapeur sous haute pression ne sont pas compatibles avec le passage à l’autoclave. Cela comprend les matériaux tels que les solvants organiques, plastique peu résistant à la chaleur comme le polystyrène, polyéthylène et métaux sauf l’acier inoxydable. Jamais autoclave inflammables, corrosifs, toxiques, réactive ou radioactifs produits chimiques. Matériaux compatibles pour autoclave incluent Pyrex ou verre borosilicaté, polypropylène, polycarbonate, gants, acier inoxydable, pointes de pipette, papier (mis dans des sacs de l’autoclave) et solutions multimédias de Type I.
  2. Matériau d’emballage

  3. Après avoir identifié les matériaux compatibles avec autoclave, un emballage approprié est également important puisqu’il assure sécurité et autoclavage efficace. Voici les principes de base, lorsque les matériaux d’emballage :
    1. toujours utiliser un conteneur secondaire en polypropylène ou en inox.
    2. Pour les échantillons liquides, remplissez le flacon entier ½ complet et desserrer les bouchons ou utiliser si les fermetures. Ne jamais remplir les contenants de plus de 2/3 plein avec le bouchon bien serré.
    3. Inspecter le récipient de verre pour s’assurer qu'il n’y a pas de fissures. Si les fissures sont identifiés, disposer de verrerie dans un récipient approprié. Autoclave jamais un récipient en verre brisé connus.
    4. Utilisez toujours compatible autoclave sacs pour déchets d’emballage. Les sacs devraient avoir bandes d’indication à ce sujet et devrait être ouvert aux extrémités avant de charger pour permettre à la vapeur à l’intérieur du sac.
    5. Ne jamais surcharger les sacs ou conteneur afin de permettre suffisamment de vapeur débit de stérilisation complète. Laisser un espace entre.
    6. Don ' matières incompatibles de mélange t.
    7. Jamais lieu d’objets coupants dans le sac à déchets.

3. Charger le matériau

  1. vérifier l’autoclave ' interior s de faire qu’il n’y aucun risque de l’utilisateur précédent.
  2. Nettoyer le drain avant le chargement de matériaux afin de permettre la bonne circulation.
  3. S’assurer que les sacs ne pas touchent les murs intérieurs de l’autoclave pour éviter la fonte.
  4. Liquides et matériaux secs nécessitent des cycles différents et doivent être stérilisés à l’autoclave séparément.
  5. Fermer la porte.

4. Fonctionnement de l’Autoclave

  1. seulement formés devrait être autorisé à exploiter des autoclaves. Consultez le manuel de l’équipement si nécessaire, étant donné que les protocoles de fonctionnement varient selon les différents autoclaves.
  2. Après en s’assurant que la porte de l’autoclave est bien fermée, régler la température de passage à l’autoclave à 121 ° C et maintenir une pression d’au moins 15 psi.
  3. Pour définir le temps de l’autoclave et le programme, les facteurs suivants ont besoin à prendre en considération :
    1. recommandations liées au matériel du fabricant, ' Manuel de s.
    2. Le type de matières chargées à l’intérieur : secs ou liquides.
    3. Les quantités de matériau chargement.
    4. Forme et la taille du récipient utilisé.
    5. Chauffer la conductivité du conteneur et de matériaux.
    6. But de décontamination.

5. Déchargement du ou des matériels stérilisés à l’autoclave

  1. porter les EPI approprié tel que décrit ci-dessus.
  2. S’assurer que la température et la pression de l’autoclave sont rentrés dans une gamme sûre.
  3. Se tenir derrière la porte et soigneusement ouvrir la porte pour libérer toute vapeur reste à l’intérieur de l’autoclave dans la pièce.
  4. Autoriser les matériaux à l’intérieur de l’autoclave au repos pendant 10 min libérer toute vapeur ou air chaud pris au piège à l’intérieur du matériau.
  5. Ne secouez pas n’importe quel matériau liquide tout en supprimant de l’autoclave. Si nécessaire, étiquette du matériau que chaude pour éviter la chaleur brûle à un particulier qui peut être potentiellement pas conscients du fait que le matériel a récemment été autoclavé.
  6. Attendre le matériau se refroidir à température ambiante avant de les transporter dans le laboratoire ou à l’extérieur du laboratoire. Dans les deux cas, veillez à utiliser un confinement approprié pour le transport de.
  7. Enregistrer les détails des matériaux et des conditions de passage à l’autoclave à un utilisateur ' journal de s.

passage à l’autoclave est une des méthodes plus couramment utilisés dans le laboratoire aux fins de la décontamination.

De nombreux scientifiques, en particulier ceux qui travaillent avec des échantillons biologiques, l’équipement de besoin stérilisé et médias et autoclaves offrent un moyen rapide et économique pour décontaminer des matériaux. Ils utilisent la vapeur à haute température et de pression pour tuer les micro-organismes. En raison de ces conditions extrêmes, cependant, ils doivent être utilisés avec précaution.

Cette vidéo illustreront comment fonctionnent les autoclaves et comment s’en servir correctement.

en autoclave, matériaux sont chauffés à la vapeur à une température de 121 ° c à une pression d’au moins 15 livres par pouce carré Après au moins 30 minutes, ces conditions se déshydratent et tuent les cellules.

Autoclaves de

peuvent stériliser les matières liquides et solides, mais différents réglages d’exploitation doivent être considérés. Liquides nécessitent des délais plus longs que les solides pour évacuer la vapeur, afin d’éviter une ébullition flash. En outre, les plus grands volumes de matériaux liquides prennent plus de temps à chauffer à la température correcte.

Pas tout le matériel peut supporter les températures à l’intérieur de l’autoclave. Par conséquent, jamais autoclave tout ce qui fait fondre, brûlures, est explosif ou des liquides qui seront évaporent. Aussi, ne pas stériliser des substances chimiques toxiques ou radioactifs.

Maintenant, nous allons vous montrer comment préparer des échantillons pour l’autoclave et comment faire fonctionner un.

tout d’abord, sélectionnez les matériaux vous serez autoclavage et utiliser uniquement les conteneurs compatibles et instruments. Pyrex, verre borosilicate, acier inoxydable, polypropylène et le polycarbonate peuvent être utilisés pour l’autoclavage.

Autres matériaux communs de laboratoire tels que pointes de pipette et boîtes est également compatibles. Papier peut être stérilisé en autoclave-compatible sacs.

Déchets solides peuvent également être stérilisé dans un sac approprié. Laisser un espace dans ce sac pour laisser la vapeur faire circuler et ficeler les extrémités. Enfin, avant l’autoclavage, prenez soin de créer une petite ouverture dans le sac pour laisser entrer la vapeur.

Pour les milieux aqueux et autres échantillons liquides compatibles, utilisez un emballage intact et sans aucune fissure. Remplissez le réservoir d’environ la moitié plein et jamais plus de deux-tiers plein.

Pour la ventilation de gaz d’un liquid contenant, desserrer le bouchon. S’il n’y a pas de plafond, recouvrez-les de papier d’aluminium pour éviter la contamination du matériel stérilisé.

Mettre tout le matériel dans un conteneur secondaire en polypropylène ou en inox. Matières solides et liquides séparés pour être stérilisés à l’autoclave. Laisser un espace entre les matériaux et ne pas trop remplir le conteneur.

Enfin, fixez un morceau de ruban autoclave sur tous les tapiserials. Cette bande contient des indicateurs thermosensibles qui devient noirs si température suffisante a été atteint.

à l’aide d’un autoclave quand l’usure des équipements de protection individuelle appropriés pour se protéger contre les risques élevés de température et de pression. Cela inclut la norme EPI-lunettes, sarraus de laboratoire et chaussures fermées et des gants résistants à la chaleur. Utilisez un bouclier de visage et tablier lors de la manipulation des échantillons liquides.

à l’autoclave, tout d’abord ouvrir la porte et vérifier tous les dangers au sein. Charger des liquides et matières sèches séparément, car elles requièrent des cycles d’autoclavage différents.

Pour empêcher la fusion Assurez-vous de matériaux ne touchent pas les murs. Assurer une bonne circulation de la chaleur en maintenant un espacement suffisant entre les matériaux. Enfin, fermer et sceller la porte de.

Autoclaves de différentes

ont différents mode d’emploi. Cycles peuvent être mis en réglant manuellement la température et l’heure, ou en choisissant parmi une liste prédéfinie. En général, utiliser les programmes recommandés pour le type de matériau vous êtes décontaminante.

Une variété de cycles existent pour les solides et liquides, ainsi que pour différentes quantités de matériaux et déchets pour être stérilisés à l’autoclave. Lorsque vous exécutez un cycle, s’assurer que la température a atteint au moins 121 degrés Celsius et la pression au moins 15 livres par pouce carré

Après que le cycle est terminé, assurez-vous que la pression est revenue à zéro et l’autoclave est refroidi. Ouvrir lentement la porte pour laisser sortir la vapeur restants. Ensuite, laisser les matériaux à reposer pendant 10 minutes libérer les gaz chauds. Le Ruban autoclave devrait maintenant avoir des bandes noires ou dire autoclavé là-dessus, même si ce n’est pas une garantie que la stérilisation a été effectuée.

Port des EPI approprié, enlevez les matériaux, en veillant à ne secouez ne pas les échantillons liquides. Notez votre utilisation dans le journal, y compris le type de matières et de toutes les circonstances particulières si rencontrée. Enfin, le transport des matériaux à une zone sécurisée ou une hotte à flux laminaire pour refroidir.

vous avez regardé juste introduction de JoVE d’autoclaves. Vous devez maintenant comprendre quels matériaux sont autoclavables, comment les préparer et comment utiliser en toute sécurité l’instrument. Merci de regarder !

Applications and Summary

par rapport aux méthodes de décontamination chimique ou de la radiothérapie, autoclave représente la méthode la plus économique et pratique en laboratoire. Toutefois, pour assurer la sécurité (évitant de fusion, chaleur des brûlures ou explosion), identifier les matériaux compatibles avec autoclave et pratiquer le bon emballage, chargement et déchargement. Efficacité de décontamination suffisante nécessite récipient ou sac matériaux et suffisamment d’espace entre les matériaux dans l’autoclave. Entretien et inspection de l’autoclave sur une base régulière sont nécessaires pour assurer les autoclaves fonctionnent correctement.

References

  1. Autoclave Safety and Operation, 2015, Division of Research Safety, University of Illinois. at Autoclave Use, Environmental Health & Safety, Princeton University. atProper Use of a Steam Autoclave, 2016, Environmental Health & Safety, Arizona State University.
  2. Fact Sheet: Using Autoclaves Safely, Environmental Health & Safety, California State University, Los Angeles.
  3. Guideline for the Safe Use of Autoclaves, 2003, Environmental Health and Safety Service, University of Ottawa.

1. porter bon personnels équipement de protection (EPI)

la haute pression et la température en fonctionnement conditions rencontrées durant l’autoclavage posent les risques de brûlure ou d’explosion de chaleur potentiels. ÉPI approprié comprend un manteau de laboratoire, des lunettes de sécurité, des gants résistants à la chaleur et chaussures fermées ; ceux-ci doivent être portés lors du chargement et déchargement des matériaux de l’autoclave. En présence d’échantillons liquides, porter un bouclier tablier et le visage comme EPI supplémentaire.

2. préparation des matières à charger

  1. identifier stériliser le matériel Compatible et stériliser le matériel Incompatible
    bien que l’autoclavage représente une méthode économique et couramment utilisée pour la décontamination, pas tous les matériaux conviennent pour autoclave en raison de la haute pression et les conditions de travail de température. En général, tous les matériaux qui vont s’évaporer ou faire fondre sous la vapeur sous haute pression ne sont pas compatibles avec le passage à l’autoclave. Cela comprend les matériaux tels que les solvants organiques, plastique peu résistant à la chaleur comme le polystyrène, polyéthylène et métaux sauf l’acier inoxydable. Jamais autoclave inflammables, corrosifs, toxiques, réactive ou radioactifs produits chimiques. Matériaux compatibles pour autoclave incluent Pyrex ou verre borosilicaté, polypropylène, polycarbonate, gants, acier inoxydable, pointes de pipette, papier (mis dans des sacs de l’autoclave) et solutions multimédias de Type I.
  2. Matériau d’emballage

  3. Après avoir identifié les matériaux compatibles avec autoclave, un emballage approprié est également important puisqu’il assure sécurité et autoclavage efficace. Voici les principes de base, lorsque les matériaux d’emballage :
    1. toujours utiliser un conteneur secondaire en polypropylène ou en inox.
    2. Pour les échantillons liquides, remplissez le flacon entier ½ complet et desserrer les bouchons ou utiliser si les fermetures. Ne jamais remplir les contenants de plus de 2/3 plein avec le bouchon bien serré.
    3. Inspecter le récipient de verre pour s’assurer qu'il n’y a pas de fissures. Si les fissures sont identifiés, disposer de verrerie dans un récipient approprié. Autoclave jamais un récipient en verre brisé connus.
    4. Utilisez toujours compatible autoclave sacs pour déchets d’emballage. Les sacs devraient avoir bandes d’indication à ce sujet et devrait être ouvert aux extrémités avant de charger pour permettre à la vapeur à l’intérieur du sac.
    5. Ne jamais surcharger les sacs ou conteneur afin de permettre suffisamment de vapeur débit de stérilisation complète. Laisser un espace entre.
    6. Don ' matières incompatibles de mélange t.
    7. Jamais lieu d’objets coupants dans le sac à déchets.

3. Charger le matériau

  1. vérifier l’autoclave ' interior s de faire qu’il n’y aucun risque de l’utilisateur précédent.
  2. Nettoyer le drain avant le chargement de matériaux afin de permettre la bonne circulation.
  3. S’assurer que les sacs ne pas touchent les murs intérieurs de l’autoclave pour éviter la fonte.
  4. Liquides et matériaux secs nécessitent des cycles différents et doivent être stérilisés à l’autoclave séparément.
  5. Fermer la porte.

4. Fonctionnement de l’Autoclave

  1. seulement formés devrait être autorisé à exploiter des autoclaves. Consultez le manuel de l’équipement si nécessaire, étant donné que les protocoles de fonctionnement varient selon les différents autoclaves.
  2. Après en s’assurant que la porte de l’autoclave est bien fermée, régler la température de passage à l’autoclave à 121 ° C et maintenir une pression d’au moins 15 psi.
  3. Pour définir le temps de l’autoclave et le programme, les facteurs suivants ont besoin à prendre en considération :
    1. recommandations liées au matériel du fabricant, ' Manuel de s.
    2. Le type de matières chargées à l’intérieur : secs ou liquides.
    3. Les quantités de matériau chargement.
    4. Forme et la taille du récipient utilisé.
    5. Chauffer la conductivité du conteneur et de matériaux.
    6. But de décontamination.

5. Déchargement du ou des matériels stérilisés à l’autoclave

  1. porter les EPI approprié tel que décrit ci-dessus.
  2. S’assurer que la température et la pression de l’autoclave sont rentrés dans une gamme sûre.
  3. Se tenir derrière la porte et soigneusement ouvrir la porte pour libérer toute vapeur reste à l’intérieur de l’autoclave dans la pièce.
  4. Autoriser les matériaux à l’intérieur de l’autoclave au repos pendant 10 min libérer toute vapeur ou air chaud pris au piège à l’intérieur du matériau.
  5. Ne secouez pas n’importe quel matériau liquide tout en supprimant de l’autoclave. Si nécessaire, étiquette du matériau que chaude pour éviter la chaleur brûle à un particulier qui peut être potentiellement pas conscients du fait que le matériel a récemment été autoclavé.
  6. Attendre le matériau se refroidir à température ambiante avant de les transporter dans le laboratoire ou à l’extérieur du laboratoire. Dans les deux cas, veillez à utiliser un confinement approprié pour le transport de.
  7. Enregistrer les détails des matériaux et des conditions de passage à l’autoclave à un utilisateur ' journal de s.

passage à l’autoclave est une des méthodes plus couramment utilisés dans le laboratoire aux fins de la décontamination.

De nombreux scientifiques, en particulier ceux qui travaillent avec des échantillons biologiques, l’équipement de besoin stérilisé et médias et autoclaves offrent un moyen rapide et économique pour décontaminer des matériaux. Ils utilisent la vapeur à haute température et de pression pour tuer les micro-organismes. En raison de ces conditions extrêmes, cependant, ils doivent être utilisés avec précaution.

Cette vidéo illustreront comment fonctionnent les autoclaves et comment s’en servir correctement.

en autoclave, matériaux sont chauffés à la vapeur à une température de 121 ° c à une pression d’au moins 15 livres par pouce carré Après au moins 30 minutes, ces conditions se déshydratent et tuent les cellules.

Autoclaves de

peuvent stériliser les matières liquides et solides, mais différents réglages d’exploitation doivent être considérés. Liquides nécessitent des délais plus longs que les solides pour évacuer la vapeur, afin d’éviter une ébullition flash. En outre, les plus grands volumes de matériaux liquides prennent plus de temps à chauffer à la température correcte.

Pas tout le matériel peut supporter les températures à l’intérieur de l’autoclave. Par conséquent, jamais autoclave tout ce qui fait fondre, brûlures, est explosif ou des liquides qui seront évaporent. Aussi, ne pas stériliser des substances chimiques toxiques ou radioactifs.

Maintenant, nous allons vous montrer comment préparer des échantillons pour l’autoclave et comment faire fonctionner un.

tout d’abord, sélectionnez les matériaux vous serez autoclavage et utiliser uniquement les conteneurs compatibles et instruments. Pyrex, verre borosilicate, acier inoxydable, polypropylène et le polycarbonate peuvent être utilisés pour l’autoclavage.

Autres matériaux communs de laboratoire tels que pointes de pipette et boîtes est également compatibles. Papier peut être stérilisé en autoclave-compatible sacs.

Déchets solides peuvent également être stérilisé dans un sac approprié. Laisser un espace dans ce sac pour laisser la vapeur faire circuler et ficeler les extrémités. Enfin, avant l’autoclavage, prenez soin de créer une petite ouverture dans le sac pour laisser entrer la vapeur.

Pour les milieux aqueux et autres échantillons liquides compatibles, utilisez un emballage intact et sans aucune fissure. Remplissez le réservoir d’environ la moitié plein et jamais plus de deux-tiers plein.

Pour la ventilation de gaz d’un liquid contenant, desserrer le bouchon. S’il n’y a pas de plafond, recouvrez-les de papier d’aluminium pour éviter la contamination du matériel stérilisé.

Mettre tout le matériel dans un conteneur secondaire en polypropylène ou en inox. Matières solides et liquides séparés pour être stérilisés à l’autoclave. Laisser un espace entre les matériaux et ne pas trop remplir le conteneur.

Enfin, fixez un morceau de ruban autoclave sur tous les tapiserials. Cette bande contient des indicateurs thermosensibles qui devient noirs si température suffisante a été atteint.

à l’aide d’un autoclave quand l’usure des équipements de protection individuelle appropriés pour se protéger contre les risques élevés de température et de pression. Cela inclut la norme EPI-lunettes, sarraus de laboratoire et chaussures fermées et des gants résistants à la chaleur. Utilisez un bouclier de visage et tablier lors de la manipulation des échantillons liquides.

à l’autoclave, tout d’abord ouvrir la porte et vérifier tous les dangers au sein. Charger des liquides et matières sèches séparément, car elles requièrent des cycles d’autoclavage différents.

Pour empêcher la fusion Assurez-vous de matériaux ne touchent pas les murs. Assurer une bonne circulation de la chaleur en maintenant un espacement suffisant entre les matériaux. Enfin, fermer et sceller la porte de.

Autoclaves de différentes

ont différents mode d’emploi. Cycles peuvent être mis en réglant manuellement la température et l’heure, ou en choisissant parmi une liste prédéfinie. En général, utiliser les programmes recommandés pour le type de matériau vous êtes décontaminante.

Une variété de cycles existent pour les solides et liquides, ainsi que pour différentes quantités de matériaux et déchets pour être stérilisés à l’autoclave. Lorsque vous exécutez un cycle, s’assurer que la température a atteint au moins 121 degrés Celsius et la pression au moins 15 livres par pouce carré

Après que le cycle est terminé, assurez-vous que la pression est revenue à zéro et l’autoclave est refroidi. Ouvrir lentement la porte pour laisser sortir la vapeur restants. Ensuite, laisser les matériaux à reposer pendant 10 minutes libérer les gaz chauds. Le Ruban autoclave devrait maintenant avoir des bandes noires ou dire autoclavé là-dessus, même si ce n’est pas une garantie que la stérilisation a été effectuée.

Port des EPI approprié, enlevez les matériaux, en veillant à ne secouez ne pas les échantillons liquides. Notez votre utilisation dans le journal, y compris le type de matières et de toutes les circonstances particulières si rencontrée. Enfin, le transport des matériaux à une zone sécurisée ou une hotte à flux laminaire pour refroidir.

vous avez regardé juste introduction de JoVE d’autoclaves. Vous devez maintenant comprendre quels matériaux sont autoclavables, comment les préparer et comment utiliser en toute sécurité l’instrument. Merci de regarder !

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