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Biology

Gross Dissection der Magen der Lobster, Homarus americanus Published: May 22, 2009 doi: 10.3791/1320

Summary

Wir beschreiben die grobe Zerlegung der Magen des amerikanischen Hummer (

Abstract

Der Magen des amerikanischen Hummer (

Protocol

  1. Vor Dissektion der Hummer sollte in Eis für 30 Minuten, um das Tier zu betäuben begraben werden.
  2. Das Geschlecht der Hummer kann, indem man die Form der ersten swimmeret bestimmt werden. Männer haben boney swimmerets und Weibchen haben gefiederte swimmerets.
  3. Isolieren Sie die Cephalothorax.
    1. Verwenden Sie eine Drehbewegung Abzocke der vorderen Krallen.
    2. Entfernen Sie den Bauch (Schwanz Teil) durch die große Schere, um einen tiefen Einschnitt zwischen dem Cephalothorax und Bauch zu machen. Dies reduziert den riesigen Faserbahnen Steuerung der Schwanz Flip Antwort. Dann gehen Sie zum Abschalten des Bauches.
    3. Entfernen Sie den Antennen durch Trimmen sie mit einer Schere, und drehen Sie die Beine und den dritten Maxillipeden.
  4. Entfernen Sie den Panzer aus der ganzen Magen, (dh der Kopfbereich zwischen der Hals-Nut und der Tribüne).
    1. Ab dem seitlichen Rand dieses Abschnitts verwenden Rongeure und Spachtel vorsichtig die harte Schale, während die rötlichen zugrunde liegenden Unterhaut intakt. Der Spatel ist nützlich für die Trennung der Schichten, so dass der Panzer kann mit der Rongeure gebrochen werden.
    2. Verschieben in Richtung der Augen finden Sie bilateralen leicht verkalkte kleine ovale Platten (IIIa Gehörknöchelchen). So nah wie möglich an diese Knöchelchen vorsichtig lösen, die Muskulatur von der Gehörknöchelchen mit dem kleinen Schere.
    3. Mit Spachtel und Rongeure entfernen Panzerlänge von zwischen den Augen und der kaudale Teil (ca. 1 cm) von der Tribüne.
  5. Trennen Sie das Gesicht (Region, einschließlich Augen und Rostrum).
    1. Mit einer kleinen Schere einen horizontalen Schnitt durch den rostralen freiliegende Gewebe in der Tribüne, um sie aus dem Exoskelett zu trennen. Dann nutzen Rand Schere und / oder Spachtel vorsichtig rollen Gewebe kaudal, gleich hinter dem Niveau des IIIa Gehörknöchelchen.
    2. Ab dorsal, verwenden Sie eine kleine Schere, um die verbleibenden Gewebes aus dem Gesicht Exoskelett zu trennen. Cut, wie der harte Panzer wie möglich zu schließen, zu stoppen, wenn Sie nahe dem Zentrum und Befestigung der Mund zu bekommen.
    3. Von ventral der Unterkiefer sollte gut sichtbar sein. Lösen Sie verbleibende Maxillipeden.
    4. Suchen Sie weichen Lippe unter dem Unterkiefer.
    5. Machen seitliche Schnitte, um das Gesicht zu lösen, während die Lippe an den Magen. (Es gibt eine leicht gebogene bläulichen äußeren Maulteil, das als Leitfaden genutzt werden kann.)
  6. Lösen und entfernen Sie den Magen.
    1. Halten Sie den Hummer in die Handfläche, Bauchseite nach oben und so, dass das vordere Ende in Richtung Ellbogen ist.
    2. Bringen Sie einen hemostat auf die Lippe und lassen Sie die Schwerkraft ziehen Sie die hemostat und Lippe nach unten und weg von der ventralen Körperwand.
    3. Mit einer kleinen Schere ausschneiden Mandibeln.
    4. Suchen Sie die Rückenseite des ventralen Körperwand, die eine harte "Regal" ventral Lippe und des Magens bildet. Kurz unterhalb der "Stange", ganz in die Wand des Körpers zu schließen, über die gesamte medial-lateralen Mittellinie. Die gesamte Bauchseite des Magens sollte nun aus dem Körper Wand abgenommen werden.
    5. Drehen Sie den Hummer, so dass die dorsale Seite nach oben zeigt. Schneiden Sie entlang der rostralen Rand des zervikalen Nut, wo der Panzer entfernt wurde, und sanft zieht den Magen aus.
    6. Trennen Sie alle zusätzlichen Därme, die den Magen verbunden bleiben.
  7. Öffnen Sie den Magen, und bereiten sie für Pinning.
    1. Halten Sie den Bauch in die Handfläche mit der Unterhaut-Seite nach unten. Die hemostat sollte noch an der Lippe befestigt werden und sollte zwischen den Fingern zu liegen.
    2. Verwenden Sie eine kleine Schere, um eine flache anterior-to-posterioren Schnitt von der Mundöffnung (unter der Lippe) nach unten durch die Bauchseite des Pylorus zu machen.
    3. Um weiter zu öffnen den Magen, machen zwei seitliche Schnitte entlang der Gehörknöchelchen quer durch das Zentrum des Magens.
    4. Kalter Kochsalzlösung kann in den Magen gegossen werden, um die Sichtbarkeit zu verbessern und zu vertreiben Mageninhalt.
    5. Damit die Vorbereitung zu legen in der Anatomie Teller flach mit dem kleinen Schere, um die drei Magen Zähne zu trimmen.
  8. Pin den Magen hinunter in die Dissektion Gericht.
    1. Setzen Sie den Magen, Unterhaut-Seite nach oben in einer Kochsalzlösung gefüllte Dissektion Gericht.
    2. Legen Sie Insektennadeln an der Lippe und den vier Ecken erstellt werden, wenn der Magen eröffnet. Für die vorderen Ecken Platz Pins hoch und nahe an den Rand, nicht zu stören kommissuralen Ganglien oder minderwertig ösophagealen Nerven. Für die hinteren Ecken Platz Stifte etwas zu hoch, um nicht die Pylorus Dilatator Muskel zu stören.

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Discussion

In unserem Labor Dissektion der Hummer Magen geschieht, um die stomatogastrischen Nervensystem, ein Netzwerk, das die rhythmischen Kontraktionen des Magens steuert den Zugriff. Die Anatomie der Hummer Magen wurde auch vorher 5-7, beschrieben und wir empfehlen vertraut zu machen mit ihrer Anatomie. Dadurch verringert sich die Gefahr einer Beschädigung der empfindlichen Nerven-und Muskelzellen.

Nach Abschluss des Magens Dissektion können verschiedene Teile des Tln weiter zerlegt. Zum Beispiel zu studieren neuromuskulären Verbindungen, einer der Tln die Nerven und die Muskeln ihm innervierten isoliert werden kann. Die Somata der Neuronen in der stomatogastrischen Ganglion kann für Aufnahmen oder molekulare Arbeit durch die Isolation des stomatogastrischen Ganglion zugegriffen werden. Die Zerlegung der Tln, einschließlich der stomatogastrischen Ganglion und Nerven, hat in einem Begleiter JoVE Artikel 4 dokumentiert.

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Acknowledgments

Wir möchten unsere Berater, Dr. Eva Marder erkennen. Diese Arbeit wurde vom National Institute of Health gewährt NS17813 zu Eva Marder und NS059255 zu AE T. unterstützt

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Homarus americanus Commercial Lobster Can be purchased from any lobster supplier, We specifically request chicken” lobsters.
Black Sylgard 170 Dow Corning 170
Preparation Dish Fisher Scientific 08-807 Fill 2" with Black Sylgard 170.
Fine Scissors Fine Science Tools 14090-09
Insect Pins size 6 Fine Science Tools 26000-65
Mayo Scissors This is a common product offered by many suppliers of dissecting tools.
Micro-Spatula WARD’s Natural Science 15 V 4313 This is a very common product offered by many suppliers of lab tools.
Rongeurs Fine Science Tools 16000-14
Plastic hemostat This is a common product offered by many suppliers of dissecting or jewelry making tools.

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References

  1. Marder, E., Bucher, D. Central pattern generators and the control of rhythmic movements. Curr. Biol. 11, R986-R996 (2001).
  2. Nusbaum, M. P., Beenhakker, M. P. A small-systems approach to motor pattern generation. Nature. 417, 343-350 (2002).
  3. Clemens, S., Massabuau, J. C., Legeay, A., Meyrand, P., Simmers, J. In vivo modulation of interacting central pattern generators in lobster stomatogastric ganglion: influence of feeding and partial pressure of oxygen. J. Neurosci. 18, 2788-2799 (1998).
  4. Tobin, A. E., Bierman, H. S. Homarus americanus stomatogastric nervous system dissection. J Vis Exp. 27, (2009).
  5. Maynard, D. M., Dando, M. R. The structure of the stomatogastric neuromuscular system in Callinectes sapidus, Homarus Americanus and Panulirus argus (Decapoda crustacean). Philos. Trans. R. Soc. Lond. B Biol. Sci. 268, 161-220 (1974).
  6. Herrick, F. H. Natural history of the American Lobster. U.S. Bur. Fish. , 219-252 (1909).
  7. Marder, E., Bucher, D. Understanding circuit dynamics using the stomatogastric nervous system of lobsters and crabs. Annu. Rev. Physiol. 69, 291-316 (2007).

Tags

Neuroscience Ausgabe 27 Hummer Magen neuronales Netz Dissektion central pattern generator
Gross Dissection der Magen der Lobster,<em> Homarus americanus</em
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Cite this Article

Bierman, H. S., Tobin, A. GrossMore

Bierman, H. S., Tobin, A. Gross Dissection of the Stomach of the Lobster, Homarus Americanus. J. Vis. Exp. (27), e1320, doi:10.3791/1320 (2009).

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