Summary
Questo studio descrive lo sviluppo di un metodo modificato CsCl che purifica facilmente T. gondii oocisti dalle feci di gatti infetti che sono adatti per biologia molecolare e la cultura manipolazione dei tessuti
Abstract
Toxoplasma gondii è un protozoo intracellulare obbligato patogeno che infetta i comuni esseri umani. Si tratta di un Apicomplexa ben caratterizzato associati causando epidemie alimentare e idrica. L'ospite definitivo è la specie felina in cui la replica sessuale si verifica con conseguente sviluppo delle oocisti altamente infettiva e ambientale resistente. L'infezione avviene attraverso l'ingestione di cisti tessuto da carni contaminate o oocisti dal suolo o acqua. L'infezione è generalmente asintomatica nei soggetti sani, ma i risultati in una vita lunga infezione latente che può riattivare toxoplasmic causare l'encefalite e la morte se l'individuo diventa immunocompromessi. Carne contaminata con T. cisti gondii sono stati la fonte primaria di infezione in Europa e negli Stati Uniti, ma i recenti cambiamenti nella gestione degli animali e le pratiche di allevamento e manipolazione degli alimenti migliorata e le procedure di lavorazione hanno ridotto notevolmente la prevalenza di T. cisti gondii in carne 1, 2. Tuttavia, sieroprevalenza negli esseri umani rimane relativamente elevata suggerisce che l'esposizione da oocisti suolo o acqua contaminati è probabile. Infatti, i focolai all'acqua della toxoplasmosi sono stati segnalati in tutto il mondo a sostegno della teoria esposizione alla forma oocisti ambientale rappresenta un rischio significativo per la salute 3-5. Ad oggi, la ricerca sulla comprensione della prevalenza di T. oocisti gondii in acqua e l'ambiente sono limitate a causa della mancanza di strumenti per rilevare oocisti nell'ambiente 5, 6. Ciò è dovuto principalmente alla mancanza di protocolli di purificazione efficiente per ottenere un gran numero di oocisti altamente purificato T gondii da gatti infetti per scopi di ricerca. Questo studio descrive lo sviluppo di un metodo CsCl modificato che purifica facilmente T. gondii oocisti dalle feci di gatti infetti che sono adatti per biologia molecolare e della cultura manipolazione dei tessuti 7.
Protocol
Acknowledgments
Vorremmo ringraziare Nichole Brinkman e Michael Ware per la revisione tecnica del manoscritto e il dottor Abu Sayed e Linda Ransick per il supporto tecnico e amministrativo. La United States Environmental Protection Agency attraverso il suo Ufficio di Ricerca e Sviluppo in parte finanziato e collaborato alla ricerca descritta qui il numero del contratto EP-D-06-096 a Dynamac, Inc. e un numero di contratto tra agenzie DW-12-92289801-0 a USDA. E 'stato sottoposto a revisione dall'Agenzia e approvato per la pubblicazione. La citazione di nomi commerciali o di prodotti commerciali non costituisce approvazione o la raccomandazione per l'uso. MJS attuale indirizzo: Dynamac, Inc. Cincinnati, OH.
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