Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Immunology and Infection

الحصول على عالي النقاء المقوسة الغوندية البيضات من قبل التدرج كلوريد السيزيوم متقطع

Published: November 3, 2009 doi: 10.3791/1420

Summary

توضح هذه الدراسة في تطوير أسلوب CSCL المحورة التي تنقي بسهولة T. البيضات الغوندية من براز القطط المصابة التي هي مناسبة لوالأنسجة البيولوجية الجزيئية التلاعب الثقافة

Abstract

المقوسة الغوندية هو إلزام الممرض الذي يصيب الخلايا الأوالي عادة البشر. وهو يتميز أيضا apicomplexan المرتبطة تسبب تفشي الأمراض الغذائية والأمراض التي تنقلها المياه. المضيف النهائي هو النوع الماكر حيث تكرار الجنسي مما أدى إلى حدوث تطور البيضة المتكيسة شديد العدوى ومقاوم للبيئة. تحدث العدوى عن طريق ابتلاع الخراجات الأنسجة من اللحوم الملوثة أو البيضات من التربة أو الماء. العدوى غير متناظرة عادة في الاشخاص الاصحاء ، ولكن النتائج في العدوى الكامنة مدى الحياة التي يمكن أن تسبب التهاب الدماغ بالمقوسات تنشيط والموت إذا كان الفرد يصبح المناعة لحوم ملوثة T. وقد الخراجات الغوندية المصدر الرئيسي للعدوى في أوروبا والولايات المتحدة ، ولكن التغيرات التي حدثت مؤخرا في إدارة تربية الحيوان والممارسات وتحسين مناولة الأغذية وإجراءات التجهيز قد خفضت بشكل كبير من انتشار T. الخراجات الغوندية في اللحوم 1 و 2. ومع ذلك ، فإن الانتشار المصلي في البشر لا تزال مرتفعة نسبيا مما يوحي بأن التعرض البيضة المتكيسة من التربة أو الماء الملوث هو المرجح. في الواقع ، تم التبليغ عن فاشيات من داء المقوسات التي تنقلها المياه في جميع أنحاء العالم تدعم نظرية التعرض لشكل البيضة المتكيسة البيئية يشكل مخاطر صحية كبيرة 3-5. للبحث ، على فهم تاريخ انتشار T. وتقتصر البيضات الغوندية في الماء والبيئة نظرا لعدم وجود أدوات للكشف عن البيضات في البيئة 5 ، 6. هذا يرجع أساسا إلى عدم وجود بروتوكولات تنقية فعالة للحصول على أعداد كبيرة من تخصيبه بدرجة T البيضات الغوندية من القطط المصابة لأغراض بحثية. توضح هذه الدراسة في تطوير أسلوب CSCL المحورة التي تنقي بسهولة T. البيضات الغوندية من براز القطط المصابة التي هي مناسبة لوالأنسجة البيولوجية الجزيئية التلاعب الثقافة 7.

Protocol

Acknowledgments

نود أن نشكر نيكول برينكمان ومايكل وير عن الاستعراض التقني للمخطوطة ، والدكتور سيد أبو ليندا وRansick للحصول على الدعم الفني والإداري. ووصف لحماية البيئة في الولايات المتحدة من خلال مكتبها وكالة للبحوث والانماء الممولة جزئيا وتعاون في مجال البحث هنا في إطار العقد رقم EP - D - 06-096 لشركة ، وعدد Dynamac اتفاق بين الوكالات DW - 12 - 92289801-0 ل وزارة الزراعة الأميركية. فقد تعرضت الوكالة لاستعراض والموافقة على نشرها. أذكر أسماء تجارية أو منتجات تجارية لا تشكل موافقة أو توصية للاستخدام. MJS العنوان الحالي : Dynamac ، وشركة مدينة سينسيناتي بولاية أوهايو.

References

  1. Dubey, J. P. Prevalence of viable Toxoplasma gondii in beef, chicken, and pork from retail meat stores in the United States: risk assessment to consumers. J. Parasitol. 91, 1082-1093 (2005).
  2. Tenter, A. M., Heckeroth, A. R., Weiss, L. M. Toxoplasma gondii: from animals to humans. Int. J. Parasitol. 30, 1217-1258 (2000).
  3. Bowie, W. R. Outbreak of toxoplasmosis associated with municipal drinking water. Lancet. 350, 173-177 (1997).
  4. Moura, L. de Waterborne toxoplasmosis, Brazil, from field to gene. Emerg. Infect. Dis. 12, 326-329 (2006).
  5. Jones, J. L., Dubey, J. P. Waterborne toxoplasmosis - Recent developments. Exp. Parasitol. doi: 10.1016/j.exppara.2009.03.013, (2009).
  6. Dumetre, A., Darde, M. L. How to detect Toxoplasma gondii oocysts in environmental samples. FEMS Microbiol. Rev. 27, 651-661 (2003).
  7. Dumetre, A., Darde, M. L. Purification of Toxoplasma gondii oocysts by cesium chloride gradient. J. Microbiol. Methods. 56, 427-4230 (2004).
  8. Dubey, J. P. Toxoplasmosis of Animals and Man. , 2nd Edition, CRC Press, Inc. Boca Raton, FL. (2009).

Tags

الأمراض المعدية إن الرب ، علم الأحياء الدقيقة ، العدد 33 ، المقوسة الغوندية ، كلوريد السيزيوم ، البيضات ، متدرجة متقطعة ، apicomplexan
الحصول على عالي النقاء<em> المقوسة الغوندية</em> البيضات من قبل التدرج كلوريد السيزيوم متقطع
Play Video
PDF DOI

Cite this Article

Staggs, S. E., See, M. J., Dubey, J. More

Staggs, S. E., See, M. J., Dubey, J. P., Villegas, E. N. Obtaining Highly Purified Toxoplasma gondii Oocysts by a Discontinuous Cesium Chloride Gradient. J. Vis. Exp. (33), e1420, doi:10.3791/1420 (2009).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter