Obtener altamente purificada Toxoplasma gondii Los ooquistes por un gradiente de cloruro de cesio discontinua

Summary

Este estudio describe el desarrollo de un método modificado de CsCl que fácilmente se purifica T. gondii ooquistes en las heces de gatos infectados que son adecuados para la biología molecular y la manipulación de cultivo de tejidos

Abstract

Toxoplasma gondii es un patógeno protozoario intracelular obligado que comúnmente infecta a los seres humanos. Se trata de un apicomplejo bien caracterizados asociados con la causa de los brotes de los alimentos y por el agua-enfermedad. El huésped definitivo es la especie de felino en la replicación sexual se produce como resultado el desarrollo de los ooquistes altamente infecciosa y resistente al medio ambiente. La infección se produce a través de la ingestión de quistes en los tejidos de la carne contaminada o los ooquistes del suelo o del agua. La infección suele ser asintomática en individuos sanos, pero los resultados de una infección latente de por vida que puede reactivarse causando encefalitis toxoplásmica y la muerte si el individuo se convierte en inmunocomprometidos. La carne contaminada con T. quistes gondii han sido la fuente principal de infección en Europa y los Estados Unidos, pero los cambios recientes en el manejo de los animales y las prácticas de cría y manejo de alimentos y procedimientos mejorados de procesamiento han reducido significativamente la prevalencia de T. gondii quistes en la carne de ^{1, 2.} Sin embargo, la seroprevalencia en los seres humanos sigue siendo relativamente alta lo que sugiere que la exposición del suelo ooquistes o agua contaminada es probable. De hecho, los brotes de agua de la toxoplasmosis se han reportado en todo el mundo el apoyo a la exposición de la teoría a la forma de ooquistes del medio ambiente representa un riesgo significativo para la salud ^5.3. Hasta la fecha, la investigación en la comprensión de la prevalencia de T. ooquistes gondii en el agua y el medio ambiente son limitados debido a la falta de herramientas para detectar ooquistes en el medio ambiente ^{5, 6.} Esto se debe principalmente a la falta de protocolos de purificación eficientes para la obtención de un gran número de alta pureza T gondii ooquistes de gatos infectados con fines de investigación. Este estudio describe el desarrollo de un método modificado de CsCl que fácilmente purifica T. gondii ooquistes provenientes de heces de gatos infectados que son adecuados para la biología molecular y la manipulación de cultivo de tejidos ^7.

Protocol