14.11: Interférence par ARN
L’interférence de l’ARN (ARN) est un processus dans lequel une petite molécule d’ARN non codante bloque l’expression d’un gène en se liant à sa transcription de l’ARN messager (ARNm), empêchant la protéine d’être traduite.
Ce processus se produit naturellement dans les cellules, souvent par l’activité des microARN. Les chercheurs peuvent tirer parti de ce mécanisme en introduisant des ARN synthétiques pour désactiver sélectivement des gènes spécifiques à des fins de recherche ou thérapeutiques. Par exemple, l’ARNI pourrait être utilisé pour supprimer les gènes qui sont hyperactifs dans des maladies comme le cancer.
Le processus
Tout d’abord, l’ARN à double brin avec une séquence complémentaire au gène ciblé est synthétisé. Différents types d’ARN à double brin peuvent être utilisés, y compris l’ARN à courte interférence (siRNA) et l’ARN en épingle à cheveux (shRNA). shRNA est un brin d’ARN qui est plié sur- la création d’un ARN à double brin avec une boucle d’épingle à cheveux sur un côté- et est un précurseur de siRNA.
L’ARN à double brin est ensuite introduit dans les cellules par des méthodes telles que l’injection ou la livraison par des vecteurs, tels que les virus modifiés. Si shRNA est utilisé, les enzymes RNase dans la cellule, comme Dicer, le couper vers le bas à la siRNA plus courte, en enlevant la boucle d’épingle à cheveux.
Le siRNA se lie alors à une enzyme appelée Argonaute, qui fait partie d’un complexe appelé RISC (complexe de silençage induit par l’ARN). Ici, les deux brins de l’IRN se séparent. L’un flotte tandis que l’autre , appelé le volet de guidage, reste attaché au RISC. Il est appelé le brin de guide parce que c’est le brin qui se lie à l’ARNm, par l’appariement de base complémentaire, apportant l’ensemble risc à l’ARNm. Cette liaison est très spécifique car le siRNA est généralement conçu pour être complètement complémentaire à l’ARNm ciblé. L’argonaute fend alors et dégrade l’ARNm, l’empêchant d’être traduit en protéine, faisant ainsi taire le gène.
