Regular la temperatura en el laboratorio: preservación de muestras usando frío

General Laboratory Techniques

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Summary

Preservación de muestras de laboratorio, muestras y reactivos con frío extremo se realiza rutinariamente en los laboratorios de investigación biomédica. Este video discuten algunos de los métodos para mantener frías las muestras de laboratorio y explicará el método de enfriamiento correcto para cada requisito experimental.

Por ejemplo, agentes de enfriamiento, tales como hielo y hielo seco, se suelen utilizar al mantener las muestras frías durante los experimentos. Este video trata sobre las propiedades físicas de los agentes refrigerantes más utilizados, así como las precauciones de seguridad para trabajar con ellos.

Cuando trata de mantener las muestras frías entre experimentos, equipamiento, incluyendo refrigeradores de laboratorio grado y congeladores sirven para conservar las muestras durante un período prolongado de tiempo. También se discute en este video son los tipos de muestras y reactivos que pueden ser almacenados en los equipos de refrigeración de laboratorio comúnmente disponibles.

Por último, se introduce el concepto de la criopreservación como un proceso a través del cual los tejidos, células y biomoléculas se enfrían a temperaturas, de tal modo con eficacia parando degradantes muestra toda la actividad biológica de sub-zero. Varios métodos de criopreservación se discuten que minimizar o eliminar la formación de dañar los cristales de hielo.

Cite this Video

JoVE Science Education Database. Técnicas generales de laboratorio. Regular la temperatura en el laboratorio: preservación de muestras usando frío. JoVE, Cambridge, MA, (2017).

Preservación de muestras de laboratorio, muestras y reactivos, es un requisito de laboratorios de investigación en todo el mundo. Una manera eficaz de preservar la integridad de la muestra y la viabilidad en el tiempo es mantener en frío.

Si está trabajando con una muestra en el Banco, o almacenar una muestra al final de un experimento, pueden utilizarse diferentes métodos de refrigeración. Este video muestran los tipos de agentes refrigerantes e instrumentos típicamente encontraron en el laboratorio y le ayudará a entender qué tipos de muestras se almacenan a temperaturas que.

La elección del refrigerante depende de la naturaleza del procedimiento experimental que se realiza.

Hielo convencional es la opción lógica para la preservación de las muestras en el corto plazo. Usted probablemente sabe que el hielo es agua congelada, que tiene un punto de fusión de 0 ° C a presión atmosférica normal, como se puede ver en este diagrama de fase. Usted no supiera que se refiere a veces como "hielo mojado", porque se convierte en líquido, calienta a temperatura ambiente.

"Mojado de hielo ' es ideal para mantener las muestras y los reactivos fríos mientras trabajaba con- o transporte.

Mientras "húmedo hielo ' es H2O sólidos," hielo seco "es la forma sólida del dióxido de carbono, que tiene un punto de fusión de-78.5 ° c. Hielo seco no se funde en el líquido a presión atmosférica pero algo se transforma directamente en gas de dióxido de carbono, a través de un proceso llamado sublimación. La sublimación se refiere a un cambio en la fase de la materia de sólido a gas y se produce por debajo del punto triple en un diagrama de fase.

Usar hielo seco, cuando se trabaja con muestras biológicas tales como congelados bacteriana o células de mamíferos o tejido, que generalmente se almacenan a temperaturas muy por debajo de 0 ° c.

Hielo seco también es ventajoso ya que no deja ningún residuo al cambio de estado, que lo hace ideal para la construcción de un baño de congelación por el líquido vertido sobre hielo seco.

Es gas condensado nitrógeno y nitrógeno líquido. escrito comúnmente como "LN2". En atmosférico presión hierve de nitrógeno líquido, o transiciones de líquido a un gas, a-196 ° C, que se puede ver por su diagrama de fase.

Cuando usted necesita almacenar a especímenes biológicos a temperaturas por debajo de lo que se pueden obtener más congeladores de laboratorio, se utiliza nitrógeno líquido.

Nitrógeno líquido puede almacenarse en un dewar, o termo, con una tapa suelta o un gran tanque dewar equipado con una válvula de alivio para evitar la presión de acumulación dentro del sistema.

Aunque no tóxico, hielo seco y nitrógeno líquido son materiales peligrosos y no deben manipularse hasta que ha sido entrenado por un miembro experimentado del laboratorio.

Debido a las extremadamente bajas temperaturas del nitrógeno líquido y hielo seco, puede ocurrir daño tisular severo al entrar en contacto con la piel. Siempre usar protección adecuada, incluidos Guantes criogénicos y una bata de laboratorio. Utilice herramientas para manipular las muestras para evitar el contacto con la piel.

También, nunca deben utilizarse recipientes herméticos para almacenar hielo seco o nitrógeno líquido, ya que estos agentes refrigerantes cambian estado en gas. Condiciones herméticas, presión puede construir llevando a una explosión.

Y ahora para los instrumentos que guardan muestras de frío... Congeladores y refrigeradores de laboratorio regulan más bien que los que se encuentran en la página de inicio para asegurar una temperatura uniforme a lo largo de la unidad de temperatura.

Generalmente están equipadas con control de sistemas y alarmas que van siguiente cambio significativo de la temperatura de la temperatura.

Nunca almacenar los alimentos o beber en frigoríficos de laboratorio o congeladores, como esto puede resultar en contaminación con productos químicos tóxicos o bacterias. Usted tendrá que encontrar otro lugar para almacenar tu comida.

Refrigeradores se mantienen a 4° C y se utiliza generalmente para el almacenamiento temporal de muestras especialmente cuando congelación puede afectar la integridad de la muestra.

Muchos reactivos y soluciones son almacenadas a 4° C para extender su vida útil, incluyendo medios de cultivo de tejidos y vertidas placas celulares, que se calientan antes de su uso.

Cuartos fríos son ideales para el almacenamiento de los equipos más grandes que deben operar a bajas temperaturas, tales como unidades de cromatografía líquida.

Gama de congeladores del grado del laboratorio de temperatura de-20 ° C a-196 ° C para los congeladores criogénicos.

Para el almacenamiento de los ácidos nucleicos y reactivos, tales como enzimas de restricción,-20 ° C es la opción adecuada. Al retirar del congelador, las muestras y los reactivos se deben mantener en hielo.

-80 ° C y congeladores criogénicos son adecuados para el almacenamiento de células y tejido congelado durante un período prolongado de tiempo después de la criopreservación en nitrógeno líquido. Hielo seco se utiliza generalmente para el transporte de las muestras tomadas de congeladores de-80 ° c.

La criopreservación es un término que se refiere al almacenamiento a largo plazo de los tejidos o células vivas incluso. En toda actividad biológica, incluidas las reacciones que degradan la muestra se detiene con eficacia de temperaturas bajo cero.

Al congelar el tejido y las células vivas, pueden formar cristales de hielo, deshidratación celular y daños, así como acumulación de moléculas de solutos a concentraciones nocivas.

Snap o flash congelación es el proceso por el cual muestras biológicas son rápidamente sumergidas en nitrógeno líquido o una mezcla de hielo seco y etanol, para que los cristales de hielo grandes no pueden formar y dañar las células. Crioprotectores también pueden utilizarse como aditivo para reducir la formación de hielo.

Como una alternativa a flash congelación, máquinas pueden utilizarse para controlar poco a poco el proceso de congelación, que es necesario para criopreservar los embriones de ovejas que ver aquí.

Recientemente, vitrificación en introducida como método para criopreservar las células y tejidos sin cualquier daño debido a cristales de hielo. Este proceso transforma el líquido en la muestra a un sólido no cristalino, vidrioso por enfriamiento rápido en presencia de algunos crioprotectores.

Sólo ha visto la introducción de Zeus para enfriamiento de muestras de laboratorio y los reactivos.

En este video revisamos diferentes tipos de agentes y equipo y ejemplos de Cuándo utilizar cada método de enfriamiento de enfriamiento. También hemos introducido varias maneras para criopreservar a muestras biológicas. Gracias por ver.

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