Summary
Abstract
Агрессия врожденное поведение, которые развились в рамках защиты или получения ресурсов. Это сложное социальное поведение находится под влиянием генетических, гормональных и экологических факторов. Во многих организмов, агрессия имеет решающее значение для выживания, но контроль и пресечение агрессии в различных контекстах также приобретает все большее значение. В последние годы, беспозвоночные становятся все более полезными в качестве модельных систем для исследования генетических и биологических системах основе комплексного социального поведения. Отчасти это происходит из-за разнообразных репертуар поведения этих организмов. В сопроводительном видео, мы наметим метод анализа агрессии у дрозофилы, конструкция которого включает в себя важные эко-этологических ограничений. Подробнее включать меры для: создание боевых камеры; изоляция и покраска мухи, добавив летит в борьбе камеры, и видео съемка драки. Этот подход в настоящее время используется для идентификации генов-кандидатов важно в агрессии и в разработке нейронной цепи, лежащей в основе выхода агрессии и других форм социального поведения.
Protocol
1. Сборка стенок камеры
- Возьмем два простых стеклянные пластинки, марки среднего на два ребра и используя прямые краем правителя в качестве руководства, оценка стекла с резаком алмаза.
- Слайд алмазный резак туда и обратно несколько раз, пока не услышите шум выскабливание.
- Мойте стекло, и удерживая ее с двумя бумажными полотенцами за сломанной сосуд стеклом, применять нежные близкие давление забил с линии забил стороне
от себя сломать слайд на две половины. - Щедро применять стекло клей вдоль края одного куска стекла и нажмите второй кусок стекла от клея под прямым углом к первой части. Место вниз на плоской поверхности (алюминиевая фольга, вощеной бумаги или обычной бумаге) и позволяют установить, по крайней мере час.
- Через час, повторить применение клея шаг, чтобы сформировать квадрат камеры и дать затвердеть в течение ночи.
2. Размещение стен в чашке Петри
- Возьмите верхней части чашки Петри и заполнить на глубину не менее 5 мм с подогревом раствора 2% агарозном (микроволновая агарозы в деионизованной воде, пока она полностью растворяется).
- Подождите несколько минут, но в то же время растворения, место стенок камеры в центре блюда. Возьмите нижней части чашки Петри, положите его нижней стороной вверх. Использование пламени нагревается прямо рассекает иглы, делают множество мелких отверстий (> 1 мм) в центре блюда для вентиляции. Сделать большое отверстие (~ 4 мм в диаметре) чуть в сторону введения летит в камеру. Место кусок ленты съемные этикетки на большую дыру.
3. Создание пищи чашкой
- Тепло флакон летать пищи до точки, где пищи не расплавится. Используйте пипетку Пастера для передачи пищи сцинтилляционный флакон закрытия наполняя его сформировать плоскую поверхность на самом верху. Будьте осторожны, чтобы избежать воздушных пузырей и дать остыть.
- Сделать свежих дрожжей пасты путем измельчения небольшого количества сухих дрожжей и несколько капель воды в ступку и пестик. Добавить больше дрожжей и воды до консистенции достаточно толстый, чтобы позволить небольшой видимый падение будет подхвачена зубочистку и применяется к центру пищи поверхности.
- Место флакон пищи в центре камеры и разместить в нижней части чашки Петри, перевернутый, чтобы стороны и не затемняя зрения, на верхней части камеры. Введем две 3-5 дневных мух стремлением в камеру через большое отверстие в верхней части. Обложка этой дыре с лентой и поместите кусок черного фильтровальной бумаги с 2 см отверстие в его в верхнюю блюдо.
- Место настольная лампа над камерой, достаточно далеко, что он не будет тепла камеры и располагаться так, чтобы она загорится пищи поверхности. Вся сборка в идеале должны быть размещены в среде с высокой влажностью и температурой 22-25 ° С.
4. Начало видеозаписи через переднюю стенку камеры, когда обе мухи на foodsurface.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
