Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Biology

Voorbereiding en gebruiken Phantom Letsels aan Fine Needle Aspiration Biopten Practice

Published: September 29, 2009 doi: 10.3791/1404

Summary

Het beoefenen van de fijne naald aspiratie biopsie (FNAB) door stagiairs is relatief uitdagend, vanwege het ontbreken van een gemakkelijk beschikbaar, passend laesie. De voorbereiding van een AV-fantoom laesie voor de uitoefening van FNAB procedure en de mastering vaardigheid is relatief eenvoudig.

Abstract

Momenteel hebben de gezondheid werknemers, met inbegrip bewoners en fellows niet over een geschikt fantoom model om de fijne naald aspiratie biopsie (FNAB) procedure praktijk. In het verleden hebben we gestandaardiseerd een model dat bestaat uit latex handschoen met vers vee lever voor het beoefenen van FNAB. Echter, dit model is moeilijk te organiseren en op korte termijn voor te bereiden, met de aanschaf van vers vee lever is het meest uitdagende aspect. Behandeling van de lever met contaminatie-gerelateerde problemen is ook een belangrijke terug te trekken. Bovendien is het handschoenmateriaal lekken na een paar naald gaat, met als gevolg puinhoop.

We hebben een nieuwe eenvoudige methode van verankering een klein stukje worst of banaan in een commercieel verkrijgbare silicone rubber kalefateren. Dit model maakt het behoud van vacuüm afdichting en aspiratie van materiaal uit de ingebedde monster, die lijkt op een daadwerkelijk FNAB procedure op de klinische massa-laesies.

De aangezogen materiaal in de naald hub kan worden verwerkt vergelijkbaar met de exemplaren aangekocht tijdens een feitelijke FNAB procedure, het vergemakkelijken van extra vaardigheid in het uitstrijkje voorbereiding en vlekken.

Protocol

  1. Voorbereiding van de fantoom laesie (voor te bereiden fantoom ongeveer 38 tot 48 uur voorafgaand aan de feitelijke praktijk sessie van FNA taalvaardigheid (figuur 1) of gebruik klaar om te 'AV Phantom' gebruik van de FNA Bron, USA. Het fantoom laesie (bewaard in de koelkast zonder bevriezing) kan worden gehouden, zelfs 3 tot 4 dagen voor bereid om sessie oefenen.
  2. Oefenen FNA taalvaardigheid: Hoewel we hebben aangetoond dat de procedure met behulp van Shidham's THFV (Tissue Harvester met Functional Valve) (FNA Bron, USA), kan elke andere FNA-systeem worden gebruikt voor het beoefenen van (figuur 2).
  3. Het verspreiden en verwerken van de zuig op het glas dia's (figuur 3).

Gewenste materiaal

  1. Duidelijk silicone rubber kit-beschikbaar bij vele bouw / home improvement winkels. Veel merken zijn beschikbaar, waaronder GETM, DAP, Red Devil, White Lightning, en de lokale keten merken. We gebruikten Clear Silicone Rubber, White Lightning Products, Cleveland, Ohio, USA, http://www.wlcaulk.com/products/all_purpose/silicone_rubber/wl09010.html )
  2. Kitpistool
  3. Een stuk plastic vel (wij gebruikten Saran Cling Plus Wrap, SC Johnson & Son Inc, Racine, WI, USA http://www.saranbrands.com/plastic-wrap/index.asp
  4. Latex handschoenen
  5. Grote diameter banaan of worst.
  6. Stevige en vlakke bodemplaat (ongeveer 6 cm x 6 cm), gemaakt van dik karton, acryl plaat, of andere.
  7. FNA uitvoeren van apparatuur
    • 25 gauge injectienaalden
    • Shidham's THFV (of andere componenten voor het uitvoeren van FNA)
    • objectglaasjes
    • kleuringskits

Stap-voor-stap details

A. Bereiding van fantoom laesie (voor te bereiden Phantom 1 tot 2 dagen voorafgaand aan het beoefenen van FNA taalvaardigheid (figuur 2) of gebruik klaar om te 'AV Phantom' gebruik van de FNA Bron, USA.

  1. Snijd een 6 X 6 inch grootte van de ondersteunende boord.
  2. Snijd een 2,5-inch lange segment van de 'fantoom laesie kern' (banaan of worst).
  3. Verdrijven 0,5 inch dikke laag van kalefateren op de bodemplaat.
  4. Drukt u licht op de 'fantoom laesie kern' in deze laag van kalefateren.
  5. Voeg meer kalefateren over de 'fantoom laesie kern', zodat het volledig is ingebed in de terp van kalefateren, zonder luchtbellen.
  6. Pas en vorm van de kit over 'fantoom laesie kern' met gehandschoende hand.
  7. Neem een ​​6 X 6 inch groot stuk plasticfolie en bedek de kit heuvel en pas het oppervlak van de heuvel in een gladde convexe configuratie met een schone, gehandschoende hand.
  8. Laat het kalefateren heuvel remedie voor 6-8 uur langer dan de genezing van tijd, bedoeld in het product-instructies, (meestal voor 24 uur), op een warme plaats.
  9. Na uitharding dient de kalefateren stevig zijn, en de plastic verpakking kan worden afgepeld gemakkelijk.
  10. De FNA fantoom laesie is klaar om te worden gebruikt voor het beoefenen van de FNA-procedure na ongeveer acht uur als de hele berg van kalefateren volledig is uitgehard naar het centrum met de 'fantoom laesie kern' (banaan of worst).

B. Oefenen FNA vaardigheid op AV Phantom laesie.

Welke aanpak bij het verkrijgen van hoge kwaliteit, moet er een adequate FNA zuigt met een goede kwaliteit cytologie directe uitstrijkjes adres volgende kritische punten-

  1. De naald gauge-zoals wordt gesuggereerd in de titel van de procedure, de fijnere naalden (hoger gauge nummer) tot betere zuigt met een minimum aan bloed verdunnen. Voor kritische balans van voordelen en beperkingen, zijn 22 tot 25 gauge naalden de voorkeur voor een optimale mechanische stabiliteit van de naald zonder dat de FNA-aspiraat kwaliteit.
  2. Controlling juiste sequenties in vacuüm aanvraag en afgifte tijdens de FNA-procedure Dit is cruciaal om in de steekproef opgenomen cellen vooraf met elke slag van de naald, richting de naald hub. Toch moet de afgezogen materiaal niet worden toegestaan ​​om te bereiken in het gebied van de naald aspiratie montage met een spuit. Als dit niet voorkomen, kan het materiaal moeilijk te halen voor het maken van uitstrijkjes (dit materiaal mag, echter wel worden gebruikt voor het celblok bereiding of voor de concentratie methoden zoals Cytospin, filter methoden, of een recent vloeibare cytologie preparaten).
  3. Ontwikkeling van de nodige vaardigheid bij het ​​verwerken van de aangezogen monster, met inbegrip van directe smeren voorbereiding en on-site geschiktheid evaluatie met de juiste triaging voor aanvullende tests, zoals cell-block voorbereiding voor electieve immunocytochemie, electieve flow cytometrie voor de immunofenotypering van lymfoproliferatieve laesies, het indienen van steriel gaat voor microbiologie studies, en de mateRial voor moleculaire tests (cytogenetica, etc.).

Ba uitvoeren FNA procedure (afgebeeld met Shidham's THFV [1] (FNA Bron, USA), maar elk ander FNA-systeem kan worden gebruikt voor het beoefenen van). (Figuur 3,4,5).

  1. Bereid de FNA assemblage met de klep dicht.
  2. Zoek de laesie en steek de punt van de naald in de laesie.
  3. Open de klep om het vacuüm te sluiten, door middel van de naald in de tip, representatief cellulaire componenten van het letsel aspiraat bij elke op en neer slag in de laesie.
  4. Handhaving van de stofzuiger en monster verschillende gebieden van het letsel door het inbrengen van de naald in de laesie in verschillende richtingen.
  5. Sluit de klep om het vacuüm los te koppelen van de naald lumen.
  6. Gelijk de druk aan het omgevingslicht (bv door het losmaken van de spuit-klep van de naald voor een kort moment en weer. Als het speciaal apparaat met ingebouwde stappen, zoals 'THFV' wordt gebruikt, deze en andere stappen van Ba1 tot BA6 zijn gecoördineerde automatisch door het volgen van verschillende stappen in het ventiel systeem) [1].
  7. Verwijder de naald uit de laesie met de klep gesloten, om verlies van het preparaat te voorkomen door capillaire werking in de laesie, tenzij er iets negatieve druk op de hub einde.
  8. Los van de aangezogen inhoud op het glaasje aan direct uitstrijkje (zie hieronder) (figuur 6) voor te bereiden.

Bb. Verwerking van de atmosferische exemplaar met de juiste triage
Het verspreiden van het zuigen op de glazen dia's en het opstellen van goede kwaliteit directe uitstrijkjes (Figuur 6), gevolgd door een goede kleuring en triage (figuur 7,8).

  1. Een druppel te zuigen losgemaakt op het glas dia wordt verspreid door een verscheidenheid van benaderingen zoals weergegeven in (Figuur 6) [2]. De gebruikelijke aanpak is 'a'. Echter, als het monster wordt het bloed verdund met wat microfragments, wordt het overtollige bloed afgevoerd door het kantelen van de dia en de microfragments vervolgens zijn verdeeld tussen deze dia en de tweede glaasje vergelijkbaar met 'een'. Als het aspiraat is voornamelijk een schorsing zonder microfragments, zoals van lymfoproliferatieve laesies, is het verspreiden vergelijkbaar met 'b' of 'c'.
  2. Het uitstrijkje kan worden verwerkt en vastgesteld op verschillende manieren voor verschillende kleuringsmethoden tijdens de on-site toereikendheid evaluatie. Echter, de beste aanpak is om de lucht drogen alle uitstrijkjes. De lucht gedroogd uitstrijkje kan worden gekleurd met Romanowski vlekken (zoals Difff-Quik vlek, Wright vlek) na methanol fixatie of met Pap vlek na zoutoplossing-rehydratatie en post-fixatie (in 95% ethanol of bij voorkeur in 95% ethanol met 5 % azijnzuur) [3]. Eliminatie van storingen als gevolg van de verduisterende bloed is een aanzienlijk voordeel [3].
  3. Afhankelijk van de initiële cytomorphologic bevindingen tijdens on-site adequaatheid evaluatie wordt extra triage (zoals electieve celblok, elektronenmicroscopie, microbiologie culturen, flowcytometrie, moleculaire tests-cytogenetica etc.) aanbevolen, zoals aangeduid.

Representatieve resultaten:

figuur 1
Klik hier om een grotere versie van figuur 1 te zien .
Figuur 1. Materiaal voor het opstellen AV Phantom voor het beoefenen van FNA taalvaardigheid (* We maken gebruik van Saran plastic wikkel die niet houden aan de kit aan het einde, tijdens het verwijderen na volledige uitharding van de kalefateren.)


figuur 2
Klik hier om een grotere versie van figuur 2 te zien.
Figuur 2. Voorbereiden AV Phantom laesie


figuur 3
Klik hier om een grotere versie van figuur 3 te zien.
Figuur 3. Kritische stappen in FNA procedure.


figuur 4
Klik hier om een grotere versie van figuur 4 te zien.
Figuur 4. EUS-FNA-samenvatting van de kritische stappen * (zie figuur 3)


figuur 5
Klik hier om een grotere versie van figuur 5 te zien.
Figuur 5. Valkuilen met betrekking tot de kritische stappen in het FNA procedure.


figuur 6
Klik hier om een grotere versie van figuur 6 te zien.
Figuur 6. Voorbereiding van rechtstreekse uitstrijkjes van FNA monster tussen twee dia's.


figuur 7
Klik hier om een grotere versie van figuur 7 te zien.
Figuur 7. Nat vaste versus lucht gedroogde uitstrijkjes.


figuur 8
Klik hier om een grotere versie van figuur 8 te zien.
Figuur 8. Nat vaste versus lucht gedroogde uitstrijkjes.

Discussion

Fijne naald aspiratie biopsie (FNAB) worden op grote schaal uitgevoerd als een economische, veilige en snelle minimaal invasieve techniek om weefsel diagnose van verschillende tumoren en letsels. In deze procedure een 18-27 gauge naald wordt ingebracht in de laesie, bewoog heen en weer meerdere keren in verschillende delen van het letsel onder gecontroleerde vacuüm (zuiging) van variabele intensiteit, variërend van minimal in de vorm van enige capillaire werking tot ongeveer 10 ml vacuüm in de spuit om diagnostische weefsel materiaal op te halen. Een fijnere naald met een groter aantal is de voorkeur om een ​​goede cytologie materiaal op te halen om directe uitstrijkjes voor te bereiden. Bredere gauge naald van 18G haalt meer monster geschikt voor celblok, flow cytometrie, elektronenmicroscopie, cytogenetica, microbiologie culturen enz. Hoewel de procedure is eenvoudig, het aansturen van diverse stappen met correcte toepassing en het vrijkomen van vacuüm op passende maatregelen in onderling overleg is uiterst cruciaal voor optimale resultaten.

Gevolg van het niet beschikbaar zijn van speciaal ontworpen high-yield naalden, conventionele injectienaalden of hun aanpassingen worden gebruikt om deze procedure uit te voeren. Echter, de injectienaalden hebben veel beperkingen leiden tot een lage opbrengst van het monster als het gebruikt wordt in conventionele manier. De eis van speciale spuit grips geeft meestal aan de complexiteit van de procedure. Dus, te wijten aan het gebrek aan commercieel beschikbare geschikte FNAB naald-apparaat, deze uiterst veelzijdige procedure lijdt een veel voorkomend probleem van onvoldoende exemplaar ophalen. Onlangs is een apparaat dat het verhogen van de opbrengst met de reproduceerbaarheid gerapporteerd [1].

Daarnaast, momenteel is er een gebrek aan geschikte model voor het beoefenen van vaardigheden bij het uitvoeren van FNAB door de gezondheid van personeel in opleiding met inbegrip van bewoners en fellows. We hadden gestandaardiseerd een model met een stuk vers vee lever in latex handschoen gevuld voor het beoefenen van FNAB vaardigheid. Echter, dit model is het moeilijk om te organiseren op een korte termijn. Inkoop van verse koeien lever is meestal de beperkende hachelijke situatie. Daarbij mag de behandeling van lever besmetting factoren terug te introduceren als een belangrijke tekenen. De neiging van de latex handschoen te lekken na een paar naald prikt leidt tot een potentiële puinhoop tijdens de oefensessie.

We brengen verslag uit en beschrijven een roman, maar eenvoudige methode van verankering een klein stukje banaan (of worst) in een commercieel verkrijgbaar siliconenrubber kit en andere gemakkelijk beschikbare materiaal. De FNAB fantoom behoudt vacuum seal waardoor het mogelijk aspiratie van materiaal uit de ingesloten monster, wat overeenkomt met de werkelijke FNAB procedure op een laesie in de klinische setting. In deze video, tonen we de procedure van het maken van FNAB fantoom laesie en het beoefenen van FNAB procedure. Het toont ook in het kort de verwerking van de opgehaalde monster waaronder uitstrijkje voorbereiding en vlekken [2,3].

Omdat de kalefateren heeft tijd nodig om te genezen, moet het fantoom laesie worden voorbereid op voorhand ongeveer 24 tot 48 uur voorafgaand aan het oefenen sessie. Vergelijkbaar klaar voor phantom laesie gebruik kan worden verkregen uit een commerciële bron (FNA Bron, USA).

Het fantoom laesie voor het beoefenen van FNAB vaardigheid kan worden gebruikt voor de opleiding van de bewoners en fellows voor het begin van de FNAB prestaties op patiënten in de klinische setting.

References

  1. Shidham, V. B., Pandit, A. W., Rao, R. N., Basir, Z., Shidham, A. Tissue Harvester with Functional Valve (THFV): Shidham's device for reproducibly higher specimen yield by fine needle aspiration biopsy with easy to perform steps. BMC Clinical Pathology. 7 (2), (2007).
  2. Shidham, V. B., Epple, J. AppendiX I: Collection and processing of effusion fluids for cytopathologic evaluation. Shidham, V. B., Atkinson, B. F. , 'Cytopathologic Diagnosis of Serous Fluids' First edition, Elsevier; W.B. Saunders Company. Chapter 15 207-235 (2007).
  3. Shidham, V., Kampalath, B., England, J. Routine air drying of all the smears prepared during fine needle aspiration and intraoperative cytology studies: An opportunity to practice a unified protocol, offering the flexibility of choosing variety of staining methods. Acta Cytologica. (45), 60-68 (2001).

Tags

Geneeskunde FNA FNAB fijne naald aspiratie biopsie Proficiency procedure cytopathologie cytologie
Voorbereiding en gebruiken Phantom Letsels aan Fine Needle Aspiration Biopten Practice
Play Video
PDF DOI

Cite this Article

Shidham, V. B., Varsegi, G. M.,More

Shidham, V. B., Varsegi, G. M., D'Amore, K., Shidham, A. Preparation and Using Phantom Lesions to Practice Fine Needle Aspiration Biopsies. J. Vis. Exp. (31), e1404, doi:10.3791/1404 (2009).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter