Summary
Мы описываем валового рассечение желудка американский омар (
Abstract
Желудке американский омар (
Protocol
- До вскрытия омар должен быть похоронен во льду в течение 30 минут, чтобы обезболить животное.
- Пол омара можно определить, глядя на форму первого swimmeret. Мужчины имеют Boney swimmerets и самки имеют пернатых swimmerets.
- Изолировать головогруди.
- Используйте вращательным движением сорвать передние когти.
- Удалить живота (хвостовой части) с помощью больших ножниц, чтобы сделать глубокий разрез между головогрудь и брюшко. Это сокращает гигантские массивы волокна контроля хвост флип ответ. Затем переходите к отрезали живота.
- Удалить антенны путем обрезки их с ножницами, и откручивать ног и третий максиллопедов.
- Удалите панцирь по всему животу, (т.е. руководитель области между шейки паз и трибуны).
- Начиная с бокового края этого раздела используются rongeurs и шпателя тщательно удалить жесткий панцирь, оставив красноватыми основной гиподермы нетронутыми. Шпателем полезно для разделения слоев, так что панцирь может быть прерван с rongeurs.
- Перемещение в сторону глаза, вы найдете двусторонних слегка кальцинированная небольшие пластинки овальной формы (IIIa косточек). Как можно ближе к этим косточек, тщательно отделить мышцу от косточек используя небольшие ножницы.
- Использование шпателя и rongeurs удалить из панциря между глазами и хвостовой части (примерно 1 сантиметр) трибуны.
- Отсоедините лица (региона, включая глаза, и трибуны).
- Использование маленькие ножницы сделать горизонтальный разрез по наиболее ростральной подвергаются ткани в трибуну для отсоединения его от экзоскелет. Затем с помощью ножниц края и / или шпателя тщательно рулон ткани каудально, просто мимо уровня IIIa косточек.
- Начиная со спинки, использовать маленькие ножницы, чтобы отделить оставшиеся ткани с лица экзоскелет. Вырезать как можно ближе к жестким панцирем, как возможно, останавливаясь, когда вы рядом с центром и крепления рот.
- С вентральной челюсти должны быть легко видимы. Отсоедините оставшиеся максиллопедов.
- Найдите мягкие губы под челюстями.
- Сделать боковые разрезы отделить лицо, сохраняя при этом губы прилагается к животу. (Существует слегка изогнутые голубовато внешней части рта, которые могут использоваться в качестве руководства.)
- Отсоединения и удаления желудка.
- Держите омаров в ладонь, брюшная сторона и так, что передний конец в сторону локтя.
- Прикрепите к кровоостанавливающего губы и пусть гравитационное притяжение кровоостанавливающего и губ вниз и в сторону от брюшной стенки тела.
- Использование небольших ножниц вырезали челюстями.
- Найдите спинной стороне брюшной стенки тела, которое образует твердое «полка» вентральнее губы и желудка. Вырезать чуть ниже "полки", очень близко к телу стены, по всей медиальной-боковой линии. Всей брюшной стороне живота теперь должен быть отделен от стенки тела.
- Включите омаров, так что спинной стороны вверх. Вырезать по ростральной края шейки паз, где панцирь был удален, и осторожно тянет живот.
- Отключите лишние кишечнике, которые остаются прикрепленными к животу.
- Открытый живот, и подготовить его к пиннинга.
- Держите живот в ладони с гиподермы стороной вниз. Кровоостанавливающего все равно должны быть прикреплены к губе и должен находиться между пальцами.
- Использовать маленькие ножницы, чтобы сделать мелкие передней к задней вырезанные из ротового отверстия (ниже губы) вниз через брюшной стороне привратника.
- Для дальнейшего открытым живот, сделать двумя боковыми разрезами вдоль косточки, проходящий через центр живота.
- Холодный солевой могут вылить в живот, чтобы улучшить видимость и изгнать содержимое желудка.
- В целях обеспечения подготовки к лежали в анатомическом театре блюдо использовать маленькие ножницы для обрезки три желудка зубов.
- Pin желудка вниз в рассечение блюдо.
- Место желудка, подкожную клетчатку, стороной вверх, в заполненные физиологическим раствором рассечение блюдо.
- Место насекомых контактов на губе и четыре угла создается, когда живот был открыт. Для передних углах места контакта высокие и близко к краю, а не мешать спаечный ганглиев или хуже пищевода нервы. Для задних углах места контакта чуть выше, чтобы не потревожить пилорического мышц расширитель.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
В нашей лаборатории вскрытия омара желудка делается для доступа стоматогастральных нервной системы, сети, которая управляет ритмических сокращений желудка. Анатомия желудка омара была хорошо описана ранее 5-7, и мы рекомендуем на изучение его анатомии. Это позволит снизить риск повреждения тонких нервов и мышц.
По окончании вскрытия живота, различные части ст. может быть еще более расчленены. Например, для исследования нервно-мышечной переходов, один из нервов ст. и иннервирует мышцы это может быть изолирован. Somata нейронов в стомато ганглия может быть доступна для записи или молекулярных работы, изолируя стоматогастральных ганглия. Рассечение ст., в том числе стоматогастральных ганглии и нервы, была зарегистрирована в спутник Юпитера статьи 4.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Acknowledgments
Мы хотели бы поблагодарить нашего консультанта, доктора Евы Мардер. Это исследование было поддержано Национальным институтом здравоохранения грантов NS17813 Еве Мардер и NS059255 А. Е. Т.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Homarus americanus | Commercial Lobster | Can be purchased from any lobster supplier, We specifically request chicken” lobsters. | |
| Black Sylgard 170 | Dow Corning | 170 | |
| Preparation Dish | Fisher Scientific | 08-807 | Fill 2" with Black Sylgard 170. |
| Fine Scissors | Fine Science Tools | 14090-09 | |
| Insect Pins size 6 | Fine Science Tools | 26000-65 | |
| Mayo Scissors | This is a common product offered by many suppliers of dissecting tools. | ||
| Micro-Spatula | WARD’s Natural Science | 15 V 4313 | This is a very common product offered by many suppliers of lab tools. |
| Rongeurs | Fine Science Tools | 16000-14 | |
| Plastic hemostat | This is a common product offered by many suppliers of dissecting or jewelry making tools. |
References
- Marder, E., Bucher, D. Central pattern generators and the control of rhythmic movements. Curr. Biol. 11, R986-R996 (2001).
- Nusbaum, M. P., Beenhakker, M. P. A small-systems approach to motor pattern generation. Nature. 417, 343-350 (2002).
- Clemens, S., Massabuau, J. C., Legeay, A., Meyrand, P., Simmers, J. In vivo modulation of interacting central pattern generators in lobster stomatogastric ganglion: influence of feeding and partial pressure of oxygen. J. Neurosci. 18, 2788-2799 (1998).
- Tobin, A. E., Bierman, H. S. Homarus americanus stomatogastric nervous system dissection. J Vis Exp. 27, (2009).
- Maynard, D. M., Dando, M. R. The structure of the stomatogastric neuromuscular system in Callinectes sapidus, Homarus Americanus and Panulirus argus (Decapoda crustacean). Philos. Trans. R. Soc. Lond. B Biol. Sci. 268, 161-220 (1974).
- Herrick, F. H. Natural history of the American Lobster. U.S. Bur. Fish. , 219-252 (1909).
- Marder, E., Bucher, D. Understanding circuit dynamics using the stomatogastric nervous system of lobsters and crabs. Annu. Rev. Physiol. 69, 291-316 (2007).
