Summary
我们描述了美国龙虾的胃总值清扫(
Abstract
美国龙虾的胃(
Protocol
- 解剖龙虾之前应埋在冰30分钟,麻醉动物。
- 龙虾的性别可以看的第一个游泳足的形状决定的。的男性boney游泳和女性有羽毛状的游泳。
- 隔离头胸部。
- 使用扭转运动撕掉前爪。
- 取出使用大剪刀头胸部和腹部之间的深切割的腹部(尾部)。这削减巨大的纤维束,控制尾部翻转反应。然后进行切断腹部。
- 拆下天线,他们用剪刀修剪,拧断了腿和第三颚。
- 删除甲壳,来自各地的胃(即头部区域之间的颈槽和主席台)。
- 在本节中使用rongeurs和铲小心地取出硬甲壳的外侧缘开始,而留下的红色的底层皮下组织完好。锅铲是分离层,使背甲可以分解rongeurs。
- 朝着你的眼睛找到双边轻轻钙化椭圆形的小板(IIIA听小骨)。尽可能地接近这些小骨,仔细分离听小骨的肌肉,用小剪刀。
- 使用抹刀和rongeurs删除从两眼之间的甲壳和尾部分(约1厘米)的讲台上。
- 分离面(地区包括眼睛,和主席台)。
- 使用小剪刀,在讲台上的横向切横跨最暴露延髓组织脱离的外骨骼。然后用剪刀和/或刮刀边缘仔细推出刚刚过去的水平IIIA听小骨,组织尾端。
- 开始背侧,用小剪刀脱离剩余的组织面临的外骨骼。剪切尽可能接近尽可能的硬甲壳,停止当你口附近的中心和附件。
- 从腹面观的下颚骨应该是很容易看到。分离剩余的颚。
- 下找到的下颚骨软唇。
- 设为横向切割分离的脸,同时保持连接到胃唇。 (有一个稍微弯曲的蓝外口部分,可作为指导使用。)
- 分离并取出胃。
- 握住你的手的手掌,腹朝上,使前结束向你的胳膊肘是龙虾。
- 将止血钳唇,让引力止血和唇和腹侧体壁。
- 用小剪刀切出的下颌骨。
- 找到腹侧体壁,形成硬的“架子”腹侧唇和胃背侧。切的正下方的“架子”,非常接近的体壁,整个内侧外侧中线。整个胃腹方现在应该从体壁分离。
- 将龙虾使背侧。沿甲壳被删除,颈沟,喙的边缘剪下,轻轻拉的肚子。
- 分离任何额外的肠子,胃保持连接。
- 打开胃,并准备为寄托。
- 在你的手与皮下组织的一面朝下的手掌按住肚子。止血应附唇,应该在于你的手指之间。
- 用小剪刀张口(以下唇)通过幽门的腹侧方从一个浅前房后切。
- 要进一步开放胃,使两个沿外侧的整个胃的中心运行的听小骨削减。
- 冷盐水,可灌入胃部,以提高知名度,排出胃内容物。
- 为了让躺在解剖盘平坦准备用小剪刀修剪的三个胃牙。
- 引脚的胃在解剖盘。
- 将胃,皮下组织的一面朝上,在生理盐水填充的夹层菜。
- 将昆虫引脚在唇和创建四个角落时,胃被打通。对于地方引脚的高,靠近边缘的前角落,不要去打扰连合神经节或下食道的神经。对于后的角落的地方引脚稍高不要去打扰幽门扩张肌肉。
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Discussion
在我们的龙虾胃清扫实验室做访问stomatogastric的神经系统,网络控制胃的节律性收缩。龙虾胃的解剖结构已经得到了很好的描述以前5-7,我们建议变得熟悉其解剖。这样做会破坏脆弱的神经和肌肉的风险降低。
胃清扫完成后,各个部分的STNS可能进一步解剖。例如,研究神经肌肉交界处,STNS神经,它支配的肌肉可能会被孤立。在stomatogastric神经节神经元的somata可以访问隔离stomatogastric节录音或分子的工作。解剖STNS,包括stomatogastric神经节和神经,在同伴的Jove第4条已被记录。
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Acknowledgments
我们要感谢我们的顾问,博士除夕黄鼠狼。这项研究是由国家卫生赠款NS17813前夕黄鼠狼和NS059255研究所的支持曝光T。
Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Homarus americanus | Commercial Lobster | Can be purchased from any lobster supplier, We specifically request chicken” lobsters. | |
Black Sylgard 170 | Dow Corning | 170 | |
Preparation Dish | Fisher Scientific | 08-807 | Fill 2" with Black Sylgard 170. |
Fine Scissors | Fine Science Tools | 14090-09 | |
Insect Pins size 6 | Fine Science Tools | 26000-65 | |
Mayo Scissors | This is a common product offered by many suppliers of dissecting tools. | ||
Micro-Spatula | WARD’s Natural Science | 15 V 4313 | This is a very common product offered by many suppliers of lab tools. |
Rongeurs | Fine Science Tools | 16000-14 | |
Plastic hemostat | This is a common product offered by many suppliers of dissecting or jewelry making tools. |
References
- Marder, E., Bucher, D. Central pattern generators and the control of rhythmic movements. Curr. Biol. 11, R986-R996 (2001).
- Nusbaum, M. P., Beenhakker, M. P. A small-systems approach to motor pattern generation. Nature. 417, 343-350 (2002).
- Clemens, S., Massabuau, J. C., Legeay, A., Meyrand, P., Simmers, J. In vivo modulation of interacting central pattern generators in lobster stomatogastric ganglion: influence of feeding and partial pressure of oxygen. J. Neurosci. 18, 2788-2799 (1998).
- Tobin, A. E., Bierman, H. S. Homarus americanus stomatogastric nervous system dissection. J Vis Exp. 27, (2009).
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- Marder, E., Bucher, D. Understanding circuit dynamics using the stomatogastric nervous system of lobsters and crabs. Annu. Rev. Physiol. 69, 291-316 (2007).