15.9: DNA分离
许多生物技术和研究应用，如分子克隆，都需要从细胞中提取DNA。为了去除和纯化细胞中的DNA，研究人员采用了各种方法提取DNA。虽然不同协议的细节可能有所不同，但一些一般概念是DNA提取过程的基础。
过程
首先，细胞需要裂解，才能将DNA释放到溶液中。细胞可以使用均质机、超声波仪或打珠机等设备进行物理裂解，这些设备可以研磨或以其他方式施加力，使细胞破裂。通常，在裂解过程中添加洗涤剂等物质，以化学方式破坏脂质细胞膜，帮助从细胞核和细胞中释放DNA。离心机中的旋转将细胞碎片沉积到底部，然后收集含有细胞材料的裂解液进行进一步处理。
然后，DNA必须与其它细胞分子（如RNA和蛋白质）分离。因此，核糖核酸酶和蛋白酶k等酶通常在裂解过程中或裂解后添加，分别降解RNA和蛋白质。此外，有机溶剂如苯酚和氯仿通常用于从蛋白质中分离DNA。通常，用苯酚氯仿旋转样品，然后离心分离管中的水相和有机相。顶部含有水相的DNA可以被移走，留下有机相中的蛋白质。
在提取DNA的过程中，通常会加入盐来稳定DNA，并有助于将其从溶液中沉淀出来。DNA沉淀的标准方法是在样品中加入冰乙醇，如乙醇或异丙醇。这会导致DNA在试管中的液体中形成白色的浑浊沉淀物。
然后在离心机中旋转样品，使DNA沉淀在试管底部聚集成颗粒。通过除去液体，用酒精洗涤，然后再次旋转来洗涤颗粒。在最后一次洗涤后，将小球重新悬浮在缓冲液中，形成纯化DNA的水溶液，可供生物技术研究或使用。
