Administración compuesta II

Lab Animal Research

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Overview

Fuente: Kay Stewart, RVT, RLATG, CMAR; Valerie A. Schroeder, RVT, RLATG. Universidad de Notre Dame, en

Administración compuesta suele ser un componente integral de un estudio en animales. Muchos factores deben ser evaluados para asegurarse de que el compuesto sea entregado correctamente. La vía de administración afecta a los mecanismos de absorción. Las características de la sustancia a ser introducen (pH, viscosidad y concentración) puede dictar qué vía de administración es selected.1,2,3

Cite this Video

JoVE Science Education Database. Fundamentos de la investigación de animales de laboratorio. Administración compuesta II. JoVE, Cambridge, MA, (2017).

Principles

las dos vías de administración principales son enterales (vía digestiva) y parenteral (administrado fuera de la zona digestiva). La elección de la vía de administración es determinada principalmente por los requerimientos del estudio. La principal ventaja con la dosis parenteral es que el compuesto no es sometido a metabolismo hepático, lo que resulta en biodisponibilidad más alta. Sin embargo, existen muchos protocolos experimentales que requieren los compuestos para ser administrado por vía oral para imitar mejor el producto natural de una sustancia. La mejor ruta a utilizar está determinada por las propiedades de la sustancia de ensayo.

dosificación oral es el método más comúnmente utilizado de la administración de drogas en los seres humanos. Esto se realiza con tabletas, cápsulas o líquidas formas de medicación. Tabletas y cápsulas administración es impráctico en roedores, por lo que la dosificación oral común para ratones y ratas se logra disolviendo el compuesto en agua potable, utilizando alimentos especializados que incorpora la prueba de compuesto en la fórmula, o colocando el compuesto en golosinas. Cuando la dosis a través de agua potable, sacarosa a menudo se agrega al agua para mejorar la palatabilidad. Sin embargo, debe ser equilibrado finamente para fomentar la ingesta de agua normal y consumo no excesivo debido al gusto azucarado.

muchos estudios han demostrado que repitió oral por sonda nasogástrica es estresante a ratones y ratas . 4,5 es también de mano de obra intensiva para el personal de cuidado de los animales. Hay disponibles en el mercado alimentos que comúnmente ha dosificado compuestos, tales como el Fenbendazol, que se utiliza para eliminar parásitos de roedores-incorporado en él. Otras empresas ofrecen golosinas medicadas que contienen antiinflamatorios, analgésicos, antiparasitarios y antibióticos. Alimentación de las compañías que fabrican las dietas formuladas para ratones y ratas creará las dietas de prueba especializados para cumplir un requisito experimental. Muchos laboratorios han formulado sus propias golosinas con el uso de miel, mantequilla de maní o gelatina con sabores de frutas. 4,5

oral dosificación carece de precisión porque la ingesta de un compuesto depende de la aceptación del alimento o del agua, la estabilidad del compuesto y el número de animales presentan en la jaula. Sin embargo, si la dosificación exacta no es fundamental para el experimento, este método no invasivo de la dosificación es mejor para el bienestar de los animales.

oral por sonda nasogástrica es un método mucho más preciso de la administración enteral, ya que permite para la deposición del compuesto directamente en el estómago del animal en un momento específico y en un volumen especificado. Sin embargo, la formación es necesaria para asegurar el éxito. Correcta sujeción del animal es fundamental para el éxito de esta técnica. Lesiones en la cavidad bucal, faringe, laringe, tráquea, esófago y estómago pueden resultar de una colocación incorrecta de la cabeza y el cuerpo. El animal debe ser agarrado firmemente, tal que la cabeza no es capaz de girar, para evitar que este tipo de lesiones.

agujas de dosificación están disponibles en formatos reutilizables o desechables. Aunque costoso, el uso de agujas desechables elimina la amenaza de la contaminación cruzada cuando dosis múltiples animales. Hay varios tamaños de agujas por sonda nasogástrica, que van desde calibre 20-22 para los ratones y calibre 18-20 para las ratas. La elección de la aguja se determina por el tamaño del animal, el volumen de líquido y la viscosidad de la solución a administrar.

gavaging oral se debe realizar en un animal consciente para reducir la posibilidad de colocar la aguja en la tráquea. Un animal que es consciente conserva el reflejo de deglución y el reflejo nauseoso, facilitando la colocación adecuada en el esófago. Un estudio se llevó a cabo que demuestre que el mismo la aguja de la sonda nasogástrica con sacarosa induce el reflejo de deglución y redujeron la cantidad de tiempo necesario para pasar la aguja hacia el esófago. 6

un agente tópico que se coloca directamente sobre la superficie de la piel generalmente se pretende afectar sólo la zona a la que se aplica. Estos pueden ser cremas, lociones, ungüentos, espumas o geles. Como los animales tienden a preparar el área donde se aplica el agente, debe considerarse la toxicidad del consumo oral.

compuestos administrados por vía tópica están formulados para ser absorbido a través de las capas de la dermis y el espacio subcutáneo a través de los folículos pilosos y las glándulas accesorias. Factores que afectan la absorción de los compuestos incluyen la condición de la piel, la superficie utilizada, la concentración de la sustancia, la liposolubilidad del compuesto y la cantidad de tiempo está en contacto con la superficie de la piel. Capas de la piel bien hidratada y delgada disminuirá el tiempo de absorción.

cuando se aplica una sustancia por vía tópica, existe la posibilidad de absorción sistémica por el animal en el área de la preparación. Deben tomarse medidas preventivas para evitar la ingestión de accidente o de la temprana eliminación de la sustancia. Collares pequeños o escudos están disponibles para evitar que el animal llegue a afectadas partes del cuerpo. Vivienda individual también puede ser necesario para evitar el acicalamiento de compañeros de jaula.

Procedure

1. aplicación tópica

  1. antes de aplicar los ungüentos y cremas, eliminar toda piel de la zona mediante el uso de una crema depilatoria o afeitando.
  2. Completamente limpia y seca la piel.
  3. Aplicar la sustancia directamente sobre la piel con un aplicador con punta de algodón o a través de una gota colocada directamente para evitar el contacto por el técnico.
  4. Para obtener mejores resultados, aplique varias capas finas de ungüento o crema se oponen a una sola aplicación de una gruesa capa.
  5. Aplicar líquido partiendo el cabello y aplicando una gota en la piel expuesta.
  6. Cuando se aplica una sustancia por vía tópica, existe la posibilidad de absorción sistémica por el animal en el área de la preparación. Deben tomarse medidas preventivas para evitar la ingestión de accidente o de la temprana eliminación de la sustancia. Collares pequeños o escudos están disponibles para evitar que el animal llegue a afectadas partes del cuerpo. Vivienda individual también puede ser necesario para evitar el acicalamiento de compañeros de jaula.

Figure 1
figura 1. Aplicación tópica en los ratones.

2. dosificación oral

  1. al proporcionar compuestos a animales por alimentos o agua, una mínima dosis diaria basada en el peso corporal debe ser calculada. El peso promedio de la cepa de ratón o rata se utilizan en el experimento se puede utilizar para hacer los cálculos, salvo que se especifique que se pesó cada animal y la dosis se calculó para cada individuo.
  2. Para protocolos que requieren medir precisamente que la ingesta de alimentos o de agua, los animales necesitan ser alojados individualmente.
  3. Especializadas de alimentación o golosinas pueden fabricarse para satisfacer las necesidades experimentales.
    1. Reemplazar la dieta estándar con la formulación, que permite a los animales a ingerir el compuesto durante todo el día.
    2. La comida puede necesitar ser substituido más a menudo que el alimento estándar debido a la inestabilidad compuesta.
  4. Sustancias pueden también administrarse por disolución en el agua potable, lo que permite a los animales recibir un compuesto durante todo el día
    1. una pequeña cantidad de azúcar se agrega al agua para hacerla aceptable. La cantidad exacta para añadir está determinada por la aceptación del agua por los ratones. Utilice el más pequeño posible incremento.
    2. La frecuencia de cambiar el agua depende de la estabilidad del compuesto. Algunas sustancias pueden ser sensibles a la luz o precipitado con el tiempo.

3. Procedimiento de la sonda

calibre de 20-25 x 1.5 en agujas rectas o curvas de dosificación se utilizan para los ratones. Para las ratas, calibre 18-20 x 2-3 en recto o curvo dosificación agujas se utilizan. Éstos están disponibles como agujas de acero inoxidable reutilizables o desechables agujas. Las agujas desechables pueden tener una varilla de plástico flexible o metálica con una punta de silicona.

  1. Conecte la aguja dosificadora una jeringa seleccionada basado en el volumen y la viscosidad de la solución de ensayo. Para dosificación de líquidos espesos, se prefiere una jeringa con cierre Luer. Estas son generalmente disponible a partir de 3 tamaño cc que tiene 100 μl graduaciones. Esto puede no ser conveniente para volúmenes más pequeños o cuando existe una necesidad de dosis exacta volúmenes en incrementos menores.
  2. Fijar la jeringa a la aguja que pueden leerse las graduaciones en el barril sin girar la aguja. Una vez que la aguja se ha colocado en el esófago, cualquier rotación puede romper el esófago, dando por resultado la muerte de los animales.
  3. Llene una jeringa con el volumen apropiado del artículo que se administrará (óptimo volumen = volumen de 5 ml/kg y máximo = 20 ml/kg) 4
  4. El sistema de seguridad adecuado es esencial para este procedimiento. 7
    1. frenar manualmente ratones sujetando la piel en la base de la cabeza y scruffing ellos. Es importante que el cuerpo llevará a cabo tal que se suspende en una línea recta desde la cabeza hasta la cola. Cualquier torsión del cuerpo impedirán la colocación de la aguja de la sonda nasogástrica hacia el esófago.
    2. Agarre firmemente el pescuezo para que la cabeza tiene un mínimo movimiento de lado a lado. Los cuartos traseros deben ser estabilizados para evitar la rotación del cuerpo.
    3. Para gavaging una rata, la agarre sobre los hombros usando el dedo índice y medio a cada lado del cuello y la palma en el animal ' espalda. El pulgar, tercero y cuarto dedos deben rodear el pecho para evitar que el animal para poder moverse hacia adelante o hacia atrás. La posición de los dedos a cada lado del cuello evita que la rata de girar su cabeza.
    4. Es importante que el cuerpo en línea recta y no torcido para ayudar en la colocación de la aguja de la sonda nasogástrica sin daño a la boca, faringe, esófago o estómago.
    5. Asegúrese de que la cabeza no tiene exceso de movimiento de lado a lado.
    6. Los cuartos traseros puede ser estabilizados para evitar la rotación del cuerpo. Esto se logra permitiendo que los pies espaldos descanse sobre la parte superior del mostrador o jaula.
  5. Administración de la sustancia
    1. posición de la aguja con la curva hacia abajo y en línea con la curva natural del cuello. Introducir la aguja en la boca del lado derecho o izquierdo, entre los incisivos y molares en un ángulo hacia la parte posterior de la faringe.
    2. Una vez que la aguja está en la cavidad bucal, inclinar la cabeza con la aguja de la sonda hasta que la nariz apunte hacia arriba. Esto es especialmente importante al usar agujas rectas. La aguja debe deslizarse fácilmente hacia el esófago. No fuerce la aguja hacia abajo. Si se siente alguna resistencia, hacer retroceder la aguja e inténtelo de nuevo.
    3. Una vez que la aguja está en posición en el estómago, depositar suavemente el compuesto.
    4. Quitar la aguja, asegurándose de que no hay rotación de una aguja curvada tiene lugar.
    5. Si el animal comienza a luchar, sacar la aguja dosificadora y refrenar el animal con más seguridad.
    6. Mientras que realizar el procedimiento, si el animal muestra signos de cianosis o dificultad respiratoria, o si hay solución que sale de su boca, la aguja de dosificación debe ser retirada y el animal en su jaula.
    7. En general, cuando gavaging ratas y ratones, particularmente con una sustancia cáustica, es una práctica recomendada inicialmente entregar una pequeña cantidad – para tos – antes de todo el volumen. De esta manera, si la aguja está bien colocada, el volumen entregado a los pulmones es pequeño y el animal tiene una mejor oportunidad de recuperación.

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figura 2. Sonda oral en ratones (izquierda) y ratas (derecha).

muchos experimentos requieren que un compuesto se administra en un animal por vía oral o tópica, de modo que el método imita mejor la ingesta natural de la sustancia experimental.

De la dosis oral, el compuesto puede ser disuelto en el agua potable o incorporado a los alimentos que consumen los animales. Otro método más preciso de la dosificación oral es oral por sonda nasogástrica en el cual se utiliza una aguja grande para colocar el compuesto directamente en el estómago. Por otra parte, un agente tópico puede colocarse directamente sobre la superficie de la piel y generalmente se pretende afectar sólo la zona a la que se aplica. Cada una de estas estrategias tiene ventajas y limitaciones, que vamos a comentar en este video. Después de que le mostraremos cómo realizar estas técnicas de administración compuesto de animales de laboratorio y algunas de sus aplicaciones.

antes de adentrarse en los protocolos, vamos a repasar las consideraciones, ventajas y limitaciones de estas técnicas. Dosificación oral con tabletas, cápsulas o líquido es el más comúnmente utilizado método de administración de la droga en seres humanos. Sin embargo, tabletas y cápsulas son imprácticas para los roedores, por lo que la dosificación oral común se logra disolviendo el compuesto en el agua potable o los alimentos.

Cuando la dosificación a través de beber agua, sacarosa a menudo se añade al agua para mejorar la palatabilidad. Sin embargo, se debe ser finamente equilibrado para fomentar la ingesta de agua normal y beber alcohol en exceso no por el sabor azucarado. Una buena regla es comenzar con una solución de sacarosa al 10% y luego ajustar dependiendo de la ingesta. Otra forma de dosis oral el animal es a través de alimentos especializados. Hay disponibles en el mercado alimentos que comúnmente ha dosificado compuestos, como el Fenbendazol, incorporado en él. El roedor de las empresas de la alimentación también puede crear dietas de prueba especializados para cumplir un requisito experimental.

Las ventajas con esta forma de dosificación oral son que es no invasivo, administra el compuesto continuamente y simula la administración de medicamentos oral humano. Sin embargo, carece de precisión porque consumo compuesto depende de la aceptación de la comida o agua, la estabilidad del compuesto y el número de animales presentes en la jaula. Si la dosificación exacta no es fundamental para el experimento, este método no invasivo es mejor para el bienestar de los animales.

Para administración oral más precisa, se puede utilizar oral por sonda nasogástrica, que deposita el compuesto directamente en el estómago en un tiempo específico y en un volumen especificado. Sin embargo, es necesaria una formación adecuada para llevar a cabo esta técnica porque pueden ocurrir daños graves al animal si no están debidamente asegurados.

Venir a agentes tópicos, se trata de cremas, lociones, ungüentos, aerosoles y geles. Por lo general, los agentes tópicos pretenden afectar sólo la zona a la que se aplican. Sin embargo, también pueden ser absorbidos en el torrente sanguíneo, que puede ser intencionada o no. Esta absorción depende de: la condición de la piel, la superficie utilizada, la concentración de la sustancia, la duración del contacto y la solubilidad en lípidos del agente de.

ahora que hemos discutido los antecedentes de los métodos de administración oral y tópica, vamos a aprender los protocolos a partir de la administración oral vía alimento o agua.

De cálculo de la dosis, primero necesitas saber la dosis prevista para ser administrado. En segundo lugar, se debe determinar el peso del cuerpo. En lugar de peso de animales individuales, puede utilizar el peso promedio de la cepa de ratón o rata para sus cálculos, a menos que se especifique lo contrario. En tercer lugar, debe tener en cuenta el número de animales por jaula, y en cuarto lugar, usted necesita saber el consumo promedio de agua o alimento diario por jaula.

Recuerde, los alimentos formulados o el agua potable con el compuesto disuelto puede necesitar ser substituido más con frecuencia que los alimentos o el agua debido a la inestabilidad compuesta. Algunos compuestos pueden ser sensibles a la luz o puede precipitar con el tiempo.

ahora, vamos a aprender a administrar por vía oral dosis precisas realizando sonda oral en ratones y ratas.

Primer paso es elegir una aguja adecuada para el procedimiento. Estas son ya sea reutilizable de acero inoxidable o desechables con una punta de eje y silicón plástico flexible. Para los ratones, 20-25 calibre recta o curvas agujas dosificadoras 1,5 pulgadas de longitud son apropiadas. Para las ratas, seleccione 18-20 rectos o curvos dosificación agujas del calibrador que son 2-3 pulgadas de largo. La aguja correcta selección de la jeringa y calibre también depende de volumen y viscosidad. Revisar la administración de compuestos que video para comprender el impacto de estos factores. Para la dosificación de líquidos espesos se prefiere una jeringa con cierre Luer.

Después de hacer la selección, coloque la jeringa a la aguja que pueden leerse las graduaciones en el barril sin girar la aguja. Esto es importante porque una vez que la aguja ha sido colocada en el esófago cualquier rotación puede romper la pared del esófago que resulta en la muerte del animal. A continuación, llene la jeringa con el volumen correcto de la solución a administrar.

Este método siempre debe realizarse en animales conscientes con reflejos de deglución intactos para evitar colocación accidental en la tráquea. Utilizando la técnica de sujeción adecuado es crítico para este procedimiento. Para ratón, agarre la piel en la base de la cabeza y sostener firmemente el pescuezo. Esto asegura que el jefe tiene oportunidad mínima para el movimiento de lado a lado. Además, asegúrese de que el cuerpo se suspende en una línea recta desde la cabeza hasta la cola; cualquier torsión impedirá la colocación de la aguja de la sonda nasogástrica hacia el esófago. Los cuartos traseros deben ser estabilizados también para evitar la rotación del cuerpo.

Para contener una rata, lo agarre por los hombros usando el dedo índice y medio a cada lado del cuello. Esto evitará que la rata girando su cabeza de lado a lado. El pulgar, tercero y cuarto dedos rodean el pecho para evitar que el animal se mueva hacia adelante o hacia atrás.

Una vez que correctamente han refrenado el animal, coloque la aguja con la curva hacia abajo y en línea con la curva natural del cuello. Luego, introducir la aguja en la boca del lado derecho o izquierdo, a través del diastemata y entre los incisivos y molares en un ángulo hacia la parte posterior de la faringe. Ahora que la aguja se coloca en la cavidad oral, se usa para inclinar la cabeza hacia atrás hasta que la nariz apunte hacia arriba. En este punto, la aguja debe deslizarse fácilmente hacia el esófago. Una vez que la aguja se coloca en el estómago, depositar suavemente el compuesto. A continuación, retire la aguja del animal, asegurándose de no girarla. Es importante no forzar la aguja hacia abajo. Si usted siente alguna resistencia, retírela y vuelva a intentarlo. Al realizar el procedimiento, si el animal muestra signos de cianosis o distrés respiratorio o si hay solución que sale de su boca, la aguja de dosificación debe ser retirada y el animal debe ser liberado en su caja.

por último, vamos a revisar los procedimientos para la administración tópica en animales de laboratorio. Empezar por anestesiar el animal. Esto se hace comúnmente usando un rápido actuar inhalantes, que permite la rápida recuperación de animales. Para más detalles sobre la administración de anestesia, por favor ver otro video de esta colección.

a continuación, utilizando una recortadora de pelo quitar todos de piel de la zona de aplicación. Para evitar cualquier corte, coloque la superficie plana de la maquinilla contra la piel y afeite en la dirección opuesta a la del crecimiento del cabello. Luego, limpie la piel con agua y secar con una gasa. Ahora, usando un aplicador con punta de algodón, aplicar la sustancia directamente sobre la piel. Para mejores resultados, aplique varias capas finas de ungüento o crema, en lugar de una única aplicación de una capa gruesa. Para evitar la ingestión accidental de aplicación tópica compuesto por preparación, lugar un cuello pequeño o un escudo para evitar que el animal de llegar a la parte del cuerpo afectada. Además, para evitar el acicalamiento de compañeros de jaula, los animales deben alojarse individualmente.

ahora que tiene una comprensión de estas rutas alternativas de administración, vamos a ver cómo se están utilizando en la investigación biomédica hoy.

Una de las aplicaciones importantes de oral por sonda nasogástrica es precisa administración de sustancias para el estudio de su efecto directo sobre el tracto gastrointestinal. Aquí, los investigadores utilizaron este método para entregar una levadura probiótica transformado directamente en el estómago del animal. Y entonces ellos disecaron las placas de Peyer, que son nódulos linfáticos organizados de intestino delgado, para el estudio de la adherencia del microorganismo entregado.

La vía oral no invasivo puede utilizarse para imitar el modo natural de la infección transmitidas por los alimentos. En este experimento, el científico desarrolló un modelo para la transmisión oral de Listeria monocytogenes en ratones mediante la ingestión de alimentos contaminados. Después de la infección, los investigadores cosecharon varios órganos como el intestino delgado, colon, bazo, hígado y vesícula, para analizar la propagación de la infección de estos tejidos.

Por último, algunos investigadores están interesados en estudiar el mecanismo por el cual la radiación UV puede conducir a quemaduras de sol. Aquí, los científicos utilizan vía tópica para aplicar una sustancia farmacológica que induce la producción de epidérmico melanina a UV agente protector. A continuación, utiliza un protocolo similar a los estudios en humanos para examinar el efecto protector del agente tópico aplicado contra el eritema inducido por radiación UV.

solo haya visto segunda entrega de Zeus de métodos de administración compuestos relacionados con la dosis oral y tópica. Ahora debe comprender cómo uno puede por vía oral dosis el animal con alimento o agua, y cómo uno puede realizar la administración más precisa, oral por sonda nasogástrica. Por último, tenga en cuenta las consideraciones y método de administración tópica y aplicaciones de estas técnicas diferentes. Como siempre, gracias por ver!

Summary

es el método más seguro y más humano de administración compuesto por dosificación oral si es posible incorporar en el alimento o el agua. Oral por sonda nasogástrica es un método de dosificación precisa pero también es muy estresante para el animal, y se requiere de capacidad técnica. La administración tópica se logra generalmente con poca o ninguna retención del animal, una vez que el área está preparado. Cuidadosa de la vía de administración debe factor en el posible estrés para los animales.

References

  1. Turner, P.V., Pekow, C., Vasbinder, M. A., and Brabb, T. 2011. Administration of substances to laboratory animals: equipment and considerations, vehicle selection, and solution preparation. JAALAS. 50:5. 614-627.
  2. Shimizu, S. 2004. Routes of Administration in The Laboratory Mouse. Elsevier.
  3. Machholz, E., Mulder, G., Ruiz, C., Corning, B. F., Pritchett-Corning, K. R. 2012. Manual Restraint and Common Compound Administration Routes in Mice and Rats. J. Vis. Exp. (67), e2771, doi:10.3791/2771.
  4. Turner, P. V., Brabb, T., Pekow, C., Vasbinder, M. A. 2011. Administration of substances to laboratory animals: routes of administration and factors to consider. JAALAS. 50, 600-613.
  5. Hoggart, A.F., Hoggart, J., Honerlaw, M., and Pelus, L.M. 2010. A spoonful of sugar helps the medicine go down: a novel technique to improve oral gavage in mice. JAALAS. 49:3. 329-334.
  6. Gonzales, C., Zaleska, M.M., Riddell, D.R., Atchison, K.P., Robshaw, A., Zhou, H., and Rizzo, S.J. 2014. Alternative method of oral administration by peanut butter pellet formulation results in target engagement of BACE1 and attenuation of gavage-induced stress responses in mice. Pharmacology, Biochemistry, and Behavior. 126:28-35.
  7. Zumkehr, B., Hermann, C., Theurillat, R., Thormann, W., Gottstein, B., and Hemphill, A. 2012. Voluntary ingestion of antiparasitic drugs emulsified in honey represents an alternative to gavage in mice. JAALAS. 51:2. 219-223.

1. aplicación tópica

  1. antes de aplicar los ungüentos y cremas, eliminar toda piel de la zona mediante el uso de una crema depilatoria o afeitando.
  2. Completamente limpia y seca la piel.
  3. Aplicar la sustancia directamente sobre la piel con un aplicador con punta de algodón o a través de una gota colocada directamente para evitar el contacto por el técnico.
  4. Para obtener mejores resultados, aplique varias capas finas de ungüento o crema se oponen a una sola aplicación de una gruesa capa.
  5. Aplicar líquido partiendo el cabello y aplicando una gota en la piel expuesta.
  6. Cuando se aplica una sustancia por vía tópica, existe la posibilidad de absorción sistémica por el animal en el área de la preparación. Deben tomarse medidas preventivas para evitar la ingestión de accidente o de la temprana eliminación de la sustancia. Collares pequeños o escudos están disponibles para evitar que el animal llegue a afectadas partes del cuerpo. Vivienda individual también puede ser necesario para evitar el acicalamiento de compañeros de jaula.

Figure 1
figura 1. Aplicación tópica en los ratones.

2. dosificación oral

  1. al proporcionar compuestos a animales por alimentos o agua, una mínima dosis diaria basada en el peso corporal debe ser calculada. El peso promedio de la cepa de ratón o rata se utilizan en el experimento se puede utilizar para hacer los cálculos, salvo que se especifique que se pesó cada animal y la dosis se calculó para cada individuo.
  2. Para protocolos que requieren medir precisamente que la ingesta de alimentos o de agua, los animales necesitan ser alojados individualmente.
  3. Especializadas de alimentación o golosinas pueden fabricarse para satisfacer las necesidades experimentales.
    1. Reemplazar la dieta estándar con la formulación, que permite a los animales a ingerir el compuesto durante todo el día.
    2. La comida puede necesitar ser substituido más a menudo que el alimento estándar debido a la inestabilidad compuesta.
  4. Sustancias pueden también administrarse por disolución en el agua potable, lo que permite a los animales recibir un compuesto durante todo el día
    1. una pequeña cantidad de azúcar se agrega al agua para hacerla aceptable. La cantidad exacta para añadir está determinada por la aceptación del agua por los ratones. Utilice el más pequeño posible incremento.
    2. La frecuencia de cambiar el agua depende de la estabilidad del compuesto. Algunas sustancias pueden ser sensibles a la luz o precipitado con el tiempo.

3. Procedimiento de la sonda

calibre de 20-25 x 1.5 en agujas rectas o curvas de dosificación se utilizan para los ratones. Para las ratas, calibre 18-20 x 2-3 en recto o curvo dosificación agujas se utilizan. Éstos están disponibles como agujas de acero inoxidable reutilizables o desechables agujas. Las agujas desechables pueden tener una varilla de plástico flexible o metálica con una punta de silicona.

  1. Conecte la aguja dosificadora una jeringa seleccionada basado en el volumen y la viscosidad de la solución de ensayo. Para dosificación de líquidos espesos, se prefiere una jeringa con cierre Luer. Estas son generalmente disponible a partir de 3 tamaño cc que tiene 100 μl graduaciones. Esto puede no ser conveniente para volúmenes más pequeños o cuando existe una necesidad de dosis exacta volúmenes en incrementos menores.
  2. Fijar la jeringa a la aguja que pueden leerse las graduaciones en el barril sin girar la aguja. Una vez que la aguja se ha colocado en el esófago, cualquier rotación puede romper el esófago, dando por resultado la muerte de los animales.
  3. Llene una jeringa con el volumen apropiado del artículo que se administrará (óptimo volumen = volumen de 5 ml/kg y máximo = 20 ml/kg) 4
  4. El sistema de seguridad adecuado es esencial para este procedimiento. 7
    1. frenar manualmente ratones sujetando la piel en la base de la cabeza y scruffing ellos. Es importante que el cuerpo llevará a cabo tal que se suspende en una línea recta desde la cabeza hasta la cola. Cualquier torsión del cuerpo impedirán la colocación de la aguja de la sonda nasogástrica hacia el esófago.
    2. Agarre firmemente el pescuezo para que la cabeza tiene un mínimo movimiento de lado a lado. Los cuartos traseros deben ser estabilizados para evitar la rotación del cuerpo.
    3. Para gavaging una rata, la agarre sobre los hombros usando el dedo índice y medio a cada lado del cuello y la palma en el animal ' espalda. El pulgar, tercero y cuarto dedos deben rodear el pecho para evitar que el animal para poder moverse hacia adelante o hacia atrás. La posición de los dedos a cada lado del cuello evita que la rata de girar su cabeza.
    4. Es importante que el cuerpo en línea recta y no torcido para ayudar en la colocación de la aguja de la sonda nasogástrica sin daño a la boca, faringe, esófago o estómago.
    5. Asegúrese de que la cabeza no tiene exceso de movimiento de lado a lado.
    6. Los cuartos traseros puede ser estabilizados para evitar la rotación del cuerpo. Esto se logra permitiendo que los pies espaldos descanse sobre la parte superior del mostrador o jaula.
  5. Administración de la sustancia
    1. posición de la aguja con la curva hacia abajo y en línea con la curva natural del cuello. Introducir la aguja en la boca del lado derecho o izquierdo, entre los incisivos y molares en un ángulo hacia la parte posterior de la faringe.
    2. Una vez que la aguja está en la cavidad bucal, inclinar la cabeza con la aguja de la sonda hasta que la nariz apunte hacia arriba. Esto es especialmente importante al usar agujas rectas. La aguja debe deslizarse fácilmente hacia el esófago. No fuerce la aguja hacia abajo. Si se siente alguna resistencia, hacer retroceder la aguja e inténtelo de nuevo.
    3. Una vez que la aguja está en posición en el estómago, depositar suavemente el compuesto.
    4. Quitar la aguja, asegurándose de que no hay rotación de una aguja curvada tiene lugar.
    5. Si el animal comienza a luchar, sacar la aguja dosificadora y refrenar el animal con más seguridad.
    6. Mientras que realizar el procedimiento, si el animal muestra signos de cianosis o dificultad respiratoria, o si hay solución que sale de su boca, la aguja de dosificación debe ser retirada y el animal en su jaula.
    7. En general, cuando gavaging ratas y ratones, particularmente con una sustancia cáustica, es una práctica recomendada inicialmente entregar una pequeña cantidad – para tos – antes de todo el volumen. De esta manera, si la aguja está bien colocada, el volumen entregado a los pulmones es pequeño y el animal tiene una mejor oportunidad de recuperación.

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figura 2. Sonda oral en ratones (izquierda) y ratas (derecha).

muchos experimentos requieren que un compuesto se administra en un animal por vía oral o tópica, de modo que el método imita mejor la ingesta natural de la sustancia experimental.

De la dosis oral, el compuesto puede ser disuelto en el agua potable o incorporado a los alimentos que consumen los animales. Otro método más preciso de la dosificación oral es oral por sonda nasogástrica en el cual se utiliza una aguja grande para colocar el compuesto directamente en el estómago. Por otra parte, un agente tópico puede colocarse directamente sobre la superficie de la piel y generalmente se pretende afectar sólo la zona a la que se aplica. Cada una de estas estrategias tiene ventajas y limitaciones, que vamos a comentar en este video. Después de que le mostraremos cómo realizar estas técnicas de administración compuesto de animales de laboratorio y algunas de sus aplicaciones.

antes de adentrarse en los protocolos, vamos a repasar las consideraciones, ventajas y limitaciones de estas técnicas. Dosificación oral con tabletas, cápsulas o líquido es el más comúnmente utilizado método de administración de la droga en seres humanos. Sin embargo, tabletas y cápsulas son imprácticas para los roedores, por lo que la dosificación oral común se logra disolviendo el compuesto en el agua potable o los alimentos.

Cuando la dosificación a través de beber agua, sacarosa a menudo se añade al agua para mejorar la palatabilidad. Sin embargo, se debe ser finamente equilibrado para fomentar la ingesta de agua normal y beber alcohol en exceso no por el sabor azucarado. Una buena regla es comenzar con una solución de sacarosa al 10% y luego ajustar dependiendo de la ingesta. Otra forma de dosis oral el animal es a través de alimentos especializados. Hay disponibles en el mercado alimentos que comúnmente ha dosificado compuestos, como el Fenbendazol, incorporado en él. El roedor de las empresas de la alimentación también puede crear dietas de prueba especializados para cumplir un requisito experimental.

Las ventajas con esta forma de dosificación oral son que es no invasivo, administra el compuesto continuamente y simula la administración de medicamentos oral humano. Sin embargo, carece de precisión porque consumo compuesto depende de la aceptación de la comida o agua, la estabilidad del compuesto y el número de animales presentes en la jaula. Si la dosificación exacta no es fundamental para el experimento, este método no invasivo es mejor para el bienestar de los animales.

Para administración oral más precisa, se puede utilizar oral por sonda nasogástrica, que deposita el compuesto directamente en el estómago en un tiempo específico y en un volumen especificado. Sin embargo, es necesaria una formación adecuada para llevar a cabo esta técnica porque pueden ocurrir daños graves al animal si no están debidamente asegurados.

Venir a agentes tópicos, se trata de cremas, lociones, ungüentos, aerosoles y geles. Por lo general, los agentes tópicos pretenden afectar sólo la zona a la que se aplican. Sin embargo, también pueden ser absorbidos en el torrente sanguíneo, que puede ser intencionada o no. Esta absorción depende de: la condición de la piel, la superficie utilizada, la concentración de la sustancia, la duración del contacto y la solubilidad en lípidos del agente de.

ahora que hemos discutido los antecedentes de los métodos de administración oral y tópica, vamos a aprender los protocolos a partir de la administración oral vía alimento o agua.

De cálculo de la dosis, primero necesitas saber la dosis prevista para ser administrado. En segundo lugar, se debe determinar el peso del cuerpo. En lugar de peso de animales individuales, puede utilizar el peso promedio de la cepa de ratón o rata para sus cálculos, a menos que se especifique lo contrario. En tercer lugar, debe tener en cuenta el número de animales por jaula, y en cuarto lugar, usted necesita saber el consumo promedio de agua o alimento diario por jaula.

Recuerde, los alimentos formulados o el agua potable con el compuesto disuelto puede necesitar ser substituido más con frecuencia que los alimentos o el agua debido a la inestabilidad compuesta. Algunos compuestos pueden ser sensibles a la luz o puede precipitar con el tiempo.

ahora, vamos a aprender a administrar por vía oral dosis precisas realizando sonda oral en ratones y ratas.

Primer paso es elegir una aguja adecuada para el procedimiento. Estas son ya sea reutilizable de acero inoxidable o desechables con una punta de eje y silicón plástico flexible. Para los ratones, 20-25 calibre recta o curvas agujas dosificadoras 1,5 pulgadas de longitud son apropiadas. Para las ratas, seleccione 18-20 rectos o curvos dosificación agujas del calibrador que son 2-3 pulgadas de largo. La aguja correcta selección de la jeringa y calibre también depende de volumen y viscosidad. Revisar la administración de compuestos que video para comprender el impacto de estos factores. Para la dosificación de líquidos espesos se prefiere una jeringa con cierre Luer.

Después de hacer la selección, coloque la jeringa a la aguja que pueden leerse las graduaciones en el barril sin girar la aguja. Esto es importante porque una vez que la aguja ha sido colocada en el esófago cualquier rotación puede romper la pared del esófago que resulta en la muerte del animal. A continuación, llene la jeringa con el volumen correcto de la solución a administrar.

Este método siempre debe realizarse en animales conscientes con reflejos de deglución intactos para evitar colocación accidental en la tráquea. Utilizando la técnica de sujeción adecuado es crítico para este procedimiento. Para ratón, agarre la piel en la base de la cabeza y sostener firmemente el pescuezo. Esto asegura que el jefe tiene oportunidad mínima para el movimiento de lado a lado. Además, asegúrese de que el cuerpo se suspende en una línea recta desde la cabeza hasta la cola; cualquier torsión impedirá la colocación de la aguja de la sonda nasogástrica hacia el esófago. Los cuartos traseros deben ser estabilizados también para evitar la rotación del cuerpo.

Para contener una rata, lo agarre por los hombros usando el dedo índice y medio a cada lado del cuello. Esto evitará que la rata girando su cabeza de lado a lado. El pulgar, tercero y cuarto dedos rodean el pecho para evitar que el animal se mueva hacia adelante o hacia atrás.

Una vez que correctamente han refrenado el animal, coloque la aguja con la curva hacia abajo y en línea con la curva natural del cuello. Luego, introducir la aguja en la boca del lado derecho o izquierdo, a través del diastemata y entre los incisivos y molares en un ángulo hacia la parte posterior de la faringe. Ahora que la aguja se coloca en la cavidad oral, se usa para inclinar la cabeza hacia atrás hasta que la nariz apunte hacia arriba. En este punto, la aguja debe deslizarse fácilmente hacia el esófago. Una vez que la aguja se coloca en el estómago, depositar suavemente el compuesto. A continuación, retire la aguja del animal, asegurándose de no girarla. Es importante no forzar la aguja hacia abajo. Si usted siente alguna resistencia, retírela y vuelva a intentarlo. Al realizar el procedimiento, si el animal muestra signos de cianosis o distrés respiratorio o si hay solución que sale de su boca, la aguja de dosificación debe ser retirada y el animal debe ser liberado en su caja.

por último, vamos a revisar los procedimientos para la administración tópica en animales de laboratorio. Empezar por anestesiar el animal. Esto se hace comúnmente usando un rápido actuar inhalantes, que permite la rápida recuperación de animales. Para más detalles sobre la administración de anestesia, por favor ver otro video de esta colección.

a continuación, utilizando una recortadora de pelo quitar todos de piel de la zona de aplicación. Para evitar cualquier corte, coloque la superficie plana de la maquinilla contra la piel y afeite en la dirección opuesta a la del crecimiento del cabello. Luego, limpie la piel con agua y secar con una gasa. Ahora, usando un aplicador con punta de algodón, aplicar la sustancia directamente sobre la piel. Para mejores resultados, aplique varias capas finas de ungüento o crema, en lugar de una única aplicación de una capa gruesa. Para evitar la ingestión accidental de aplicación tópica compuesto por preparación, lugar un cuello pequeño o un escudo para evitar que el animal de llegar a la parte del cuerpo afectada. Además, para evitar el acicalamiento de compañeros de jaula, los animales deben alojarse individualmente.

ahora que tiene una comprensión de estas rutas alternativas de administración, vamos a ver cómo se están utilizando en la investigación biomédica hoy.

Una de las aplicaciones importantes de oral por sonda nasogástrica es precisa administración de sustancias para el estudio de su efecto directo sobre el tracto gastrointestinal. Aquí, los investigadores utilizaron este método para entregar una levadura probiótica transformado directamente en el estómago del animal. Y entonces ellos disecaron las placas de Peyer, que son nódulos linfáticos organizados de intestino delgado, para el estudio de la adherencia del microorganismo entregado.

La vía oral no invasivo puede utilizarse para imitar el modo natural de la infección transmitidas por los alimentos. En este experimento, el científico desarrolló un modelo para la transmisión oral de Listeria monocytogenes en ratones mediante la ingestión de alimentos contaminados. Después de la infección, los investigadores cosecharon varios órganos como el intestino delgado, colon, bazo, hígado y vesícula, para analizar la propagación de la infección de estos tejidos.

Por último, algunos investigadores están interesados en estudiar el mecanismo por el cual la radiación UV puede conducir a quemaduras de sol. Aquí, los científicos utilizan vía tópica para aplicar una sustancia farmacológica que induce la producción de epidérmico melanina a UV agente protector. A continuación, utiliza un protocolo similar a los estudios en humanos para examinar el efecto protector del agente tópico aplicado contra el eritema inducido por radiación UV.

solo haya visto segunda entrega de Zeus de métodos de administración compuestos relacionados con la dosis oral y tópica. Ahora debe comprender cómo uno puede por vía oral dosis el animal con alimento o agua, y cómo uno puede realizar la administración más precisa, oral por sonda nasogástrica. Por último, tenga en cuenta las consideraciones y método de administración tópica y aplicaciones de estas técnicas diferentes. Como siempre, gracias por ver!

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