Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove

6.9: Реплисома
СОДЕРЖАНИЕ

JoVE Core
Molecular Biology

A subscription to JoVE is required to view this content. You will only be able to see the first 20 seconds.

Education
The Replisome
 
ТРАНСКРИПТ

6.9: Реплисома

Репликация ДНК осуществляется большим комплексом белков, которые действуют согласованно для достижения высокоточной репликации ДНК. Вместе этот комплекс известен как репликативная машина, или реплисома.

Синтез лидирующей и отстающей цепей - процесс с высокой степенью координации. Чтобы объяснить это, Брюсом Альбертсом в 1980 году была предложена “модель тромбона”. Образование петли ДНК начинается, когда на родительской отстающей цепи синтезируется праймер. Петля растет с синтезом фрагмента Оказаки и, наконец, исчезает, когда синтез фрагмента заканчивается. Затем ДНК-полимераза присоединяется к другому праймеру, и весь цикл, от образования петли до исчезновения, повторяется. Реплисома, как репликативная машина, позволяет координировать все операции.

Компоненты реплисомы

Хеликазы раскручивают и разделяют двухцепочечную ДНК  Эти ферменты присутствуют в виде одиночного гексамерного кольца у прокариот и в виде двойного гексамерного кольца у эукариот. Эукариотические хеликазы зависят от дополнительных белков, Cdc45 и GINS, для функционирования.  Белки, связывающие одноцепочечную ДНК (SSB) предохраняют цепи ДНК от воссоединения.  У прокариот SSB состоят из одной субъединицы, тогда как у эукариот они представляют собой гетеротримерный белок, известный как репликативный белок A (RPA).

Праймаза добавляет РНК-праймер, с которого начнется синтез ДНК.  У прокариот праймаза присутствует в виде фермента с одной субъединицей, называемого DnaG, который синтезирует праймер РНК длиной около 12 нуклеотидов.  У эукариот мультисубъединичный фермент ДНК-полимераза-α, праймаза, синтезирует гибридный РНК-ДНК праймер длиной около 25 нуклеотидов. В дополнение к полимеразе-α, репликативная полимераза будет расширять вновь синтезированную ДНК. В то время как у прокариот присутствует один тип репликативной полимеразы, ДНК-полимераза III, у эукариот присутствуют два разных типа репликативной полимеразы, Pol ε и Pol δ, для синтеза лидирующей цепи и отстающей цепи соответственно. 

Белки скользящего зажима удерживают полимеразы прикрепленными к матрице ДНК. β-зажим, гомодимерный белок, действует как зажим у прокариот. У эукариот ту же задачу выполняет ядерный антиген пролиферирующих клеток (PCNA), гомотримерный белок. Центральная пора скользящего зажима положительно заряжена, что позволяет ему испытывать электростатические взаимодействия с отрицательно заряженным фосфатным остовом ДНК. Зажим крепится к ДНК с помощью белков-погрузчиков зажима. Эти пентамерные белки относятся к классу АТФаз AAA+. Эукариотический погрузчик зажимов известен как фактор репликации C, в то время как прокариотический погрузчик зажимов E. coli известен как γ-комплекс. Однако белки зажимов и погрузчики зажимов считаются эволюционными гомологами в отличие от многих других компонентов реплисомы.


Литература для дополнительного чтения

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter