Micro-Drive-Array für chronische In vivo Recording: Tetrode Assembly

Summary

In diesem Protokoll zeigen wir, wie in der Herstellung und dem Zustand Tetroden für die Verwendung mit einem Mikro-Laufwerk-Array, das für die chronische elektrophysiologischen Ableitungen in Ratten entworfen wurde. Darüber hinaus zeigen wir die Endphase der Mikro-Laufwerk-Array Konstruktion, die Installation Erdungskabel und eine schützende Membran enthält.

Abstract

Die Tetrode, ein Bündel von vier Elektroden, hat sich als wertvolles Tool für die gleichzeitige Aufzeichnung mehrerer Neuronen in-vivo werden. Die differentielle Amplitude der Aktionspotentiale Signaturen über die Kanäle einer Tetrode ermöglicht die Isolierung von Single-Unit-Aktivität von Multi-Unit-Signale. Die Fähigkeit zur präzisen Steuerung der stereotaktischen Lage und Tiefe der Tetrode ist von entscheidender Bedeutung für die Untersuchung koordiniert neuronale Aktivität in Hirnregionen. In Kombination mit einem Mikro-Laufwerk-Array, ist es möglich, eine präzise Platzierung und stabile Regelung von vielen Tetroden im Laufe von Tagen bis Wochen zu erreichen. In diesem Protokoll, zeigen wir, wie in der Herstellung und dem Zustand Tetroden mit einfachen Werkzeugen und Materialien, installieren Sie die Tetroden in eine Multi-Laufwerk Tetrode Array für chronische in-vivo Aufnahme in die Ratte, machen Erdungskabel Verbindungen zu den Mikro-Laufwerk-Array, und legen einen schützenden Kegel auf der Mikro-Laufwerk-Array, um die Tetroden von physischen Kontakt mit der Umwelt zu schützen.

Protocol

1. Herstellung von Tetroden

1. Beginnen Sie mit dem Bau eines Tetrode durch den Erwerb einer 50 cm langen, Polyimid isoliert, ni-Chrom-Draht mit einem 12,5 Mikron Durchmesser Kern. Klappen Sie den Draht in die Hälfte. Lassen Sie Ihre Finger entlang der Paar, um sie miteinander zu verkleben. Achten Sie darauf, die beiden Drähte haben einen guten Kontakt über die gesamte Länge.
2. Falten Sie das Paar wieder, indem Sie die beiden Enden zusammen. Stellen Sie sicher, dass die Schlaufe an einem Ende gebildet wird, nicht geknickt werden. Schneiden Sie die vier Adern auf der nicht-Schleife Ende so, dass die vier Spitzen ausgerichtet sind.
3. Für den nächsten Schritt benötigen Sie eine modifizierte Krokodilklemme, ein motorisiertes Wendeeinrichtung und eine horizontale Leiste oberhalb der Drehvorrichtung. Die Krokodilklemme wird durch Aufkleben eines Kunststoff-bar an der Basis des Clips geändert. Wo die Drahtspitzen ausgesetzt sind, spannen die vier Drähte zusammen mit dem modifizierten Krokodilklemme. Hängen Sie die Schlaufe von Drähten über der horizontalen Leiste. Legen Sie die Krokodilklemme in die motorisierte Bühne.
4. Übernehmen 80 im Uhrzeigersinn verdreht um 40 gegen den Uhrzeigersinn verdreht, um das Kabelbündel im Laufe von etwa drei Minuten. Diese Parameter können nach Ihren Bedürfnissen variiert werden.
5. Nach Tetrode Verdrehen abgeschlossen ist, verschmelzen die Drähte durch Erhitzen aus drei verschiedenen Blickwinkeln mit einer Heißluftpistole (420 ° C oder 790 ° F), mit mittel-niedrigen Durchfluss. Für jeden Winkel, beginnt 1-2 cm unterhalb der Stelle, das Kabelbündel spaltet, führen Sie die Heißluftpistole nach unten und oben mit einer 2 cm Abstand von den Drähten für ca. 5 Sekunden. Seien Sie vorsichtig bei hohen Temperaturen vollständig schmelzen wird die Isolierung und führen zu Kurzschlüssen.
6. Nun, da die Drähte miteinander verschmolzen, entfernen Sie die Tetrode aus dem Verdrehen Gerät durch leichtes Anheben der Krokodilklemme Spannung auf der Tetrode zu entlasten, und schneiden Sie die Tetrode in der Nähe der Krokodilklemme. Am anderen Ende, schneiden Sie die Schleife so, dass es vier nicht-gebundene Drähte von gleicher Länge.
7. Anschließend trennen die einzelnen Stränge an der Spitze durch leichtes Biegen der Drähte mit einem weichen Spitze Pinzette.
8. Die Tetrode ist nun bereit zum Laden in den Mikro-Drive Array. Machen Sie 21 bis 25 mehr Tetroden und speichert sie in einer staubfreien Box, bis es Zeit für die Tetrode Ladevorgang.

2. Lädt die Tetroden und Erdungskabel in die Mikro-Laufwerk-Array

1. Um fortzufahren, müssen Sie eine komplette Mikro-Drive Array. Wenn Sie noch nicht ein gebaut haben, um das Video zu beziehen 'Micro-Drive-Array für chronische in-vivo-Aufnahme:. Laufwerk Fertigung " In unserem Design-Plan wird die Tetrode an einem Ende an den Anschluss-Hardware angeschlossen werden und wird durch die Ausführung Polyimid Trägerrohr in der Mikro-Laufwerk, so dass die Elektrode Tipps unterhalb der Basis der Mikro-Laufwerk-Array erweitern.
2. Bevor Sie beginnen, bauen ein Laufwerk Halter, der an den Anschluss Bord an einem Ende befestigt werden kann, und am anderen Ende, kann durch eine Panavise geklemmt werden. In diesem Beispiel ist das Laufwerk Inhaber einer Mühle-max-Anschluss geklebt, um ein Ende des X-ACTO Messergriff (Abbildung 1c).
3. Halten Sie die Tetrode mit weichen Spitze Pinzette und mit einem Stereoskop, drücken Sie die Spitze des Tetrode in das Polyimid Trägerrohr eines der Mikro-Laufwerke. Drücken Sie die Tetrode in die Röhre, bis die einzelnen Elektrodendrähte in der Nähe der Stecker Bord stehen an der Spitze des Drive Array. Achten Sie darauf, nicht zu knicken und biegen Sie die Drähte, wie die Tetrode verursachen wird, um das Gehirn in einem Winkel, anstatt senkrecht geben, und wird die Integrität der Tetrode schwächen.
4. Gently feed das andere Ende der vier Drähte in ihre jeweiligen Löcher in die Elektrode Schnittstellenkarte mit weichen Spitzen einer Pinzette. Wieder zu vermeiden Knicken oder Biegen der Drähte. Bei allen vier Adern vorhanden, drücken Sie die goldenen Nadeln in ihre Löcher mit einer Zange, die eine verkürzte Unterkiefer haben. Wenn die Stifte in das Loch geschoben werden, werden sie Abisolieren der Leitung und schaffen eine elektrische Verbindung.
5. Für den späteren Gebrauch auf, verfolgen die Zuordnung zwischen Mikro-Laufwerke und Pin-Position auf der Elektrode Interface-Karte.
6. Weiter loading insgesamt 18 Tetroden. Die drei verbleibenden Mikro-Laufwerke im Array wird benutzt, um die Referenz-Elektroden Haus. Jede Referenz-Elektrode besteht aus einer Tetrode, dass nur einer der vier ungebundenen Drahtenden verwendet hat. Um die Referenz-Elektroden anbringen, folgen Sie den Ladevorgang, sondern legen nur eine der vier Elektroden an die jeweilige Referenzelektrode Pin am Stecker Bord.
7. Wenn Sie planen, Multi-Site-Aufnahmen sind, kann es sinnvoll sein, planen Sie die Verbindungen von der Tetroden an den Anschluss Bord vor der Zeit. Dies sollte um die Möglichkeit einer Anpassung der falschen Tetrode während der Experimente.
8. Sobald Tetrode Laden abgeschlossen ist, machen zwei Masseleitungen, eine für das Tier und einen für die schützende Membran. Cut eine 6 "lange isolierten Draht (Text: 0,005" Durchmesser) und entfernen Sie 3 mm Isolierung, mit Metall-Pinzette, von jedem Ende des Drahtes. Dann schneiden Sie ein 4"Langen isolierten Draht (Text: 0,005" Durchmesser). Entfernen 3 mm der Isolierung an einem Ende und 1 cm am anderen Ende.
9. Führen Sie das 6 'Erdungskabel durch das Loch an der Seite des Mikro-Laufwerk-Array und bis auf die Interface-Karte. Schließen Sie das freiliegende Drähte der Elektrode Schnittstellenkarte mit einer goldenen Nadel an den dafür vorgesehenen Boden-Loch. Dieser Draht wird das Tier den Schädel zu verbinden.
10. Verlegen Sie die 4 'Erdungskabel parallel zu den bereits installierten Erdleitung. Verbinden Sie die 3 mm abisolierte Ende der Elektrode Schnittstellenkarte mit einer goldenen Nadel an einem anderen benannten Ort Loch. Dieser Draht wird später eine schützende Membran, die als kleine Faraday-Käfig wirken wird Rauschaufnahme reduzieren angeschlossen werden. Wir sind jetzt Anschlussdrähte fertig und kann mit der Verfeinerung unserer Tetroden gehen.

3. Einstellen der Länge des Tetroden

1. Unser Ziel in diesem Prozess ist es, alle Tetroden so geschnitten, dass sie etwas länger als die Tiefe des Ziels der Struktur des Gehirns sind. In unserem Beispiel sind die Mikro-Antriebe für eine maximale Verfahrweg von 5-6 mm ausreichend, um viele neokortikalen Gebiete und der dorsalen Hippocampus von einer erwachsenen Ratte erreichen ausgelegt. Zunächst unteren all die Mikro-Laufwerke, so dass die Tetroden maximal ausgesetzt sind. Gleichzeitig schneiden alle Tetroden um Längen, die ca. 5 mm länger als die gewünschte endgültige Länge mit einer scharfen feinen Schere.
2. Für den letzten Schnitt, bereiten ein Paar gezahnte Schere in einem Panavise. Clamp einem Griff mit einem leichten Winkel nach unten und mit Zacken nach oben, während die anderen Griff baumelt.
3. Jetzt komplett zurückziehen alle Tetroden in ihre Führungskanüle durch Drehen der Mikro-Laufwerke auf.
4. Mit einem Stereoskop, vollständig strecken Sie ein Tetrode aus seiner Kanüle. Mit einem Lineal, positionieren Sie den gezackten Schere in der gewünschten Entfernung von der Führungskanüle. Langsam und sanft schneiden die Tetrode mit einer fließenden Bewegung. Nach diesem Tetrode geschnitten worden ist, ziehen Sie den Mikro-Antrieb von 3-4mm. Wiederholen Sie diesen Vorgang für jeden Tetrode, bis alle geschnitten wurden. An diesem Punkt sind Sie bereit für Vergoldung.

4. Vergoldung von Tetroden und Qualitäts-Check

Vergoldung der Nichrom Tetrode Drähte ist entscheidend für die langfristige stabile Aufnahmen. Es verhindert Korrosion und verbessert Biokompatibilität.

1. Richten Sie die Impedanzmeter im externen Modus und den Stromgenerator in DC Prüfmodus mit Audio-Ausgang (Abbildung 1d). Berühren Sie die beiden Adern des Stromgenerator, um die sechs möglichen Paaren von Kanälen in jedem Tetrode, und verwenden Sie die Audio-Feedback, um festzustellen, ob Kurzschlüsse zwischen Paaren bestehen. Wenn eine kurze existiert, neu geschnitten die Tetrode mit Wellenschliff Schere und erneut testen. Wenn das Problem weiterhin besteht, entsorgen Sie die Tetrode und ersetzen Sie es.
2. Wenn keine Shorts in allen Tetroden existieren, verschieben Sie alle Mikro-Laufwerke ab, Verlängerung alle Tetroden so weit als möglich.
3. Ändern Sie die Konfiguration der Geräte für die Kontrolle Elektrodenimpedanz (Abbildung 1e). Jetzt tauchen die Spitzen aller Tetroden in ein Bad von Standard-Vergoldung Lösung. Das Goldbad ist elektrisch mit dem Pluspol der Impedanzmeter verbunden. Überprüfen Sie die Impedanz der Elektrode durch Berühren der negativen Steigung der Impedanz-Meter zu den entsprechenden Pin am Stecker Bord.
4. Messen und notieren die Impedanz eines jeden Draht auf der Mikro-Drive Array. Normale Werte liegen im Bereich von 1 bis 3 MOhm.
5. Auf die aktuelle Generator, stellen Sie die aktuelle zwischen 1-3 uA. Als nächstes sichere Befestigung der negativen Steigung der Impedanz-Meter, um den Stift auf dem Stecker Bord. Platzieren Sie die Geräte in der Galvanik-Konfiguration (Abbildung 1f). Auf der Impedanzmeter, schnell von den normalen Modus zu wechseln, um den Bypass-Modus und wieder zurück. Während in den Bypass-Modus wird Strom durch die Tetrode und Gold Lösung gehen, und Gold wird auf die Spitze der Elektrode beschichtet werden. Die Impedanz nach jeder Runde der Beschichtung sollte weniger als zuvor. Wiederholen Sie den aktuellen Puls, wenn die Impedanz nicht unter 1 MOhm fallen. Eine konservative Bereich der akzeptablen Impedanzen sind 250kOhm bis 350 kOhm. Wenn die Impedanz sinkt unter 200 kOhm, kann dies auf einen Kurzschluss.
6. Wenn nach wiederholter Impulse die Impedanz nicht ausreichend fallen, kann die Spitze der Elektrode behindert werden. Re-Cut der Tetrode, auf Kurzschlüsse überprüfen, und wiederholen Sie die Vergoldung Prozess. Wenn Nachschneiden nicht hilft, ersetzen Sie die Tetrode und erneut starten.
7. Nach dem Plattieren alle Tetroden, tauchen die Tetrode Tipps kurz in Ethanol, und lassen Sie sie für 3 bis 5 Minuten trocknen lassen.
8. Test für Kurzschlüsse innerhalb Tetroden mit dem Stromgenerator mit der Tetrode Tipps der Luft ausgesetzt. Wenn ein DC-Verbindung zwischen zwei oder mehr Elektroden eines Tetrode, wieder schneiden die Tetrode, und die Platte mit Gold wieder.
9. Nach Vergoldung aller Tetroden abgeschlossen ist, einen Tropfen von mittlerer Dicke Cyano-Acrylat-Klebstoff, um die Schnittstelle zwischen den einzelnen tetrode und seine Polyimidschlauch. Dies wird die Tetrode an ihre mikro-Laufwerk zu sichern und zu erhalten die Länge der Tetrode.
10. Als letzter Schritt, verschieben Sie alle Tetroden in das Laufwerk ein, indem Sie alle Schrauben auf.

5. Anbringen des Schutztrichter

Die schützende Membran Zweck ist die Mikro-Laufwerke und die exponierte Tetrode Draht aus der Umwelt abschirmen. Es bietet auch Unterstützung für den Umgang während eines Experiments und reduziert elektrische Störungen. Wir verwenden eine 3-D gedruckt Kunststoffkonus (Reference Part I: Laufwerk Fertigung). Allerdings ist es möglich, den Kegel aus anderen Materialien zu machen, wie ein gebogenes Stück von Soda kann.

1. Nehmen Sie die Kunststoffmembran und behebt einige Aluminiumfolienband der inneren oder äußeren Oberfläche.
2. Als nächstes ein kleines Loch bohren (1,5 mm im Durchmesser) durch den Kegel und lose Schraube mit einer Unterlegscheibe und Mutter innerhalb des Kegels. Dies wird als elektrischer Durchgang für die Erdleitung dienen. Wir empfehlen die Verwendung eines 0-80 Größe Schraube und Unterlegscheibe Kombination.
3. Legen Sie zuerst und teilweise wiederum drei 1-72 Schrauben der Größe (16.3 cm in der Länge) in die Seiten des Kegels. Mit dem Laufwerk-Array ausgesetzt, legen Sie die Kegel über den Antrieb. Achten Sie darauf, beide Masseleitungen erstrecken sich von der Unterseite des Laufwerks-Array. Wickeln Sie das freiliegende Teil der 4 'Erdungskabel an einem der 1-72 Schrauben mehrmals und festschrauben fest. Sichern Sie die Kegel, um das Laufwerk Basis durch Anziehen der restlichen zwei Kegel Schrauben.
4. Schließlich nehmen Sie die 1 cm abisoliert Ende des kurzen Erdungskabel und wickeln Sie es um die Schraube, zwischen den Folienstreifen und Unterlegscheibe. Sichern Sie den Boden durch Anziehen der Schraube. Jetzt haben wir ein Mikro-Laufwerk-Array, das ist endlich bereit für die chirurgische Implantation.

6. Repräsentative Ergebnisse

1. Micro-Drive-Array Produktion ist nun abgeschlossen. Ihre Mikro-Laufwerk-Array ist mit 18 Tetroden und 3 Sollwertkanäle geladen. Es ist eingehüllt in eine schützende Membran und Kappe für Langlebigkeit. Die fertigen Mikro-Laufwerk-Array mit Schutztrichter wiegt 20g bis 25g im Durchschnitt.
2. Das fertige Laufwerk-Array wird implantiert mit Standard-chirurgischen Eingriffs. Wie Sie sehen können, ist das Laufwerk mit einem Vorverstärker-Chip und ein Bündel von Drähten, die das Signal tragen, um die Datenerfassung Hard-und Software verbunden.

Abbildung 1: A) Schematische Darstellung der Tetrode Verdrehen Konfiguration. Ein horizontaler Balken unterbricht die ungebundenen Elektrodendrähte der Tetrode über den automatisierten Tetrode Verdreheinrichtung. B) Setup für Tetrode Impedanzmessung und Elektrode beschichtet. Bei der Überprüfung auf Kurzschlüsse, ist der Stromkreis:. Das schwarze Kabel an einen anderen Elektrode Kanal auf dem Connector Board befestigt C) Eine Nahaufnahme eines maßgeschneiderten Micro-Drive-Array Halter Werkzeug. Die zylindrische Stange ist ein X-Acto Messergriff. Der Stecker ist ein 26-poliges, zweireihig, Mill-Max-Anschluss. Die beiden Teile sind zusammen mit dental Acryl verklebt. D)-Konfiguration für kurze Überprüfung. Channel X und Y-Kanal werden alle zwei unterschiedliche Kanäle der vier Tetrode Kanäle. E)-Konfiguration für Messelektrode Impedanz. Die Stromquelle ist 'off'. Die Impedanz-Meter wird auf 'on' und 'test' gesetzt. F)-Konfiguration für Vergoldung von Elektrodenspitzen. Die Stromquelle eingestellt ist 'on', wird das Audiosignal 'on', mode 'unipolar' ist, DC-Test 'on' ist, wird derzeit auf 2 Mikroampere.

Discussion

Dieses Protokoll ist die zweite Tranche eines zweiteiligen Protokoll: "Micro-Drive-Array für chronische in-vivo Aufnahme." Die Kombination von Mikro-Laufwerk-Array und Tetrode ist ein leistungsfähiges Werkzeug für den Erhalt von simultanen Aufnahmen von vielen Neuronen in einem wachen, verhalten Tier Vorbereitung. Hoffentlich haben wir Sie mit allen notwendigen Informationen für die Sie benötigen, um zu beginnen oder zu verbessern elektrophysiologischen Ableitungen in Ihrem eigenen Labor.

Der motorisierte Tetrode twister Gerät wurde speziell entwickelt und hergestellt. Wir haben einen Lieferanten und Teilenummer, mit denen Sie ein Gerät mit ähnlicher Funktionalität Bestellung wird zur Verfügung gestellt. Alternativ kann ein motorisierter Drehvorrichtung in-house einfach durch die Kombination eines motorisierten rotierenden Stabmagneten mit einem magnetisierten Rührstab, die zu einer Krokodilklemme befestigt ist, aufgebaut werden; dieser Konfiguration würde höchstwahrscheinlich eine manuelle Zählung der Umdrehungen, manuelle Umkehrung der Drehrichtung, und manuelle Starten / Stoppen.

Einige Elektrode Schnittstellenkarten keine Pin-und-Loch-Mechanismen für den Anschluss der Drahtelektrode. Stattdessen können Sie ein Interface-Board, dass Metallstifte, die aus erstrecken sich von der Connector Board hat gewonnen haben, wie Metallstifte sind ähnlich denen oft auf Standard-elektronischen Komponenten gefunden. Wir kurz eine Methode für den Anschluss der Tetrode Kanäle Metallstifte. Zuerst entfernen Sie die Isolierung an den Spitzen der vier Elektrodendrähte jedes Tetrode. Dies wird durch Anlegen einer Flamme an der Spitze jeder Elektrode so kurz wie möglich mit einem Handheld Butan Fackel erreicht. Erhalten Schrumpffolie, die einfach passen auf den Metallstift und wird der Stift fest drücken, nachdem die Schrumpffolie erhitzt wurde. Schneiden Sie die Schrumpffolie Schlauch an der Länge der Metallstift. Verwenden Sie Kapillarwirkung der Schrumpffolie mit Silberfarbe zu füllen. Legen Sie die exponierte Spitze einer Elektrode Draht in die Schrumpffolie. Schieben Sie den Schrumpfschlauch über den Metallstift, so dass die Drahtelektrode zwischen dem Stift und der Wand des Schrumpffolie ist. Wiederholen Sie diese Schritte für die restlichen drei Elektroden Kanäle der Tetrode. Schließlich, mit einer Seite-an-Seite-Bewegung einer Heißluftpistole, Hitze die vier Stifte in Schrumpffolie abgedeckt (mit der Elektrode Drähte im Inneren der Schrumpffolie). An dieser Stelle sollten Sie über stabile und zuverlässige Verbindungen zwischen den Tetrode und Stecker Bord.

Während dieser Fabrikation Verfahren behandeln die Elektrodendrähte mit Vorsicht, da nur sehr wenig Kraft erforderlich ist, um sie zu schädigen. Es gibt viele Schritte in die Tetrode und Mikro-Laufwerk-Array Verfahren und jeder Schritt ist ebenso entscheidend wie die anderen für den Erhalt von qualitativ hochwertigen Daten. Die hier beschriebene Protokoll ist gut für unser Labor in Anbetracht der Ausrüstung zur Verfügung gearbeitet. Die Ressourcen im eigenen Labor können unterschiedlich sein, daher der Ansicht, jeder Schritt sorgfältig und zögern Sie nicht, das Protokoll zu ändern, um die eigenen Anforderungen und Einschränkungen zu treffen, um eine optimale Leistung zu erzielen.

Materials

Name	Type	Company	Catalog Number	Comments
Panavise	Tool	Panavise	Model 301	Holds either micro-drive array or serrated scissors
Modified Xcelite 378M Pliers	Tool	Newark Inc	96F8903	For inserting connector board pins. To make, remove 2mm from one tip of the pliers.
Slow Cure Glue	Material	Great Planes (Champaign, IL)	GPMR6015	To glue the tetrode to the micro-drive
Gold Plating Solution	Material	Neuralynx Inc.	Sifco Selectron Gold NC	Contains gold particles for electroplating
Current Generator	Tool	World Precision Instruments, Inc.	A365D-B	A.K.A. Stimulus Isolator. Used to electroplate gold solution onto electrode tips.
Impedance Meter	Tool	BAK Electronics	IMP-1 / 6662 / 2788	To check impedance of electrodes
Hot Air Gun	Tool	Steinel (Germany)	HG 3002 LCD	To fuse electrodes together to make tetrode
Accu-Tek Carbofib Tip Tweezers	Tool	Aven	18768 (Pattern 304)	For handling tetrodes
Alligator Clip	Tool	Fine Science Tools	18050-35	A.K.A. Bulldog serrefine. To clip the tetrodes together during twisting
Micro Dissecting Scissors	Tool	Biomedical Research Instruments	25-1000	For general cutting of tetrode/electrode wire
Iris Toughcut Serrated Scissors	Tool	Fine Science Tools	14058-09	For final cut of tetrodes
Teflon Coated Stainless Steel Wire	Material	A-M Systems	790500	Ground wire
12.5 micron nichrome wire	Material	Kanthal Palm Coast	Rediohm-800 1/4 HARD PAC COATING	Polyimide coated micro-wire for making tetrodes.
Tetrode Twister	Tool	Neuralynx Inc.	Tetrode Assembly Station	Increases the speed and consistency of tetrode fabrication.
Silver Paint	Material	GC International	22-023	For connecting the micro-electrode wires of the tetrode to the connector pins (see Discussion)
X-Acto Knife Handle	Material	MSC Direct	X3001	For constructing a micro-drive holding device.
26 Pin, 2 Row Connector	Material	Mill-Max	852-10-026-30-001000	For constructing a micro-drive holding device.