Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Biology

إعداد واستخدام الآفات فانتوم الممارسة التشكيلية الخزعات إبرة الطموح

Published: September 29, 2009 doi: 10.3791/1404

Summary

مزاولة غرامة الخزعات إبرة الطموح (FNAB) من قبل المتدربين تحديا نسبيا ، نظرا لعدم وجود الآفة ، متاحة بسهولة المناسبة. إعداد الآفة الوهمية AV لممارسة الإجراء FNAB والكفاءة اتقان سهلة نسبيا.

Abstract

حاليا ، بما في ذلك العاملين في مجال الصحة المقيمين والزملاء لم يكن لديك نموذج مناسب لممارسة الوهمية غرامة إبرة الخزعة الطموح (FNAB) الداخلي. في الماضي ، فإننا نموذج موحد يتكون من القفازات المطاطية التي تحتوي على كبد الأبقار الطازج لممارسة FNAB. ومع ذلك ، هذا النموذج من الصعب تنظيم وتحضير في وقت قصير ، مع شراء الأبقار الطازج الكبد هو الجانب الأكثر تحديا. معالجة الكبد مع مشاكل التلوث ذات الصلة أيضا بالتعادل كبيرة الى الوراء. بالإضافة إلى ذلك ، وتسرب المواد قفاز إبرة بعد قليل يمر ، وما ينتج عنها من الفوضى.

أنشأنا وسيلة بسيطة لتضمين الرواية قطعة صغيرة من الموز أو النقانق في سيليكون المطاط يسد متاحة تجاريا. هذا النموذج يسمح للاحتفاظ ختم الفراغ والطموح من المواد جزءا لا يتجزأ من العينة ، تشبه إجراء FNAB الفعلي للآفات الشامل السريرية.

يمكن معالجة المواد يستنشق في المركز إبرة مماثلة لعينات تم شراؤها خلال إجراء FNAB الفعلي ، وتسهيل كفاءة إضافية في إعداد تشويه وتلطيخ.

Protocol

  1. إعداد الآفة الوهمية (إعداد الوهمية حوالي 38 إلى 48 ساعة قبل الدورة الفعلية ممارسة الكفاءة FNA (الشكل 1) أو الاستفادة من استعداد لاستخدام "AV فانتوم" من مصدر FNA ، الولايات المتحدة الأمريكية. الآفة الوهمية (المخزنة تحت التبريد دون تجميد) قد أن تظل مستعدة حتى 3 إلى 4 أيام قبل ممارسة الدورة.
  2. FNA ممارسة الكفاءة : على الرغم من أننا أظهرنا الإجراء باستخدام THFV Shidham ل(الحاصدة الأنسجة مع صمام الوظيفية) (FNA المصدر ، الولايات المتحدة) ، قد يتم استخدام أي نظام لممارسة FNA الأخرى (الشكل 2).
  3. نشر وتجهيز نضح على الشرائح الزجاجية (الشكل 3).

المواد المطلوبة

  1. سيليكون المطاط واضح يسد المتاحة في العديد من مخازن تحسين البناء / الوطن. العديد من العلامات التجارية المتاحة بما في ذلك مديرية إدارة السجون ، GETM ، الشيطان الأحمر ، البرق الابيض ، والعلامات التجارية سلسلة المحلية. استخدمنا تشفير مطاط السيليكون ، منتجات البرق الابيض ، كليفلاند ، أوهايو ، الولايات المتحدة الأمريكية ، http://www.wlcaulk.com/products/all_purpose/silicone_rubber/wl09010.html )
  2. السد بندقية
  3. قطعة من ورقة غلاف بلاستيكي (كنا ساران تتشبث التفاف زائد ، والابن جونسون SC المؤتمر الوطني العراقي ، راسين ، ويسكونسن ، الولايات المتحدة الأمريكية http://www.saranbrands.com/plastic-wrap/index.asp
  4. قفازات اللاتكس
  5. الموز واسعة القطر أو السجق.
  6. شركة وقاعدة لوحة مسطحة (حوالي 6 بوصات X 6 بوصة) مصنوعة من مجلس بطاقة سميكة ، لوحة اكريليك ، أو غيرها.
  7. FNA أداء المعدات
    • الإبر تحت الجلد قياس 25
    • Shidham في THFV (أو المكونات الأخرى لأداء FNA)
    • الشرائح الزجاجية
    • تلوين مجموعات

خطوة بخطوة التفاصيل

A. إعداد الآفة الوهمية (إعداد الوهمية 1-2 أيام قبل ممارسة FNA إجادة (الشكل 2) أو الاستفادة من استعداد لاستخدام "AV فانتوم" من مصدر FNA ، الولايات المتحدة الأمريكية.

  1. قطع 6 X 6 حجم شبر من دعم المجلس.
  2. قطع قطعة 2،5 بوصة طويلة من 'الأساسية الآفة الوهمية" (الموز أو النقانق).
  3. طرد 0.5 بوصة طبقة سميكة من يسد على اللوحة الأساسية.
  4. اضغط على "الآفة الأساسية الوهمية" طفيفة في ليسد هذه الطبقة.
  5. إضافة المزيد من يسد على "الآفة الأساسية الوهمية" بحيث يتم تضمين تماما في كومة من يسد دون محاصرة فقاعات الهواء.
  6. تعديل ويسد على شكل "الأساسية الآفة الوهمية" مع اليد القفاز.
  7. تأخذ 6 X 6 بوصة من حجم قطعة غلاف بلاستيكي وتغطي التلة يسد وتعديل سطح التل في التكوين محدبة السلس مع اليد النظيفة القفاز.
  8. السماح للشفاء يسد التل لمدة 6-8 ساعات أطول من الوقت علاج المذكورة بناء على تعليمات المنتج ، (عادة لمدة 24 ساعة) ، في مكان دافئ.
  9. بعد المعالجة ، يجب أن يكون حازما يسد ، ويمكن مقشر التفاف البلاستيك قبالة بسهولة.
  10. الآفة الوهمية FNA مستعدة لاستخدامه لممارسة الإجراء FNA بعد نحو 8 ساعات عند التلة بأكملها قد يسد شفي تماما لمركز يحتوي على "آفة الوهمية الأساسية" (الموز أو النقانق).

باء ممارسة FNA الكفاءة على آفة فانتوم AV.

أي نهج في الحصول على جودة عالية ، وينبغي كافية aspirates FNA مع مسحات نوعية جيدة الخلايا مباشرة العنوان التالي الحرجة نقاط

  1. المقياس على النحو إبرة ضمنية في عنوان الإجراء ، والإبر الدقيقة (عدد أكبر مقياس) العائد أفضل aspirates تمييع الدم مع الحد الأدنى. لتحقيق التوازن الحرج من فوائد وقيود ، ويفضل الإبر قياس 22-25 للاستقرار الميكانيكية الأمثل للإبرة دون التأثير على نوعية نضح FNA.
  2. ضبط تسلسل الملائمة في تطبيق فراغ والإفراج خلال FNA الداخلي ، وهذا أمر بالغ الأهمية من أجل إحراز تقدم في عينات خلايا المخ مع كل من الإبرة ، باتجاه محور الإبرة. ومع ذلك ، لا ينبغي أن يستنشق المواد المسموح به للوصول الى منطقة التجمع إبرة تطلع مع حقنة. إذا لم يمنع ذلك ، فإن هذه المادة قد يكون من الصعب استرداد لصنع المسحات (قد ، ولكن هذه المواد ، يمكن استخدامها لإعداد كتلة الخلية أو لتركيز وسائل مثل Cytospin ، وأساليب التصفية ، أو السائل التحضيرات الأخيرة على علم الخلايا).
  3. تطوير المهارات المناسبة في تجهيز العينة يستنشق ، بما في ذلك إعداد مسحة مباشرة وعلى موقع التقييم كفاية مع triaging المناسبة لاختبارات الثانوية مثل الخلية كتلة انتخابية استعدادا للكيمياء سيتولوجية مناعية ، بالانتخاب التدفق الخلوي ليمفاوية immunophenotyping الآفات ، وتقديم يمر العقيمة لعلم الأحياء المجهرية الدراسات ، وزميلهالريال لاختبارات الجزيئي (علم الوراثة الخلوية ، الخ).

با المسرحية FNA الداخلي (كما هو موضح مع THFV Shidham ل[1] (FNA المصدر ، الولايات المتحدة) ، ولكن يمكن استخدام أي نظام آخر لممارسة FNA). الشكل (3،4،5).

  1. إعداد التجمع FNA مع صمام مغلقة.
  2. تحديد موقع الآفة وادخال ابرة في قمة الآفة.
  3. فتح صمام لتوصيل الفراغ ، من خلال إبرة إلى طرفها ، ونضح المكونات الخلوية ممثل الآفة مع كل من والسكتة الدماغية جيئة وذهابا إلى الآفة.
  4. الحفاظ على مناطق الفراغ وعينة مختلفة من آفة بإدراج الإبرة في الآفة في اتجاهات مختلفة.
  5. إغلاق صمام لقطع فراغ في تجويف الإبرة.
  6. معادلة الضغط مع الظروف المحيطة (مثلا بفصل الحقنة صمام الإبرة من لحظة وجيزة وإعادة الاتصال. إذا تم استخدام جهاز خاص مع الخطوات يحمل في ثناياه عوامل ، مثل 'THFV' ، هذا وغيرها من الخطوات من خلال Ba1 Ba6 ومتضافرة تلقائيا باتباع الخطوات المختلفة في النظام صمام) [1].
  7. إزالة الإبرة من الآفة مع صمام المغلقة ، من أجل الحيلولة دون فقدان للعينة عمل شعري في الآفة إلا إذا كان هناك ضغط سلبي طفيف في نهاية المحور.
  8. إزاحة المحتوى يستنشق على الشريحة الزجاجية للتحضير لطاخة المباشر (أنظر أدناه) (الشكل 6).

ب. تجهيز العينة يستنشق مع الفرز المناسبة
نشر نضح على الشرائح الزجاجية وإعداد مسحات نوعية جيدة المباشرة (الشكل 6) ، يليه تلطيخ السليم والفرز (الشكل 7،8).

  1. وينتشر قطرة نضح فكها على شريحة زجاجية من قبل مجموعة متنوعة من النهج كما هو مبين في الشكل (6) [2]. النهج المعتاد هو "أ". ومع ذلك ، إذا كان عينة دم مع بعض microfragments المخفف ، واستنزفت الدم الزائد بعيدا انزلاق إمالة ، وmicrofragments ثم تنتشر بين هذه الشريحة والثانية شريحة زجاجية مماثلة ل'ا'. إذا نضح هي في الغالب دون تعليق microfragments ، مثل من الآفات يمفاوية ، ينتشر مماثلة إلى 'ب' أو 'ج'.
  2. يمكن تجهيزها مسحات والثابتة في مجموعة متنوعة من الطرق لطرق مختلفة خلال تلطيخ تقييم كفاية في الموقع. ومع ذلك ، فإن أفضل أسلوب هو العمل على الهواء الجاف مسحات جميع. ويمكن لطخات ملطخة الهواء المجفف مع البقع رومانوفسكي (مثل Difff - Quik صمة عار وصمة عار رايت) بعد تثبيت الميثانول أو عنق الرحم مع وصمة عار بعد المالحة والإماهة بعد التثبيت (في الايثانول 95 ٪ أو يفضل في الايثانول 95 ٪ مع 5 حمض الخليك ٪) [3]. القضاء على التدخل بسبب التعتيم الدم هو مكسب كبير [3].
  3. اعتمادا على النتائج التي توصل إليها خلال التقييم الأولي cytomorphologic كفاية في الموقع ، فمن المستحسن الفرز الإضافية (مثل كتلة الخلية الاختيارية ، المجهر الإلكتروني ، والثقافات علم الأحياء المجهرية ، التدفق الخلوي ، علم الوراثة الخلوية الجزيئية اختبارات الخ) كما هو مبين.

ممثل النتائج :

الشكل 1
الرجاء النقر هنا لرؤية نسخة أكبر من الرقم 1 .
الشكل 1. المواد اللازمة لإعداد AV فانتوم لممارسة الكفاءة FNA (* نحن نستخدم ساران الاغطية البلاستيكية التي لم تلتزم يسد في النهاية ، في حين إزالة بعد شفاء كامل من يسد).


الشكل 2
الرجاء النقر هنا لرؤية نسخة أكبر من الشكل 2.
الشكل 2. تحضير آفة فانتوم AV


الشكل 3
الرجاء النقر هنا لرؤية نسخة أكبر من الرقم 3.
الشكل 3. الخطوات الحاسمة في إجراء FNA.


الشكل 4
الرجاء النقر هنا لرؤية نسخة أكبر من الرقم 4.
الشكل 4. مسح العمالة والبطالة ، جبعة ، ملخص الخطوات الحاسمة * (انظر الشكل 3)


الشكل 5
الرجاء النقر هنا لرؤية نسخة أكبر من الرقم 5.
الشكل 5. مطبات المتصلة الخطوات الحاسمة في بروك FNAedure.


الشكل 6
الرجاء النقر هنا لرؤية نسخة أكبر من الرقم 6.
الشكل 6. إعداد مسحات مباشرة من عينة FNA بين اثنين من الشرائح.


الشكل 7
الرجاء النقر هنا لرؤية نسخة أكبر من الرقم 7.
الشكل 7. ويت المسحات ثابتة مقابل الهواء المجفف.


الشكل 8
الرجاء النقر هنا لرؤية نسخة أكبر من الرقم 8.
الشكل 8. ويت المسحات ثابتة مقابل الهواء المجفف.

Discussion

تجرى على نطاق واسع التطلع الخزعات غرامة إبرة (FNAB) كتقنية اقتصادية آمنة ، وسريعة ، مينيملي لتشخيص الأورام الأنسجة المختلفة والآفات. في هذا الإجراء يتم إدخال إبرة قياس 18-27 في الآفة ، انتقل ذهابا وإيابا عدة مرات في مناطق مختلفة من آفة الفراغ تحت رقابة (شفط) من شدة متفاوتة تراوحت بين الحد الأدنى في شكل عمل شعري فقط لحوالي 10 مل الفراغ في حقنة لاسترداد المواد التشخيصية الأنسجة. ويفضل قياس أدق إبرة مع ارتفاع العدد إلى استرداد المواد جيدة للتحضير مسحات الخلايا مباشرة. إبرة أوسع مقياس لل18G باسترداد أكثر عينة مناسبة لكتلة الخلية التدفق الخلوي ، المجهر الإلكتروني ، علم الوراثة الخلوية ، علم الأحياء المجهرية الثقافات الخ على الرغم من أن الإجراء هو بسيط ، والسيطرة على مختلف الخطوات مع التطبيق السليم ، والإفراج عن فراغ في الخطوات المناسبة بطريقة منسقة وحاسمة للغاية من أجل تحقيق النتائج المثلى.

يتم استخدامها بسبب عدم توفر الإبر ذات الإنتاجية العالية المصممة خصيصا ، إبر الحقن التقليدية أو تعديلات لتنفيذ هذا الإجراء. ومع ذلك ، إبر الحقن وقيود كثيرة مما أدى إلى انخفاض العائد من العينة إذا ما استخدمت بطريقة تقليدية. شرط السيطرة حقنة خاصة عادة يضيف إلى تعقيد العملية. وبالتالي ، ونظرا لعدم وجود مناسبة متاحة تجاريا الجهاز إبرة FNAB ، هذا الإجراء تنوعا للغاية تعاني مشكلة متكررة من استرجاع عينة كافية. مؤخرا ، تم الإبلاغ عن جهاز زيادة الغلة مع استنساخ [1].

بالإضافة إلى ذلك ، هناك حاليا هو عدم وجود نموذج مناسب لممارسة الكفاءة في أداء FNAB بواسطة موظفي الصحة في مجال التدريب بما في ذلك المقيمين والزملاء. كان لدينا نموذج موحد مع قطعة من كبد البقر الطازج المحنطة في القفازات المطاطية لممارسة FNAB الكفاءة. ومع ذلك ، هذا النموذج من الصعب تنظيم في مهلة قصيرة. شراء الأبقار الطازج الكبد عادة ما يحد من المأزق. بالإضافة إلى ذلك ، قد يعرض الكبد معالجة التلوث والعوامل المتصلة بالتعادل كبيرة الى الوراء. الميل للالقفازات المطاطية لتسرب بعد يحرك الإبرة قليلة يؤدي الى فوضى محتملة خلال الدورة الممارسة.

ويصف التقرير أننا رواية ولكن طريقة بسيطة لتضمين قطعة صغيرة من الموز (أو النقانق) في سيليكون يسد المطاط متوفرة تجاريا وغيرها من المواد المتاحة بسهولة. شبح FNAB يحتفظ ختم فراغ مما يتيح التطلع من المواد جزءا لا يتجزأ من العينة ، أي ما يعادل FNAB الإجراء الفعلي على الآفة في وضع السريرية. في هذا الفيديو ، ونحن لشرح إجراءات صنع FNAB الوهمية الآفة وممارسة الإجراء FNAB. يدل على ذلك أيضا في معالجة موجز لاسترجاع العينة بما في ذلك إعداد تشويه وتلطيخ [2،3].

لأن يسد يستغرق وقتا طويلا للشفاء ، ينبغي إعداد الآفة الوهمية مقدما حوالي 24 إلى 48 ساعة قبل الدورة ممارسة. ويمكن الحصول على مقارنة جاهزة للاستخدام الآفة الوهمية من مصدر تجاري (FNA المصدر ، الولايات المتحدة).

ويمكن استخدام الآفة الوهمية لممارسة FNAB الكفاءة لتدريب المقيمين والزملاء قبل بداية الأداء FNAB على المرضى في الإعداد السريرية.

References

  1. Shidham, V. B., Pandit, A. W., Rao, R. N., Basir, Z., Shidham, A. Tissue Harvester with Functional Valve (THFV): Shidham's device for reproducibly higher specimen yield by fine needle aspiration biopsy with easy to perform steps. BMC Clinical Pathology. 7 (2), (2007).
  2. Shidham, V. B., Epple, J. AppendiX I: Collection and processing of effusion fluids for cytopathologic evaluation. Shidham, V. B., Atkinson, B. F. , 'Cytopathologic Diagnosis of Serous Fluids' First edition, Elsevier; W.B. Saunders Company. Chapter 15 207-235 (2007).
  3. Shidham, V., Kampalath, B., England, J. Routine air drying of all the smears prepared during fine needle aspiration and intraoperative cytology studies: An opportunity to practice a unified protocol, offering the flexibility of choosing variety of staining methods. Acta Cytologica. (45), 60-68 (2001).

Tags

الطب ، العدد 31 ، جبعة ، FNAB الجميلة إبرة الخزعة الطموح ، والكفاءة ، والإجراءات ، [ستوبثولوج] ، علم الخلايا
إعداد واستخدام الآفات فانتوم الممارسة التشكيلية الخزعات إبرة الطموح
Play Video
PDF DOI

Cite this Article

Shidham, V. B., Varsegi, G. M.,More

Shidham, V. B., Varsegi, G. M., D'Amore, K., Shidham, A. Preparation and Using Phantom Lesions to Practice Fine Needle Aspiration Biopsies. J. Vis. Exp. (31), e1404, doi:10.3791/1404 (2009).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter