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13.13: Bakterielle Transformation
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Bacterial Transformation
 
PROTOKOLLE

13.13: Bakterielle Transformation

1928 arbeitete der Bakteriologe Frederick Griffith an einem Impfstoff für die Lungenentzündung. Sie wird durch das Bakterium Streptococcus pneumoniae verursacht. Griffith untersuchte zwei Pneumokokken-Stämme in Mäusen: einen pathogenen und einen nicht-pathogenen. Dabei erkannte er, dass nur der pathogene Stamm die Wirtsmäuse tötete.

Griffith machte eine unerwartete Entdeckung, als er Überreste des abgetöteten pathogenen Stamms mit dem lebenden, nicht-pathogenen Stamm vermischte. Diese Mischung tötete nicht nur Wirtsmäuse, sondern enthielt auch lebende pathogene Bakterien, welche pathogene Nachkommen produzierten. Griffith schloss daraus, dass der nicht-pathogene Stamm etwas von dem toten pathogenen Stamm erhielt, das ihn in einen pathogenen Stamm transformierte. Er nannte diesen Vorgang Transformation.

Zur Zeit der Untersuchungen von Griffith fand eine hitzige Debatte zur Identität von genetischem Material statt. Viele frühzeitige Hinweise deuteten auf Proteine als Erbmoleküle hin. Griffiths Experimente zur bakteriellen Transformation lieferten einige der frühesten Daten, die zeigen, dass die DNA das genetische Material ist.

Die Bakterien nehmen externe DNA durch Transformation auf. Die Transformation erfolgt auf natürliche Weise, wird aber auch in Labors oft zur Klonierung von DNA genutzt. Um ein bestimmtes Gen zu klonen, können Wissenschaftler das Gen in ein Plasmid einfügen. Plasmide sind zirkuläre DNA-Moleküle, die sich unabhängig voneinander replizieren können. Das Plasmid enthält oft ein Gen für eine Antibiotikaresistenz. Bakterien nehmen das Plasmid durch Transformation auf. Die Wissenschaftler setzen die Bakterien dann einem Antibiotikum aus und überlebende Bakterienkolonien müssen das Plasmid enthalten, da das Plasmid ein Gen für die Antibiotikaresistenz enthält. Eine DNA-Analyse kann das Vorhandensein der Gene im Plasmid bestätigen. Die Bakterienkolonien mit dem gewünschten Gen kann man vermehren und zur Herstellung weiterer Plasmide oder Proteine verwenden.

Warum nehmen Bakterien fremde DNA auf? Im Gegensatz zu sich sexuell fortpflanzenden Organismen klonen sich Bakterien selbst. Diese Fortpflanzungsmethode, die als Spaltung bezeichnet wird, bietet nur wenige Möglichkeiten für genetische Variationen. Obwohl Mutationen eine gewisse Vielfalt einführen, sind viele Mutationen schädlich. Die geteilten Gene durch die Transformation sowie Konjugation und Transduktion ermöglichen es den Prokaryoten, sich weiterzuentwickeln.


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Bacterial Transformation Exogenous DNA Laboratory Settings DNA Cloning Genes Proteins Competent Bacteria Cell Wall Cell Membrane Plasmid Antibiotic Resistance Gene Transformants Liquid Medium Heat Shock Selection Media Colonies Bacterial Growth Frederick Griffith

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