Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove

14.11: RNA 干扰
目录

JoVE Core
Biology
Education
RNA 干扰
 

文字本

14.11: RNA 干扰

RNA干扰(RNA interference,RNAi)是一个小的非编码RNA分子通过与信使RNA(mRNA)转录物结合而阻断基因表达,阻止蛋白质翻译的过程。

这一过程在细胞内自然发生,通常是通过microRNAs的活性。研究人员可以利用这一机制,通过引入合成的RNAs选择性地去激活特定的基因用于研究或治疗目的。例如,RNAi可以用来抑制癌症等疾病中过度活跃的基因。

过程

首先,合成与目标基因互补的双链RNA可以使用不同类型的双链RNA,包括短干扰 RNA (siRNA) 和小发夹RNA (shRNA)。shRNA是一条折叠的RNA链,在一侧形成一个发夹环的双链RNA,是siRNA的前体。

然后,双链RNA通过一些方法被导入细胞,如通过载体(如修饰病毒)注射或传递。如果使用 shRNA细胞中的RNAse酶,如Dicer,将其切割成较短的siRNA,去掉发夹环。

然后siRNA与一种叫做Argonaute的酶结合,Argonaute是RISC (RNA-诱导沉默复合物)的复合物的一部分。在这里,siRNA 的两条线分开了。其中一个漂浮而另一个称为导向链,仍与RISC相连。它被称为引导链,因为这是通过互补碱基配对与mRNA结合的链,将整个RISC带到mRNA。这种结合是非常特异的,因为siRNA通常被设计成与靶向mRNA完全互补。然后Argonaute 切割并降解mRNA,防止其转化为蛋白质,从而有效地沉默基因。

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
simple hit counter