Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Immunology and Infection

קבלת מטוהרים Toxoplasma gondii שביצים ידי Gradient כלוריד רציפה וצזיום

Published: November 3, 2009 doi: 10.3791/1420

Summary

מחקר זה מתאר את התפתחות שיטת CsCl שונה בקלות מטהר ט שביצים gondii מצואה של חתולים נגועים המתאימים ביולוגית מולקולרית תרבות מניפולציה רקמה

Abstract

Toxoplasma gondii הוא הפתוגן לחייב protozoan תאיים כי בדרך כלל מדביק בני אדם. זהו apicomplexan מאופיין היטב הקשורים בגרימת מזון ומים נישאים להתפרצות מחלות. המארח הוא סופי מינים של חתולים היכן שכפול מינית מתרחשת וכתוצאה מכך להתפתחות oocyst מדבקת מאוד עמיד לסביבה. ההדבקה מתרחשת באמצעות בליעה של ציסטות רקמה בשר או שביצים מזוהם מן האדמה או מים. הזיהום הוא בדרך כלל ללא תסמינים אצל אנשים בריאים, אבל התוצאה היא זיהום לאורך החיים סמוי כי ניתן להפעיל מחדש את דלקת קרום המוח ולגרום למוות toxoplasmic ואם הפרט הופך immunocompromised. בשר מזוהם עם ט ' ציסטות gondii היו המקור העיקרי לזיהום באירופה וארצות הברית, אבל השינויים האחרונים בהנהלת חיה ושיטות חקלאות וטיפול מזון משופר ונהלים עיבוד צמצמו משמעותית את שכיחות ט gondii ציסטות 1 בשר, 2. עם זאת, seroprevalence בבני אדם נותר גבוה יחסית שמראה כי חשיפה מהקרקע מים מזוהמים oocyst או סביר. ואכן, התפרצויות waterborne של טוקסופלזמוזיס דווחו ברחבי העולם התומכים בתיאוריה חשיפה לטופס oocyst הסביבה מהווה סיכון בריאותי משמעותי 3-5. מחקר כה, על הבנה השכיחות של ט ' שביצים gondii במים ואיכות הסביבה מוגבלים בשל העדר של כלים לגילוי שביצים בסביבה 5, 6. זה בעיקר בשל היעדר פרוטוקולים טיהור יעיל להשגת מספר גדול של מטוהרים מאוד T שביצים gondii מחתולים נגועים למטרות מחקר. מחקר זה מתאר את התפתחות שיטת CsCl שונה בקלות מטהר ט gondii שביצים מצואה של חתולים נגועים המתאימים ביולוגית מולקולרית בתרבית רקמה מניפולציה 7.

Protocol

Acknowledgments

ברצוננו להודות ניקול ברינקמן ומיכאל ור לבדיקה טכנית של כתב היד ואת ד"ר אבו סייד ולינדה Ransick לקבלת תמיכה טכנית ומנהלית. ארצות הברית הסוכנות להגנת הסביבה באמצעות משרד של מחקר ופיתוח במימון חלקי שיתפו פעולה במחקר המתואר כאן תחת חוזה מספר EP-D-06-096 כדי Dynamac, Inc הסכם interagency מספר DW-12-92289801-0 ל משרד החקלאות. זה כבר נתון לביקורת הסוכנות ואושר לפרסום. אזכור של שמות מסחריים או מוצרים מסחריים אינו מהווה המלצה או המלצה לשימוש. MJS הכתובת הנוכחית: Dynamac, Inc בסינסינטי, אוהיו.

References

  1. Dubey, J. P. Prevalence of viable Toxoplasma gondii in beef, chicken, and pork from retail meat stores in the United States: risk assessment to consumers. J. Parasitol. 91, 1082-1093 (2005).
  2. Tenter, A. M., Heckeroth, A. R., Weiss, L. M. Toxoplasma gondii: from animals to humans. Int. J. Parasitol. 30, 1217-1258 (2000).
  3. Bowie, W. R. Outbreak of toxoplasmosis associated with municipal drinking water. Lancet. 350, 173-177 (1997).
  4. Moura, L. de Waterborne toxoplasmosis, Brazil, from field to gene. Emerg. Infect. Dis. 12, 326-329 (2006).
  5. Jones, J. L., Dubey, J. P. Waterborne toxoplasmosis - Recent developments. Exp. Parasitol. doi: 10.1016/j.exppara.2009.03.013, (2009).
  6. Dumetre, A., Darde, M. L. How to detect Toxoplasma gondii oocysts in environmental samples. FEMS Microbiol. Rev. 27, 651-661 (2003).
  7. Dumetre, A., Darde, M. L. Purification of Toxoplasma gondii oocysts by cesium chloride gradient. J. Microbiol. Methods. 56, 427-4230 (2004).
  8. Dubey, J. P. Toxoplasmosis of Animals and Man. , 2nd Edition, CRC Press, Inc. Boca Raton, FL. (2009).

Tags

מחלות זיהומיות יופיטר מיקרוביולוגיה גיליון 33 Toxoplasma gondii צזיום כלוריד שביצים שיפוע רציפה apicomplexan
קבלת מטוהרים<em> Toxoplasma gondii</em> שביצים ידי Gradient כלוריד רציפה וצזיום
Play Video
PDF DOI

Cite this Article

Staggs, S. E., See, M. J., Dubey, J. More

Staggs, S. E., See, M. J., Dubey, J. P., Villegas, E. N. Obtaining Highly Purified Toxoplasma gondii Oocysts by a Discontinuous Cesium Chloride Gradient. J. Vis. Exp. (33), e1420, doi:10.3791/1420 (2009).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter