Summary
우리는 미국의 바닷가재의 뱃속의 총 절개를 설명 (
Abstract
미국의 바닷가재의 위 (
Protocol
- 절개 전에 바닷가재는 동물을 마취 30 분 얼음에 묻혀 있어야합니다.
- 바닷가재의 성별은 첫 번째 swimmeret의 모양을보고 결정하실 수 있습니다. 수컷은 보니의 swimmerets을 가지고 있고 암컷은 깃털 swimmerets 있습니다.
- cephalothorax을 분리.
- 앞 발톱을 벗어 버리고 왜곡 움직임을 사용합니다.
- cephalothorax과 복부 사이에 깊은 상처를 만들기 위해 큰 가위를 사용하여 복부 (꼬리 부분)을 제거합니다. 이것은 꼬리 플립 응답을 제어하는 거대한 섬유 책자를 삭감. 다음 복부를 잘라 진행합니다.
- 가위로 그들을 트리밍하여 안테나를 제거하고, 다리와 세 번째 maxillipeds를 비틀어.
- (자궁 경부 홈과 연단 사이에 머리 지역 IE), 복부 주변의 등딱지를 제거합니다.
- 붉은 기본 hypodermis은 그대로 둔 반면,이 섹션을 사용 rongeurs 조심스럽게 하드 등딱지를 제거 주걱의 측면 가장자리에 시작. 주걱은 등딱지이 rongeurs로 부러 수 있도록 레이어를 분리하는 데 유용합니다.
- 당신이 양자 가볍게 calcified 작은 타원형 접시 (IIIa ossicles)를 찾아서 눈을 향해 이동. 가까운 가능한 이러한 ossicles만큼, 신중하게 작은 가위를 사용하여 ossicles에서 근육을 분리합니다.
- 주걱과 rongeurs를 사용하면 연단의 눈을과 꼬리 부분 (약 1cm) 사이에서 등딱지를 제거합니다.
- 얼굴 (눈 포함한 지역 및 연단) 분리.
- 작은 가위를 사용하면 연단에서 가장 주동이의 노출된 조직에 걸쳐 수평 상처가 외골격에서 분리합니다. 그런 다음 조심스럽게 단지 IIIa ossicles의 수준 과거 caudally 조직을 롤 가위 및 / 또는 주걱의 가장자리를 사용합니다.
- dorsally부터 얼굴 외골격 남아 조직을 분리하는 작은 가위를 사용합니다. 당신이 입의 중심 첨부 근처에 도착하면 중지, 가능한 하드 등딱지 가까운 잘라.
- 복부보기에서 mandibles 쉽게 표시해야합니다. 남은 maxillipeds를 분리합니다.
- mandibles 아래의 부드러운 입술을 찾습니다.
- 복부에 붙어있는 입술을 유지하면서 얼굴을 분리하기 위해 측면 상처를 확인하십시오. (가이드로 사용할 수있는 약간 푸른빛이 도는 곡면 바깥쪽 입 부분이 있습니다.)
- 위를 분리하고 제거합니다.
- 손을 최대 그래서 앞쪽에 끝이 팔꿈치 방향입니다 복부 쪽의 손바닥에있는 가재 잡고.
- 입술에 hemostat를 첨부하고 중력이 복부 바디 벽에서 hemostat과 입술을 아래로 당겨 멀리하자.
- 작은 가위를 사용하면 mandibles을 잘라 버릴거야.
- 입술과 위장 복부 하드 "선반"을 형성 복부 신체 벽의 지느러미 측면을 찾습니다. 단지 "선반"아래 잘라 아주 전체 중간 - 측면 정중선을 넘어 신체 벽에 가까운 거리에 있습니다. 복부의 전체 복부 측면 이제 바디 벽에서 분리해야합니다.
- 등의 측면가되도록 바닷가재를 켭니다. 등딱지가 제거된 자궁 홈,의 주동이의 가장자리 잘라 가볍게 복부를 추출합니다.
- 위장에 연결된 남아있는 여분의 창자를 분리합니다.
- 위를 열고 걸어 위해 준비합니다.
- 아래 hypodermis 쪽과 손바닥에 배를 잡고. hemostat 여전히 입술에 연결되어 있어야하고 손가락 사이에 거짓말을해야합니다.
- 아래 pylorus의 복부 측면을 통해 입 오프닝 (입술 아래)에서 얕은 앞쪽에 - 투 - 후부 상처를 만들기 위해 작은 가위를 사용합니다.
- 추가로 위를 열려면, 복부의 중심에 걸쳐 실행 ossicles 두명 측면 인하합니다.
- 콜드 호수는 가시성을 개선하고 위 내용을 추방하기 위해 위장으로 부어있을 수 있습니다.
- 해부 접시에 평평하다에 대한 준비가 세 위의 치아를 장식하는 작은 가위를 사용하도록하기 위해서.
- 해부 접시에서 위 아래로 핀.
- 호수 - 채워진 해부 접시에서 위, hypodermis 쪽 올려 놓으십시오.
- 곤충의 입술에 핀 및 위가 입을 열었다 때 만든 네 모퉁이를 놓습니다. 장소 핀 높고 가장자리에 가까운 앞쪽에 모서리 들어, 같은 commissural 신경 또는 하부 oesophageal 신경을 방해하지 않습니다. pyloric 확장시키는 근육을 방해하지 않기로 약간 높은 뒷부분 모서리 플레이스 핀하십시오.
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Discussion
랍스터 위 우리의 실험실 해부에서 stomatogastric 신경계, 위장의 리듬 수축을 제어 네트워크를 액세스하기위한 것입니다. 랍스터 위장의 해부 잘 이전에 5-7 설명하고 있으며, 우리는 해부학에 익숙한되고 좋습니다. 이렇게하면 섬세한 신경 및 근육 손상의 위험을 줄일 수 있습니다.
위 절개 완료되면, STNS의 다양한 부분 추가를 해부 수 있습니다. 예를 들어 신경근육학 분기점, STNS의 신경 중 하나를 연구하고 innervates 근육이 격리 수 있습니다. stomatogastric 신경절에서 뉴런의 somata는 stomatogastric 신경을 분리하여 레코딩 또는 분자 작업에 액세스할 수 있습니다. stomatogastric 신경절 및 신경을 포함한 STNS,의 해부는 동반자 조브 제 4에 설명되어 있습니다.
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Acknowledgments
우리는 고문, 박사 이브 Marder을 인정하고 싶습니다. 이 연구는 AE T.에 이브 Marder와 NS059255에 건강 보조금 NS17813 국립 연구소에 의해 지원되었다
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Homarus americanus | Commercial Lobster | Can be purchased from any lobster supplier, We specifically request chicken” lobsters. | |
| Black Sylgard 170 | Dow Corning | 170 | |
| Preparation Dish | Fisher Scientific | 08-807 | Fill 2" with Black Sylgard 170. |
| Fine Scissors | Fine Science Tools | 14090-09 | |
| Insect Pins size 6 | Fine Science Tools | 26000-65 | |
| Mayo Scissors | This is a common product offered by many suppliers of dissecting tools. | ||
| Micro-Spatula | WARD’s Natural Science | 15 V 4313 | This is a very common product offered by many suppliers of lab tools. |
| Rongeurs | Fine Science Tools | 16000-14 | |
| Plastic hemostat | This is a common product offered by many suppliers of dissecting or jewelry making tools. |
References
- Marder, E., Bucher, D. Central pattern generators and the control of rhythmic movements. Curr. Biol. 11, R986-R996 (2001).
- Nusbaum, M. P., Beenhakker, M. P. A small-systems approach to motor pattern generation. Nature. 417, 343-350 (2002).
- Clemens, S., Massabuau, J. C., Legeay, A., Meyrand, P., Simmers, J. In vivo modulation of interacting central pattern generators in lobster stomatogastric ganglion: influence of feeding and partial pressure of oxygen. J. Neurosci. 18, 2788-2799 (1998).
- Tobin, A. E., Bierman, H. S. Homarus americanus stomatogastric nervous system dissection. J Vis Exp. 27, (2009).
- Maynard, D. M., Dando, M. R. The structure of the stomatogastric neuromuscular system in Callinectes sapidus, Homarus Americanus and Panulirus argus (Decapoda crustacean). Philos. Trans. R. Soc. Lond. B Biol. Sci. 268, 161-220 (1974).
- Herrick, F. H. Natural history of the American Lobster. U.S. Bur. Fish. , 219-252 (1909).
- Marder, E., Bucher, D. Understanding circuit dynamics using the stomatogastric nervous system of lobsters and crabs. Annu. Rev. Physiol. 69, 291-316 (2007).
