Regular la temperatura en el laboratorio: aplicación de calor

General Laboratory Techniques

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Summary

Aunque muchos ensayos experimentales se realizan a temperatura ambiente (RT; ~ 20-25 ° C), no es infrecuente para los experimentos, o partes de los experimentos, que requieren algún tipo de regulación de la temperatura. Este video habla sobre las diferentes razones y temperaturas en el que un científico puede "mantener las cosas en caliente". Por ejemplo, en algún momento, las células necesitan ser cultivadas en un entorno cerca de la temperatura corporal (~ 37 ° C), estructura de la proteína debe ser modificado (> 56 ° C), o reactivos y soluciones tienen que ser climatizada (~ 100 ° C). También se discute, es la forma correcta de manejar un termómetro y medir la temperatura en la agitación de líquidos. Ya que no siempre es obvia Cómo regular las temperaturas en el laboratorio, este vídeo también conversará acerca de qué tipos de equipo uno pueden elegir en cada situación.

Cite this Video

JoVE Science Education Database. Técnicas generales de laboratorio. Regular la temperatura en el laboratorio: aplicación de calor. JoVE, Cambridge, MA, (2017).

Hay muchas maneras de regular la temperatura en el laboratorio. A veces necesitan calentar reactivos, cultivos celulares deben mantenerse a temperaturas específicas para un crecimiento óptimo y temperatura corporal animal debe regularse durante o después de procedimientos quirúrgicos. Este vídeo tendrá un vistazo a algunas de las formas y razones que un científico puede las cosas calor y las temperaturas específicas utilizadas para reactivos y muestras calientes.

En primer lugar, es importante tener en cuenta que en común los procedimientos de laboratorio, comúnmente hablamos de temperatura en las mediciones de grados Celsius o grados centígrados. Como otra métrica unidades-de-su medición en la ciencia, el grado centígrado es uno del sistema internacional de unidades estándar para la medición de la temperatura.

El termómetro, como usted probablemente ya sabe, es el instrumento utilizado para medir la temperatura.

Para obtener la lectura más precisa de temperatura de un líquido está la calefacción o refrigeración, sumerja el termómetro por lo menos 10-15 cm, o unas 4-6 pulgadas debajo de la superficie. Entonces sujete cuidadosamente o de lo contrario seguro el termómetro en su lugar, teniendo cuidado de que el instrumento es por lo menos 5 cm o aproximadamente 2 pulgadas, por encima del fondo del envase y anchura de al menos un termómetro desde el lado del contenedor.

Si se revuelve el líquido, asegúrese de que el termómetro no va a ser golpeado por la barra de agitación, de lo contrario, podría tener una confusión peligrosa en las manos.

Lea el indicador de temperatura del líquido a nivel de los ojos. Al leer un termómetro, tenga cuidado de no para tocar a lo largo del eje. El calor del cuerpo puede afectar la precisión de la medición.

A continuación, vamos a repasar algunas temperaturas comunes en que llevará a cabo muchos experimentos.

Dependiendo del tipo de trabajo realizado en su laboratorio y el tipo de equipo encuentra en su laboratorio, la temperatura de la habitación será normalmente entre de 20-25 ° c. Generalmente se puede suponer que un experimento debe ser realizado a temperatura ambiente si no hay requisito de la temperatura se indica lo contrario. Temperatura ambiente a menudo se abrevia en protocolos como lo has adivinado: RT

Cuando se enfrentan con un procedimiento "in vitro", el experimento suele llevarse a cabo en 37˚C. Procesos que se llevan a cabo "in vitro" involucran tejido, células o extractos y tratan de imitar las condiciones que existen dentro de un organismo. Experimentos in vivo, por el contrario, se llevan a cabo con el organismo intacto, y puesto que los mamíferos tienen una temperatura corporal de 37 ° c, experimentos de cultivo celular "in vitro" por lo general se llevan a cabo en esta temperatura.

A temperaturas superiores a 56° C, las proteínas se despliegan, un proceso llamado desnaturalización. Esto puede ser útil para una variedad de razones, incluyendo la apertura cambiando una forma de las proteínas para una identificación más fácil de un anticuerpo de detección.

Hervir el agua y algunas soluciones con base de agua o acuosos, a aproximadamente 100 ° C. También puede ser una buena temperatura en el que se disuelven reactivos que son difíciles de poner en solución a temperatura ambiente.

Con frecuencia, un protocolo experimental indica que ciertas medidas deben llevará a cabo a una temperatura específica.

Experimentos en el Banco se llevan a cabo en unos 20-25° C o a temperatura ambiente.

A temperatura ambiente, más reactivos y cultivos celulares son estables aunque algunos reactivos necesitan ser protegidos de la luz, algunos experimentos deben realizarse en una campana para mantener la esterilidad y algunos ensayos que tienen lugar dentro de una cámara húmeda para evitar la reactivos de la desecación o tejidos experimentales.

Cuando el protocolo dice, "descongelar las células o un reactivo en particular", utilizar un baño de agua conjunto a 37 ° C por lento y aún calienta. A menos que el protocolo indica calefacción adicional, asegúrese de retirar la muestra del baño tan pronto como el último fragmento de hielo se ha derretido.

Si el protocolo indica que deben utilizarse "con medios" o los otros reactivos precalentados, un baño de agua de 37 ° C también es útil para mantener las soluciones a una temperatura constante, cálida, pero no caliente.

Para mantener sus soluciones libres de contaminación o dilución del agua circundante, use una espuma flotante estante para descongelar las alícuotas congeladas de células o microlitro caliente volúmenes de solución. Si prefiere un soporte de tubo más seguro, un estante del metal puede utilizarse para este propósito también.

Para mayores volúmenes de líquido, rejillas plásticas o abrazaderas metálicas pueden utilizarse para la celebración de las muestras en el baño de agua.

Cuando son instruidos para incubar cultivos celulares mamíferos, que generalmente significa colocar las células en una incubadora de 37 ° C, con una atmósfera de 5% dióxido de carbono, y una bandeja de agua para evitar que mantiene la incubadora en el cerca de 95% humedad.

Las células bacterianas a veces también se cultivan a 37° C, en una incubadora, una habitación caliente. Un incubador de agitación puede utilizarse cuando quiere expandir rápidamente números de la cultura de célula bacteriana, disminuyendo el tiempo de la cultura agitando las culturas líquidas, asegúrese de que las bacterias reciban amplios nutrientes porque no sedimento en el fondo del tubo.

De calentamiento muy rápido o hirviendo, tradicionalmente se han utilizado placas. Ahora que el microondas se encuentran comúnmente en el laboratorio, puede utilizarse para hervir rápidamente las soluciones acuosas.

Ahora echemos un vistazo a algunas de las razones que quiera cosas de calor hasta en el laboratorio.

Fijación de calor es una forma sencilla y rápida para fijar ciertas muestras biológicas, como las células bacterianas o biomacromoléculas, a un portaobjetos de vidrio antes de la tinción. Aquí pueden ver algunas extensiones cromosómicas que hicieron posibles a través de fijación al calor.

Calefacción agitación de la solución líquida en la que está intentando disolver un reactivo sólido puede ayudar a acelerar el proceso, como el agar en polvo que está siendo disuelto aquí.

Muchos experimentos de células vivas requieren al menos un período de incubación. La incubadora de Incucyte permite la proyección de imagen en tiempo real de crecimiento de la célula, sin la perturbación de las células que pueden ocurrir cuando los contenedores de cultura se quitan de la incubadora.

En vivo la proyección de imagen de la célula se puede realizar con escritorio microscopios así. Aquí las células se mantienen en una incubadora por imágenes mientras su actividad antes y en respuesta a la adición de un estímulo experimental se han consultado y grabado para su posterior análisis.

Sólo ha visto introducción de Zeus para regular temperaturas de laboratorio a 23° C y arriba.

En este video repasamos: algunas de las piezas más comunes de equipo de laboratorio para la calefacción de células animales y soluciones, Cómo decidir qué pieza de equipo a utilizar para el calentamiento de las células o soluciones y algunos temperatura diferentes razones deba ser regulada durante un experimento. Gracias por ver y recordar manejar su termómetro con cuidado!

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