Summary
وصفنا تشريح الإجمالي المعدة للجراد الأمريكي (
Abstract
المعدة للجراد الأمريكي (
Protocol
- وينبغي قبل أن يدفن في تشريح جراد البحر في الثلج لمدة 30 دقيقة لتخدير الحيوانات.
- يمكن تحديد جنس جراد البحر من خلال النظر في شكل swimmeret الأولى. ذكور swimmerets بوني والاناث swimmerets ريشي.
- عزل cephalothorax.
- تستخدم حركة اللف أن راوغ مخالب الجبهة.
- إزالة البطن (جزء الذيل) باستخدام مقص كبير لاجراء خفض عميق بين cephalothorax والبطن. هذه التخفيضات على مساحات الألياف العملاقة السيطرة على استجابة الذيل الوجه. ثم تمضي لقطع البطن.
- إزالة الهوائيات التي التشذيب أجبرتها على الفرار مع مقص ، وتطور قبالة الساقين وmaxillipeds الثالثة.
- إزالة درع من حول المعدة (أي منطقة الرأس بين الأخدود عنق الرحم والمنبر).
- ابتداء من الحافة الجانبية لهذا القسم وrongeurs استخدام ملعقة لإزالة بعناية درع الثابت ، في حين ترك المحمر اللحمة الأساسية سليمة. ملوق مفيد لفصل طبقات بحيث يمكن تقسيم درع قبالة مع rongeurs.
- تتجه أنظار تجد الثنائية متكلسة طفيفة لوحات صغيرة بيضاوية (العظيمات الثالث ألف). أقرب وقت ممكن لهذه العظيمات ، فصل بعناية العضلات من عظيمات باستخدام مقص صغير.
- استخدام ملعقة وإزالة rongeurs درع من بين عينيه ، وجزء الذيل (حوالي 1 سنتيمتر) من المنصة.
- فصل الوجه (بما في ذلك منطقة العينين ، والمنصة).
- باستخدام مقص صغير اجراء خفض أفقية عبر نسيج معظم منقاري كشفها في المنصة لسلخه من الهيكل الخارجي. ثم استخدم حافة مقص و / أو ملعقة للفة الأنسجة caudally بعناية ، تماما الماضية مستوى الثالث ألف العظيمات.
- بدءا ظهريا ، واستخدام مقص صغير لفصل الأنسجة المتبقية من الهيكل الخارجي الوجه. قطع أقرب إلى درع الثابت ممكن ، ووقف عند الاقتراب من المركز ، والحجز على الفم.
- من طريقة العرض بطني ينبغي أن تكون مرئية بسهولة mandibles. فصل maxillipeds المتبقية.
- تحديد الشفاه الناعمة تحت mandibles.
- جعل التخفيضات الوحشي لفصل الوجه مع الحفاظ على الشفاه التي تعلق على المعدة. (هناك منحني قليلا مزرق جزء الفم الخارجي الذي يمكن استخدامه كدليل.)
- فصل وإزالة المعدة.
- عقد جراد البحر في راحة يدك ، حتى الجانب البطني ، وحتى نهاية الأمامي هو نحو مرفقك.
- إرفاق مرقئ للشفة وترك الجاذبية سحب مرقئ وأسفل الشفة وبعيدا عن الجدار البطني الجسم.
- باستخدام مقص صغير قطع mandibles.
- حدد الجانب الظهري من الجدار البطني الجسم ، والتي تشكل الثابت "الرف" لبطني الشفة والمعدة. قص أسفل "الرف" ، قريبة جدا من جدار الجسم ، وعبر خط الوسط الإنسي الوحشي - بأكملها. وينبغي الآن على الجانب البطني كامل المعدة تكون منفصلة عن جدار الجسم.
- تحويل جراد البحر بحيث تصل الجانب الظهري. قطع على طول حافة المنقاري لتلم عنق الرحم ، حيث تمت إزالة درع ، وتسحب برفق خارج المعدة.
- أي فصل الأمعاء الزائدة التي لا تزال تعلق على المعدة.
- فتح البطن ، ويكون جاهزا لتعلق.
- الاستمرار على المعدة في كف يدك مع اللحمة جنبا إلى أسفل. وينبغي أن يكون لا يزال مرقئ تعلق على الشفاه ، وينبغي أن تقع بين أصابعك.
- استخدام مقص صغير لجعل الضحلة الأمامي إلى الخلفي قطع من فتح الفم (تحت الشفة) وضعت من خلال الجانب البطني للبواب.
- لمزيد من فتح البطن ، وجعل اثنين من التخفيضات على طول جانبي العظيمات يمر عبر وسط المعدة.
- قد تدفقت المياه المالحة الباردة الى المعدة لتحسين الرؤية وطرد محتويات المعدة.
- من أجل إتاحة الفرصة لإعداد لوضع شقة في طبق تشريح استخدام مقص صغير لتقليم أسنان three المعدة.
- دبوس أسفل المعدة في طبق تشريح.
- مكان المعدة ، واللحمة من جانب ما يصل ، في طبق تشريح مليئة المالحة.
- دبابيس الحشرات في مكان الشفة والزوايا الأربع إنشاؤه عندما افتتح المعدة أعلى. لزوايا الأمامي دبابيس مكان مرتفع وعلى مقربة من الحافة ، وحتى لا تعكر صفو العقد صواري أو الأعصاب المريء السفلي. دبابيس الخلفي للمكان زوايا عالية قليلا حتى لا تعكر صفو العضلات موسع البواب.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
في تشريح مختبرنا المعدة جراد البحر ويتم الوصول إلى نظام فموي معدي العصبي ، وهو الذي يتحكم في الشبكة الانقباضات الإيقاعية المعدة. وقد تم تشريح المعدة جراد البحر وصفا جيدا في السابق 5-7 ، ونحن نوصي أن تصبح مألوفة مع تشريح لها. وبذلك تقلل من خطر تلف الأعصاب والعضلات الدقيقة.
عند الانتهاء من تشريح المعدة ، قد أجزاء مختلفة من STNS مزيد من تشريح. على سبيل المثال لدراسة التقاطعات العصبية والعضلية ، واحدة من STNS الأعصاب ويمكن عزل هذا يعصب العضلات. ويمكن الوصول إلى somata من الخلايا العصبية في عقدة فموي معدي للتسجيلات أو العمل من خلال عزل الجزيئية العقدة فموي معدي. وقد وثقت تشريح STNS ، بما في ذلك عقدة فموي معدي والأعصاب ، إن الرب في رفيق المادة 4.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Acknowledgments
نود أن نعترف مستشار لدينا ، والدكتور حواء ماردر. وأيد هذا البحث من قبل المعهد الوطني للصحة منح NS17813 ماردر لحواء وNS059255 إلى T. AE
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Homarus americanus | Commercial Lobster | Can be purchased from any lobster supplier, We specifically request chicken” lobsters. | |
| Black Sylgard 170 | Dow Corning | 170 | |
| Preparation Dish | Fisher Scientific | 08-807 | Fill 2" with Black Sylgard 170. |
| Fine Scissors | Fine Science Tools | 14090-09 | |
| Insect Pins size 6 | Fine Science Tools | 26000-65 | |
| Mayo Scissors | This is a common product offered by many suppliers of dissecting tools. | ||
| Micro-Spatula | WARD’s Natural Science | 15 V 4313 | This is a very common product offered by many suppliers of lab tools. |
| Rongeurs | Fine Science Tools | 16000-14 | |
| Plastic hemostat | This is a common product offered by many suppliers of dissecting or jewelry making tools. |
References
- Marder, E., Bucher, D. Central pattern generators and the control of rhythmic movements. Curr. Biol. 11, R986-R996 (2001).
- Nusbaum, M. P., Beenhakker, M. P. A small-systems approach to motor pattern generation. Nature. 417, 343-350 (2002).
- Clemens, S., Massabuau, J. C., Legeay, A., Meyrand, P., Simmers, J. In vivo modulation of interacting central pattern generators in lobster stomatogastric ganglion: influence of feeding and partial pressure of oxygen. J. Neurosci. 18, 2788-2799 (1998).
- Tobin, A. E., Bierman, H. S. Homarus americanus stomatogastric nervous system dissection. J Vis Exp. 27, (2009).
- Maynard, D. M., Dando, M. R. The structure of the stomatogastric neuromuscular system in Callinectes sapidus, Homarus Americanus and Panulirus argus (Decapoda crustacean). Philos. Trans. R. Soc. Lond. B Biol. Sci. 268, 161-220 (1974).
- Herrick, F. H. Natural history of the American Lobster. U.S. Bur. Fish. , 219-252 (1909).
- Marder, E., Bucher, D. Understanding circuit dynamics using the stomatogastric nervous system of lobsters and crabs. Annu. Rev. Physiol. 69, 291-316 (2007).
